重组葡萄球菌肠毒素B蛋白表达、纯化及生物活性的实验研究

 目的建立重组葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)表达、纯化方法,了解rSEB细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长的作用。方法采用IPTG(1.0mmol·L^-1)诱导SEB原核表达系统pET32a-SEB-E.coliBL21DE3表达rSEB,10%SDS-PAGE检测其产量,Ni-NTA亲和色谱法纯化rSEB。采用Vero细胞测定rSEB的细胞毒性作用,并计算TCIC₅₀值。通过MTT法分别检测不同浓度rSEB体外促淋巴细胞增殖作用,以及对肿瘤细胞株HepG2、HeLa的生长抑制作用。结果所构建的SEB原核表达系统中,rSEB表达量约为细菌总蛋白的40%,主要以包涵体形式存在。纯化的rSEB对Vero细胞的TCIC₅₀为3.02μg。5.0～20.0mg·L^-1的rSEB对小鼠脾细胞和人PBMC均有明显的促增殖作用(P<0.05)。5.0～20.0mg·L^-1rSEB作用的人PBMC上清均能有效地抑制HepG2细胞和HeLa细胞生长(P<0.05)。结论建立了SEB高效表达、纯化方法,获得rSEB蛋白。所建立的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用的检测方法,为后续进一步分析SEB分子中相关活性位点及其减毒SEB突变体的筛选奠定了基础。     

谈中小医院医学计量工作

医学计量是确保医院使用的医疗设备准确、有效、安全可靠的必要手段,也是医院管理工作的一个重要组成部分,本文就中小医院在医学计量工作方面存在的主要问题及应采取的对策谈谈自己的看法。     

硬膜外导管支撑断端吻合下泪小管手术37例

目的：总结硬膜外导管为断端支撑物行下泪小管吻合术的体会。方法：回顾手术过程，随访泪小管吻合术37例进行分析。结果：在37例患中成功32例，成功率86％，其中3例因术中未找到泪小管鼻侧断端而失败。结论：以硬膜外导管作为断端支撑物行泪小管吻合术，关键是寻找断端，该方法简便，手术成功率高，便于基层医院及初学掌握。     

支气管哮喘患儿血清可溶性细胞间黏附分子-1的变化及其临床意义

目的　探讨血清可溶性细胞间黏附分子 - 1(sICAM - 1)在支气管哮喘患儿发病机制中的作用。方法　测定 4 6例支气管哮喘患儿急性发作期血清sICAM - 1的水平 ,其中有 2 8例测定了恢复期血清sICAM - 1的水平 ,同时以 2 0例正常儿童血清sICAM - 1作对照。结果　支气管哮喘患儿血清sICAM - 1在急性期和缓解期均较对照组升高 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。重度哮喘发作患儿较轻、中度发作升高更显著 (P <0 0 1)。结论　sICAM- 1参与了支气管哮喘的发病 ,可作为判断病情严重程度的重要指标之一。     

卵巢癌中P—糖蛋白的表达与预后的关系研究

目的：探讨卵巢癌多药耐药基因产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）的表达与上皮性卵巢癌患者预后的关系。方法：用免疫组织化学方法（ＳＰ法）对用福尔马林固定、石蜡包埋的３０例正常卵巢组织及７４例卵巢癌组织进行了Ｐ－ｇｐ检测。结果：３０例正常卵巢组织中,Ｐ－ｇｐ无１例阳性,而卵巢癌组织中Ｐ－ｇｐ阳性率为１８．９％（１４／７４）。对６２例卵巢癌患者随访资料进行Ｋａｐｌａｎ－ｍｅｉｅｒ曲线分析,发现Ｐ－ｇｐ阳性组的存活     

青香茅挥发油β-环糊精包合工艺的研究

目的：提取青香茅挥发油,优选青香茅挥发油β-环糊精包合物的包合工艺。方法：以水蒸气蒸馏法提取青香茅挥发油,采用饱和水溶液法,通过L9（34）正交实验设计优选青香茅挥发油-β-环糊精包合物的制备工艺。结果：优选出的最佳工艺是：β-CD与青香茅挥发油投料比为1∶10,包合物温度40℃,包合时间1h,β-CD与水的体积比1∶8。结论：青香茅挥发油包合工艺重现性好,工艺稳定可行。     

陕西省妇女生育率变化影响因素研究

目的分析影响陕西省育龄妇女生育率变动的因素,为改善和制定现行计生政策提供依据。方法根据陕西省第六次人口普查资料,采用相关分析、多元回归分析等统计学方法,对文盲率、死亡率、人口密度、城镇化率、农民人均纯收入、城镇居民人均可支配收入等六个因素进行分析,观察其对生育率变动的影响。结果相关分析显示,总和生育率与文盲率和总死亡率呈显著的正相关关系,与城镇化率和农民人均纯收入呈显著的负相关关系;多元线性回归分析显示,城镇化率、农民收入和总死亡率均通过了对总和生育率的显著性检验;时间序列分析显示,城镇化率和农民收入呈现明显上升趋势,死亡率呈缓慢下降趋势。结论对生育率有显著影响的代表性因素有城镇化率、农民收入和死亡率;它们未来的发展趋势将引起总和生育率进一步减少。     

麻醉因素与术后肺部感染的相关性分析

目的分析麻醉相关因素对术后肺部感染的影响,以降低术后感染率。方法回顾性分析2013年6月-2014年6月在医院外科进行全麻的685例手术患者临床资料,统计其性别、年龄、科室、麻醉方式、麻醉时间等病历资料,分析术后肺部感染的相关因素。结果 685例手术患者发生术后肺部感染76例,感染率为11.09%;除了与性别因素无相关性外,年龄、科室种类、麻醉方式、麻醉时间、手术时间、基础疾病因素与术后肺部感染均有显著的影响(P<0.05);76例术后肺部感染的患者中共分离鉴定病原菌55株,其中革兰阴性菌38株占69.09%,革兰阳性菌12株占21.82%,真菌5株占9.09%。结论选择合适的麻醉方式,使用一次性过滤器、喉镜、吸氧面罩、呼吸回路、围术期应用抗菌药物均可显著降低麻醉引起的术后感染率。     

腹腔镜与开腹直肠癌根治术围手术期并发症及预后比较

目的：比较分析腹腔镜与开腹直肠癌根治术围手术期并发症发生率及预后。方法对安徽医科大学第一附属医院2009年2月至2011年5月施行腹腔镜直肠癌根治术(腹腔镜组,72例)和开腹直肠癌根治术(开腹组,125例)患者的围手术期并发症发生率及预后进行比较分析。结果腹腔镜组与开腹组的总并发症发生率、术中并发症及3年生存率差异无统计学意义(P>0．05);腹腔镜组术后并发症发生率低于开腹组,差异有统计学意义(P<0．05)。结论腹腔镜和开腹直肠癌根治术均可以达到较好远期预后,腹腔镜手术不增加术中并发症风险,术后并发症总发生率低于开腹手术。     

郑州市中原区汉族育龄女性MTHFR和MTRR基因多态性

目的利用基因检测技术筛查出育龄女性叶酸利用能力差的高风险人群,指导育龄女性合理补充叶酸。方法通过荧光定量PCR,对2017年12月至2018年10月采集的2652例郑州市中原区育龄女性进行5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C667T、A1298C位点和甲硫氨酸合酶还原酶(MTRR)A66G位点的基因型测定,并与其他地区人群基因型和等位基因频率分布进行比较,然后根据基因型综合判断育龄女性叶酸代谢能力强弱,由此得出育龄女性是否有叶酸补充风险及风险级别。结果检测的MTHFR C667T位点中,野生型(CC)、杂合突变型(CT)及纯合突变型(TT)分别占15.05%、46.60%和38.35%,突变基因T的基因频率为61.65%;不同年龄组(≤30和>30岁)均以杂合突变型为主。MTHFR A1298C位点中分别为74.55%、23.49%和1.96%,突变基因C的基因频率为13.71%;不同年龄组(≤30和>30岁)均以野生型为主。MTRR A66G位点中分别为57.43%、36.73%和5.84%,突变基因G的基因频率为24.21%;不同年龄组(≤30和>30岁)均以野生型为主。结论郑州地区育龄女性MTHFR C677T基因多态性分布与地域有相关性,超过50%以上的育龄女性携带高风险基因。因此,对叶酸代谢基因多态性检测高风险孕妇合理增补叶酸剂量,可进一步降低新生儿出生缺陷。