隐球菌抗原MP98的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位的预测及鉴定

目的鉴定隐球菌抗原MP98中的HLA-A＊0201限制性CD8＋CTL表住。方法应用数据库SYFPEITHI预测隐球菌MP98中可能存在的HLA-A＊0201限制性CD8＋CTL表位，经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A＊0201的亲合力，经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞（PBMCs）对各抗原肽产生的增殖反应，经细胞毒性实验研究各抗原肽诱导的特异性T细胞的细胞毒杀伤活性，逐步鉴定MP98的HLA-A＊0201限制性CD8＋CTL表位。结果位于MP98氨基酸序列肽5（436-444aa）与HLA-A＊0201分子具有较高的亲合力，并都能刺激HLA-A＊0201阳性个体者PBMC增殖，并诱导产生具有特异性杀伤活性的CTL。结论肽5GMFDGLSGV（436-444aa）是MP98上HLA-A＊0201限制性CD8＋CTL的优势表位，可作为隐球菌疫苗设计的候选表位。     

用流式细胞术研究中药对白念珠菌的抗菌作用

目的 应用流式细胞仪测定中药有效成分小檗碱、黄芩甙、丁香酚和姜黄素对白念珠菌细胞周期的影响。方法 将白念珠菌培养在含不同药物浓度的YEPD培养基中，培养48h，流式细胞仪检测细胞生长周期、DNA荧光强度和细胞体积大小。结果 4种抗真菌中药有效成分对白念珠菌细胞生长周期有不同程度的影响，随着药物浓度的增高，其处于S-G2-M期的细胞比率越低，亦即细胞分裂受抑制越明显。在含药物培养基中生长的真菌细胞的荧光强度减弱，反映了细胞DNA片段的丢失，并随着药物浓度的升高，荧光强度减弱越明显，反映细胞体积大小、折光度和颗粒度的散点图向下和向左移动，随着药物浓度的升高，这种图形变化越明显。结论 中药单体通过抑制细胞分裂发挥抗真菌作用，流式细胞仪可用于抗真菌药物敏感性测定。     

乳房部位局限性硬皮病1例

患者女,21岁。因右侧乳房部位皮肤变硬、紧绷感半年,于2003年1月14日就诊。患者半年前发现右侧乳房有一黄豆大红斑,自觉紧绷感,无痛痒,此后皮损逐渐变硬。近2个月皮损范围扩大,呈淡黄色。体检:一般情况好,关节活动自如,无雷诺现象,系统检查无异常。皮肤科情况:右侧乳房内上方见2cm×5cm淡黄色斑片,表面有蜡样光泽(图1A),触之有皮革样硬度。患者平素身体健康,家族中无类似疾病病史。实验室检查:血、尿、粪常规无异常,肝肾功能、血沉、胸部X线片和腹部B超检查均未见异常。皮肤组织病理检查:表皮轻度萎缩,基层色素增加,真皮胶原纤维均质化,呈…     

皮肤T细胞淋巴瘤并发原发性皮肤曲霉病1例

报道1例皮肤T细胞淋巴瘤患者并发上曲霉引起的原发性皮肤曲霉病，患者女性，41岁，左胫前2处相连的巨大黑痂，刮取物直接镜检有透明的分枝分隔菌丝，组织病理检查见较多粗细均匀的有隔菌丝，菌丝呈Y型分枝，菌种鉴定为土曲霉。     

器官移植后真菌感染的预防

器官移植患者移植后真菌感染是医院感染的重要人群 ,也是造成移植失败的决定因素之一。英国医学真菌学会 1997年统计骨髓移植和实体脏器移植患者侵袭性真菌感染的发病率分别为 5 0 %和 5 %～ 2 0 % [1 ]。 Wakayama等 [2 ]对实体脏器移植后死亡者的尸检研究发现深部真菌感染占实体脏器移植的 2 1. 0 % ,其中 ,肾移植患者真菌感染发病率为2 6 .1% ,肝移植为 2 5 .0 % ,肺移植为 14 .3% ,心脏移植为13.2 %。移植后真菌感染已成为导致移植失败和死亡的主要原因之一 ,因此强调建立预防真菌感染的评估体系和监护措施 ,对于降低移植后真菌感染发…     

普伐他汀致剥脱性皮炎1例

临床资料：患者女，68岁：因全身干燥性红斑、脱屑伴瘙痒6d，于2002年9月30日入院。因高血压、高血脂、腹主动脉瘤、脑血管疾患等疾病常年服用都可喜、甲钴胺(弥可保)、吡硫醇(脑复新)、尼群地平(洛普思)、氟伐他汀(来适可)等药物，2002年8月因血脂控制不佳改用大蒜油、普伐他汀(pravastatin，商品名为普拉固)40mg每晚1次，服用24d后，逐渐出现面颈     

白念珠菌表面葡萄糖淀粉酶基因GCA1的克隆和鉴定

白念珠菌 (以下简称白念 )对宿主细胞的粘附在疾病的发展中起重要作用 ,生长在右旋半乳糖的白念比生长在右旋葡萄糖的白念具有更强的细胞粘附力 ,且前者细胞中 1 90ｋＤ的甘露糖蛋白 (ＭＰ1 90 )含量比后者高得多。该文对ＭＰ1 90及其基因进行鉴定并对ＭＰ1 90的 3条内肽进行分离测序。材料与方法 :采用ＳＤＳ -ＰＡＧＥ法分离ＭＰ1 90 ,将ＭＰ1 90转印至硝酸纤维素膜上 ,经氨基黑染色 ,脱色后经蛋白水解酶消化后得到3条内多肽 ,进行序列分析。以许旺酵母ＧＡＭ1的一个 0 9ｋｂ内片段作探针 ,从基因库中得到一个含白念葡萄糖淀粉酶 5′端基…     

适用于提取新生隐球酵母菌及白色假丝酵母菌总核糖核酸快速方法研究

目的 探讨快速可以兼顾提取高质量的新生隐球酵母菌和白色假丝酵母菌总核糖核酸(RNA)的试验方法,为各种功能基因的表达研究奠定基础.方法 针对新生隐球酵母菌荚膜株和荚膜缺陷株新生隐球酵母菌H99及白色假丝酵母菌国际标准菌株ATCC 64548采用冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法提取总核糖核酸(RNA),用紫外线分光光度计测量其OD260、OD280的值,并且进行琼脂糖凝胶电泳,同时应用RT-PCR鉴定RNA质量.结果 提取的新生隐球酵母菌荚膜株和荚膜缺陷株总RNA产量分别为0.6μg/107细胞、1.5 μg/107细胞,且OD260/OD280比值在1.8～2.0,电泳显示提取的总RNA呈现28S rRNA,18S rRNA和5s rRNA 3条清晰的条带;提取的白色假丝酵母和菌丝相总RNA产量分别为2.3 μg/107细胞、3.1 μg/107细胞,且OD260/OD280比值在1.8～2.0,电泳显示提取的总RNA呈现28S rRNA、18S rRNA和5S rRNA 3条清晰的条带.结论 冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法,快速高质量适用于大小样本的新生隐球酵母菌和白色假丝酵母菌总RNA提取,满足各种类型分子生物学研究需要以及临床鉴别诊断治疗不同种类真菌感染.     

臁疮1例

患儿男，5岁。因头皮脓肿，溃疡10d经抗菌治疗无效，于2004年8月31日来我科诊治。10d前患儿无明显诱因出现头皮下脓肿，伴有发热（体温最高达39℃），脓肿范围逐渐扩大，疼痛明显，伴周边轻度瘙痒。患儿自行将其抓破，流出黄白色脓液，随后全身搔抓处出现散在分布的水泡及脓疱，并有渗液、结痂。     

三种方法分离新生隐球菌RNA及其评价

如何获得高质量的生物ＲＮＡ,是分子生物学研究的基础和极为关键的一步。如Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹及杂交分析,寡聚(ｄＴ)纤维素选择分离ｍＲＮＡ,ｃＤＮＡ合成及体外翻译,ＲＴＰＣＲ等实验的成败,很大程度上决定于ＲＮＡ的纯度和完整性。我们参考哺乳动物细胞ＲＮＡ的抽提方法,并对其作了适当的修改,成功地获得了高质量的ＲＮＡ,同时对它们的优劣进行了初步的比较。一、材料和方法(一)菌株和试剂:菌株由我院中国医学真菌保藏管理中心隐球菌专业实验室提供,编号为ＣＣＣＣ0112,为临床分离株,保存于沙堡固体培养基斜面上。试剂有:①液体培养基…