RGD肽表面修饰壳聚糖载基因纳米粒子的体外实验研究

目的 将Arg-Gly-Asp(RGD)肽偶联到壳聚糖(cH)材料表面,并制备成包载质粒DNA的纳米粒子,以未偶连RGD的壳聚糖载质粒DNA作为对照,进行体外内皮细胞转染,观察其是否能提高对内皮细胞的转染效率.方法 以1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS)为偶联剂,通过酰胺键将RGD肽偶联到壳聚糖表面,对其进行表征,并以未偶连RGD的壳聚糖作为对照,制备载pEGFP-C1质粒DNA纳米粒子,比较2者对Hy926细胞的转染效率.结果 壳聚糖-RGD(CH-RGD)载基因纳米粒子转染Hy926细胞的效率明显高于未偶连RGD的壳聚糖载基因纳米粒子(35.7%vs 14.3%,P<0.001).结论 RGD肽表面修饰壳聚糖载基因纳米粒子可用于体外细胞转染,其对细胞的转染效率明显优于未偶连RGD的壳聚糖.     

PD-L2剪切异构体与EGFP融合蛋白的表达及其亚细胞定位研究

目的　探讨PD L2的剪切异构体在哺乳动物细胞的表达和亚细胞定位。方法　以RT PCR方法克隆人PD L2基因的常规剪切体和新型剪切异构体的cDNA ,构建其与EGFP融合的表达载体 ,分别转染K5 6 2细胞进行表达 ,经抗PD L2抗体染色后以流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析融合蛋白的表达及其亚细胞定位。结果　从活化的人白细胞中克隆到常规剪切体PD L2Ⅰ和新型剪切异构体PD L2Ⅱ的cDNA ,后者删除了编码胞外区Ig C结构域的外显子 3。进而构建了PD L2Ⅰ EGFP和PD L2Ⅱ EGFP融合蛋白表达载体 ,分别转染K5 6 2细胞。流式细胞仪分析显示 ,转染前者的细胞中既可检测到EGFP的表达又可在细胞膜上检测到PD L2表达 ;而转染后者的细胞中只能检测到EGFP的表达 ,在其细胞膜上不能检测到PD L2表达。共聚焦显微镜观察显示 ,PD L2Ⅰ EGFP主要分布于细胞膜表面 ,PD L2Ⅱ EGFP则主要分布于细胞内。结论　常规剪切体PD L2Ⅰ能正确定位于细胞膜表面 ,而新型剪切异构体PD L2Ⅱ则位于细胞内 ,不能运输至细胞膜 ,提示不同PD L2剪切异构体可能与其功能的调变有关     

当真爱靠近

从国外回来,梅宇虽然凭着经济学硕士学位谋到一份职业,但落脚之处却成了问题,幸好有多年好友霜霜的仗义收留。     

新型mucA基因突变的铜绿假单胞菌生物被膜的形成和藻酸盐相关基因表达的研究

目的 确定黏液型铜绿假单胞菌PA17的mum基因突变位点，研究藻酸盐合成相关基因在其生物被膜形成过程中的表达，并观察PAl7生物被膜形成过程和形态。方法 PCR方法扩增铜绿假单胞菌PA17的mueA基因全长并测序；改良平板培养法建立PA17的生物被膜模型，半定量RT-PCR测定生物被膜形成24h、3d．6d时藻酸盐合成相关基因,algD、algU和algR的表达，并进行统计学分析；扫描电镜观察不同时间点的生物被膜形态。结果 PA17的mucA基因第166～333位核苷酸片段缺失，第342位A→G；其藻酸盐相关基因algD和algU均在生物被膜形成过程的第6天表达水平最高，algR在24h表达最高，单因素方差分析显示，上述基因在生物被膜形成过程不同时间点表达的差异有统计学意义；PA17于第6天形成成熟生物被膜，形态为薄膜状。结论 PA17是一株含新型mucA突变基因的黏液型铜绿假单胞菌，其藻酸盐相关基因在生物被膜形成的不同时间点的表达差异具有统计学意义，其生物被膜形态为薄膜状。     

医疗设备准入评估模型设计与实践

按照世界卫生组织医疗器械技术序列《采购流程与资源指南》中医疗器械标准购置流程,以微型卫生技术评估(Mini-HTA)、VAC价值分析评估以及项目评估模型为依据,建立了标准且完整的医疗设备医院层级准入评估模型。该模型主要包括技术评估、效益评估、安全评估以及附件因素评估等四项指标,以实际证据为依据,采用定性、定量相结合的方式对医疗设备进行评估。应用该模型,对医院2019年50万元以上医疗设备进行准入评估,认为可有效优化医院资源配置,为医疗设备购置决策提供依据。     

医疗器械临床试验准入评估模型构建及应用

依据《医疗器械临床试验质量管理规范》,参考丹麦卫生技术评估中心制定的Mini-卫生技术评估清单,结合医院实际,建立了医疗器械临床试验准入评估模型。该模型主要包括医院评估、器械评估、患者评估、机构评估及经济评估等5项指标、26项内容。实际应用中,确保了所承接的临床试验能在规定时间节点内顺利完成,并保障了试验质量和受益者权益。     

医疗机构护理人员肌肉骨骼患病现况及影响因素研究

目的 调查医院护理人员肌肉骨骼患病情况并分析影响因素,指导制定有效的干预措施。方法 于2021年2—6月采用肌肉骨骼疾患调查表评估郑州市二级及以上医院护理人员肌肉骨骼患病情况,同时参照快速上肢评估方法评估人体工效学负荷等级,收集护理人员的人口学资料等,分析肌肉骨骼疾患发生的影响因素。结果 最终纳入1 031名护理人员,肌肉骨骼患病率为77.21%,以颈、肩、腰部患病更多见。多因素Logistic回归分析结果显示年龄（OR=1.520）、BMI≥24.0 kg/m²（OR=1.960）、有生育过（OR=1.114）、工龄（OR=2.208）、医院级别（OR=2.751）、科室（内科：OR=0.451、儿科：OR=0.671、妇产科：OR=0.184、急诊：OR=2.487、其他科室：OR=0.191）、人体工效学负荷等级（OR=2.560）是医院护理人员肌肉骨骼患病的影响因素。结论 医院护理人员肌肉骨骼患病率处于较高水平,受到多种因素影响,应当针对性采取干预措施帮助护理人员减少不良工作姿势、改善工作环境,降低肌肉骨骼患病率,提高医护人员身体健康水平。     

浅谈神经病学临床思维能力的培养

临床实习阶段是由理论转入实践的阶段 ,是巩固医学基础知识 ,进行临床实践 ,培养临床技能的重要阶段 ,是医学生转向医生的关键时期。临床技能包括病历书写、基本操作和临床思维 ,正确的临床思维是对疾病作出正确诊治的关键。1　培养临床思维能力的重要性　　在疾病的诊治过程中 ,始终贯穿着临床思维。所谓临床思维是临床医师在诊治疾病过程中 ,利用所获得的有关疾病的病史 ,体征 ,辅助检查等资料 ,结合自已的专业知识和临床经验 ,用一定的思维方法来分析、综合判断 ,最后达到正确诊断治疗疾病的思维过程。临床思维是疾病正确诊断的关键。临…     

基于中医药整合药理学和转录组学探究丹栀逍遥散防治焦虑肝郁化火证的作用机制

目的 基于中医药整合药理学和转录组学探究丹栀逍遥散防治焦虑肝郁化火证的作用机制。方法 采用中医药整合药理学研究平台v2.0,检索并获取丹栀逍遥散的活性成分及靶标、焦虑肝郁化火证靶标信息,构建中药-成分-靶点-通路网络。将交集基因导入String数据库,构建交集靶点的蛋白互作网络,以确定最终需要验证的靶标。利用GEO数据库转录组学验证整合网络药理学结果,同时采用动物实验进行验证。结果 共筛选出与焦虑肝郁化火证相关的靶标13个,丹栀逍遥散活性成分430种。整合药理学结果显示,丹栀逍遥散防治焦虑肝郁化火证主要通过调控α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸受体（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid receptor,AMPAR）、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartic acid,NMDA）受体的激活及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositide 3-kinases,PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B,...     

“十三五”以来广西村卫生室卫生资源配置公平性分析

目的 评价广西“十三五”以来村卫生室卫生资源配置公平性,为优化村卫生室卫生资源配置提供依据。方法 运用洛伦兹曲线、基尼系数、泰尔指数,从人口和地理两个角度,分析2016—2019年广西村卫生室卫生资源配置状况及公平性。结果 2016—2019年,广西村卫生室卫生资源数量逐年减少并低于同期全国、东部、中部和西部平均水平。桂北与桂东地区卫生资源拥有量较高,桂西地区较少。各卫生资源指标的基尼系数按人口分布在0.113 2～0.484 3之间;按按地理分布在0.371 7～0.652 6之间。总泰尔指数在0.225 2～0.791 6之间,区域内的泰尔指数贡献率大于区域间。结论 广西村卫生室卫生资源总量不足,分布存在地区差异;卫生资源配置按人口分布的公平性优于按地理分布;卫生资源配置的不公平性主要受区域内差异的影响。