人β防御素-2与前列腺癌特异性膜抗原嵌合蛋白真核表达质粒构建及其诱导的小鼠特异性免疫应答

探索人β防御素2 (h BD- 2 )和前列腺特异性膜抗原(PSMA)共表达重组核酸疫苗针对前列腺癌的免疫治疗。研究以pc DNA3.1为载体,构建重组质粒pc DNA3.1/PSMA和pc DNA3.1/h BD- 2 - PSMA,通过RT- PCR和免疫组化检测其表达。免疫小鼠后,进行血清中抗体检测,CD4 、CD8 T淋巴细胞数目测定及CTL 特异性杀伤作用检测。结果显示构建的质粒转染COS- 7细胞后能表达目的基因,免疫小鼠后能在体内持久表达,可以诱导产生特异性抗体,能有效的刺激T细胞增生,诱导特异性CTL 反应。当以h BD- 2作为免疫佐剂时,CTL 活性更强。本研究成功的构建了含PSMA的表达质粒,免疫小鼠可以诱导出有效的体液和细胞免疫,为前列腺癌的免疫治疗奠定了一定的实验基础     

血清脂肪酶测定研究进展

脂肪酶(lipase，甘油三酯水解酶，EC3．1．1．3)是一类特殊的分解脂肪的酯键水解酶，同时它也是仅有的一种专门在异相系统或水不溶性系统的底物-水界面上快速催化反应的酶，对均匀分散的或水溶性底物却无作用即使作用也极缓慢。 脂肪酶是最早研究的酶类之一，但由于脂肪酶的结构及……     

离心甩片法检测脑脊液中抗酸杆菌的应用价值

目的：评价离心甩片法检测脑脊液抗酸杆菌（AFB）的应用价值。方法：应用离心甩片法和常规方法对167例结核性脑膜炎患者（结脑组）和68例非结脑患者（对照组）的脑脊液检测AFB,比较两种方法阳性率的差别。结果：结脑组AFB的阳性率,离心甩片法为62.9%、常规方法为12.6%,两种方法的阳性率有统计学差异（P〈0.01）。68例对照组的脑脊液均未查出AFB阳性结果。结论：离心甩片法检测脑脊液AFB的特异性与常规方法一致而阳性率远高于常规方法,可替代常规方法开展应用。     

组合式气管导管在机械通气中的应用研究

目的 探讨组合式气管导管声门下引流对机械通气时呼吸机相关性肺炎(VAP)的影响.方法 将需要气管插管机械通气48 h以上的患者随机分为两组,A组采用普通气管导管,B组采用组合式气管导管并定期行声门下引流.观察两组间患者VAP的发生情况并做统计学分析.结果 治疗A组VAP的发生率明显高于治疗B组.结论 避免VAP的危险因素是降低VAP发生率行之有效的措施.组合式气管导管的临床应用能有效地清除声门下分泌物,降低细菌在呼吸道定植率,是预防VAP比较有效的措施.     

血液净化技术在ICU急性肾功能衰竭的应用

目的：探讨ICU复杂性急性肾功能衰竭（ARF）血液净化治疗模式的选择及疗效和并发症。方法：回顾性分析1999年1月-2001年12月在我院ICU收治的20例ARF患的血液净化治疗情况。比较不同治疗模式的疗效的并发症。结果：5例接受普通间歇性血液透析（IHD）治疗。3例治愈，2例死亡。血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）和血钾透析后均明显下降，但透析间期波动大。补充的液体量受限制。2例透析后出现严重的并发症并死亡。13例行连续性肾脏替代治疗（CRRT），血BUN、Cr和血钾缓慢下降，波动小，并能持续于较低水平。允许补充大量液体和静脉营养。CRRT还能改善血流动力学状态，不加重脑水肿患的意识障碍。2例急性重症胰腺炎合并高乳糜微粒血症的ARF患接受非选择性血浆置换（PE）加CRRT治疗，胰腺炎得以较快控制，肾功能逐渐恢复。结论：对于ICU的重症ARF患，选择IHD应慎重。CRRT更适合复杂性ARF的肾替代治疗。血浆置换联合CRRT可能是治疗急性重症腺合并高脂血症的ARF患的有效方法。     

血清中芳香酯酶的特性及其与疾病的关系

芳香酯酶主要由肝细胞合成,是依赖Ca~(2+)存在于血浆HDL中的一种酯酶。它能水解氧化型磷脂,抑制氧自由基对HDL和LDL氧化,与脂代谢有密切的关系,因其具有抗动脉粥样硬化的作用而日益受到重视。本文就对芳香酯酶的生物学特点及其与某些疾病的关系进行综述。     

瑞舒伐他汀联合曲美他嗪治疗对经皮冠状动脉介入相关心肌损伤的影响

目的：探讨瑞舒伐他汀联合曲美他嗪治疗对PCI相关心肌损伤的影响。方法收集需行PCI术的120例稳定型心绞痛患者,随机分为瑞舒伐他汀联合曲美他嗪治疗组（试验组）和单用瑞舒伐他汀治疗组（对照组）,每组各60例。对照组按稳定型心绞痛治疗指南行常规治疗,并在PCI术前5 d予瑞舒伐他汀10 mg/d,试验组在对照组基础上加予曲美他嗪20 mg,每日3次,术前至少使用5 d,术后长期使用。分别在PCI术前、术后12 h、术后3 d检测两组患者的血清人可溶性CD40配体（sCD40L）及超敏肌钙蛋白T （hsTnT）水平。随访半年,比较两组患者主要心血管事件发生率的差异。结果两组术前冠状动脉病变情况及PCI术中植入支架枚数比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。术前两组稳定型心绞痛患者sCD40L、hsTnT水平比较差异亦无统计学意义（P＞0.05）。术后12 h两组患者sCD40L、hsTnT水平均比术前明显升高（P均＜0.01）,其中对照组sCD40L、hsTnT水平均明显高于试验组（P均＜0.01）。术后3 d 两组患者 sCD40L、hsTnT水平均明显下降（P均＜0.01）,其中试验组sCD40L、hsTnT水平均明显低于对照组（P均＜0.01）。术后随访半年,试验组再发心绞痛病例明显少于对照组（P＜0.05）。结论 PCI术前联合使用曲美他嗪及瑞舒伐他汀治疗对降低PCI术后血清sCD40L、hsTnT水平疗效优于单用瑞舒伐他汀,有利于减少PCI相关心肌损伤,长期使用可降低心肌缺血事件的发生率。     

缺氧诱导因子-1α对A549细胞株中生存素表达及其生物学特性的影响

目的观察非小细胞肺癌细胞株A549中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对生存素转录的调控作用及对A549细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法用凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测生存素启动子序列与核蛋白结合的情况。EMSA实验分为阴性对照反应组、结合反应组、探针冷竞争反应组、突变探针的冷竞争反应组和特异性抗体反应组。应用脂质体将载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP miRNA HIF-1α质粒和阴性(错义链)、内参(β-肌动蛋白)微小RNA(miRNA)质粒转染A549细胞。转染分为未处理组(正常A549细胞)、HIF-1α沉默组(转染HIF-1αmiRNA质粒)、阴性对照组和内参组。杀稻瘟菌素筛选阳性克隆扩大培养;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法筛选出对A549细胞干扰效果最佳的miRNA HIF-1α干扰载体;常氧、缺氧条件下检测各组中HIF-1α、生存素在mRNA和蛋白水平的变化;用细胞计数法、流式细胞术和转移小室迁移试验检测各组细胞增殖、凋亡及迁移细胞数。结果 (1)γ-32P标记的生存素启动子序列-26^-9 bp与A549细胞核蛋白作用,该条带可与HIF-1α抗体结合产生特异性抗体结合条带;(2)常氧下HIF-1α沉默组的HIF-1α和生存素mRNA分别为0.313±0.051和0.060±0.008,明显低于未处理组的1.042±0.036和1.071±0.016(F=436.433,0.002,均P<0.05);HIF-1α和生存素的蛋白含量分别为0.559±0.051和0.051±0.003,未处理组分别是1.452±0.146和0.194±0.007,两组比较差异有统计学意义(F值为53.525和331.646,均P<0.05)。缺氧条件下HIF-1α沉默组中HIF-1α、生存素的mRNA和蛋白分别为0.604±0.040、0.394±0.018、0.997±0.026、0.172±0.006,明显受到抑制(mRNA的t值分别为7.809和-28.936,均P<0.01;蛋白的t值分别为13.523和-14.202,均P<0.01);常氧条件下,转染miRNA后A549细胞增殖(24 h为0.273±0.008)无明显变化,但迁移细胞数(30±6)比未处理组(121±17)减少;缺氧条件下,转染miRNA后,A549细胞生长速度(24 h为0.273±0.008)减慢,细胞体外的迁移细胞数(75±4)减少(均P<0.05)。结论 A549细胞中生存素核心启动子上存在HIF-1α结合位点;miRNA沉默A549细胞HIF-1α表达后,可有效下调生存素基因表达,常氧条件下仅抑制细胞迁移,缺氧条件下不仅促进细胞凋亡,还可抑制细胞增殖和迁移。     

1例直肠癌患者术后继发腹壁多处坏死性软组织感染的护理

总结1例直肠癌患者术后继发腹壁多处坏死性软组织感染的护理经验。护理要点：感染性休克的早期识别和有效控制;坏死性软组织感染的识别及护理,控制全身性感染再次发生;分阶段落实个体化镇痛,改善疼痛症状;分阶段动态落实营养支持方案;实施全程心理干预。经过122 d的精心护理,8处伤口全部愈合,患者恢复良好。     

沈阳地区89例湿疹皮炎斑贴试验临床分析

目的 了解沈阳地区湿疹皮炎患者接触性变应原的分布及其特点.方法 收集2008年3～11月诊断为湿疹皮炎患者,应用斑贴试验分析患者接触性变应原.结果 89例检测患者中,25例斑贴试验呈现阳性反应,阳性率为28.09％.对1种变应原致敏阳性者21例(占23.60％),对2种变应原致敏阳性者3例(占3.37％),对3种变应原阳性者0例(占0.00％),对4种及4种以上变应原阳性者1例(占1.12％),阴性者30例(占33.71％).列前4位的常见变应原致敏依次为:硫酸镍、对苯二胺、硫柳汞、芳香混合物.男女斑贴试验阳性率经统计学处理,差异无统计学意义(P＞0.05).男性患者中阳性率居前3位的变应原是硫酸镍、硫柳汞、甲醛.女性患者中列前3位分别为对苯二胺、硫酸镍、芳香混合物(后2者并列第2).男性患者中硫酸镍、硫柳汞的阳性检出率比女性明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).中青年组与中老年组阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 斑贴试验有助于明确湿疹皮炎患者的接触性变应原,为疾病的预防及治疗有一定的提示及参考意义.