光动力抑制胆管癌QBC939细胞生长的实验研究

目的研究血卟啉衍生物介导的光动力（HPD-PDT）抑制胆管癌细胞生长状况及其机制。方法 MTT法用于评估人胆管癌细胞（QBC939）的生长状态;Hoechst33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡;WesternBlotting法用于探测QBC939细胞中细胞色素C的释放情况;Caspases酶活性测定用于测定caspase-3、-8、-9的活化情况。结果 HPD-PDT在体外能够抑制胆管癌QBC939细胞生长,这一效应主要是通过诱导QBC939细胞线粒体凋亡达到的,在凋亡过程中,出现了细胞色素C释放,caspase-9和-3的活化。结论 HPD-PDT体外能够抑制胆管癌细胞生长,诱导胆管癌细胞凋亡。     

特殊部位肝癌的腹腔镜下射频消融治疗

目的探讨腹腔镜下射频消融术（LRFA）在特殊部位肝癌治疗中的临床疗效和安全性。方法对2010年1月-2011年12月我院39例经螺旋CT证实的肝癌患者实施LRFA临床资料回顾分析。单病灶者25例,2个病灶者14例,共计53个病灶,分别位于肝脏表面、膈顶部、心包及毗邻胆囊、胃肠的肝肿瘤,肿瘤平均直径为3cm。结果39例患者均顺利完成手术,单病灶LRFA平均时间为30min,平均总手术时间为45min。未出现腹腔出血,胃肠道损伤,膈肌损伤及肝功能衰竭等严重并发症。术后一个月螺旋CT增强扫描证实,病灶完全坏死率达100％。随访12～24个月,2例发现肝内新病灶,4例消融部位复发,采用TACE或再次腹腔镜下射频消融治疗。结论LRFA安全性好、恢复快、疗效确切,已成为包括位于特殊部位肝癌微创治疗的主要手段。     

改良经皮肝胆道镜治疗复杂肝内外胆管结石

目的 探讨改良经皮肝胆道镜(mPTCS)治疗复杂肝内外胆管结石的临床应用效果。方法 回顾分析2008年2月至2010年12月我科采用改良经皮肝胆道镜治疗复杂肝内外胆管结石患者20例。男性12例，女性8例，年龄为45-87岁。18例患者术前有胆道或腹部手术病史。结石位于肝内胆管和或胆总管。结果 平均每例PTCS操作为1-...     

斑马鱼髓系造血细胞缺陷突变体的大规模遗传筛选

目的 通过大规模化学遗传学方法筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体.方法 利用化学诱变剂乙基亚硝基脲(ENU)将雄鱼精原母细胞诱变,通过与AB野生型雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同founder(FO)的F1代同胞之间交配产生F2家族,F3代来F2家族同胞内交配,并分别以中性红和苏丹黑B染色筛选巨噬细胞和粒细胞缺陷突变体.结果 我们筛选了350个F2家族,共1424对鱼.初步筛选到6个斑马鱼髓系造血系统的突变体,其中3个突变体为中性红染色异常,另3个突变体为苏丹黑染色异常,表明以上突变体可能存在巨噬细胞或粒细胞的发育障碍.结论 ENU化学诱变和中性红及苏丹黑B染色筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体是简单、价廉、有效的化学遗传学方法.通过保留突变体对后代进行进一步的研究分析,有望鉴定和克隆影响斑马鱼髓系造血新的基因或已知基因的新的调控途径.     

柴胡加龙骨牡蛎汤配合颈椎牵引治疗颈性眩晕20例的TCD观察

目的 观察柴胡龙骨牡蛎汤配合颈椎牵引治疗颈性眩晕的TCD疗效.方法 选择40例颈性眩晕患者,采用区组随机化方法及异体配对设计,分为治疗组和对照组,每组各20例.治疗组予柴胡龙骨牡蛎汤配合颈椎牵引治疗,对照组予盐酸氟桂利嗪胶囊配合颈椎牵引治疗,治疗4周进行疗效评估,两组治疗前后均对患者进行TCD检查.结果 治疗组治疗后VA及BA的Vm与治疗前比较均明显提高(P＜0.01),PI明显降低((P＜0.01),对照组治疗后VA及BA的Vm与治疗前比较也有提高(P＜0.05),PI降低(P＜0.05);2组治疗后比较,治疗组的VA及BA的Vm均高于对照组(P＜0.05),治疗组的VA及BA的PI均低于对照组(P＜0.05).结论 柴胡龙骨牡蛎汤配合颈椎牵引对颈性眩晕有较好的治疗效果.     

DC-CIK免疫治疗联合TACE介入治疗晚期肝癌的临床研究

【摘要】〓目的〓探讨DC-CIK细胞免疫治疗联合介入治疗晚期肝癌的临床疗效。方法〓选择晚期原发性肝癌患者112例为研究对象,根据患者自愿情况分为TACE联合DC-CIK细胞免疫治疗组(A组,n=64)和TACE治疗组(B组,n=48),观察治疗前后血常规、肿瘤标志物、免疫功能及治疗效果。结果〓A组缓解率明显高于B组(78.12% VS 47.92%);治疗前后CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、NK、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+增加或减少值均高于B组;随访6个月、12个月,A组死亡病例明显低于B组(6.25% VS 16.67%, 1.78% VS 12.82%),但两组18个月的死亡病例数比较没有差异。结论〓TACE联合DC-CIK细胞免疫治疗一定程度上可改善免疫功能,提高近期疗效。     

经腹腔镜引导射频消融术治疗肝细胞癌78例疗效分析：附视频

目的探讨经腹腔镜射频消融术（LRFA）治疗肝细胞癌的临床应用并评价疗效。方法回顾性分析2009年2月至2011年2月间收治的78例肝细胞癌（HCC）患者的临床资料。将符合纳入标准的病例分为LRFA组32例,经皮射频消融术（PRFA组）21例和手术切除组25例。检测各组术前和术后肝功能和AFP的变化,应用视觉模拟评分法（VAS）评价患者术后疼痛缓解程度,进行术后KPS功能状态评分,观察术后并发症发生率和肝内复发率、无瘤生存率、总生存率,并进行生存分析。结果 （1）术后3月时,3组的ALT、AST、GGT、ALP、AFP各指标明显低于术前（P〈0.05）;ALB术后1周下降明显,至术后1月逐渐恢复正常（P〈0.05）;3组的TBIL指标差异无统计学意义。（2）LRFA组和PRFA组术后3级疼痛明显低于手术切除组;3组VAS疼痛评价结果差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）LRFA组的并发症发生率低于其他两组（P=0.012,0.007）,手术切除组的伤口感染发生率与LRFA组比较,差异有统计学意义（χ2=7.015,P=0.008）。（4）术后6月前,手术切除组的KPS评分低于LRFA组和PRFA组,而后各时间点3组评分相近。（5）3组术后6、12、18、24个月的肝内复发率、无瘤生存率和总生存率差异无统计学意义,LRFA组的生存曲线均高于PRFA组和手术切除组。（6）手术切除组平均手术时间、住院时间和费用明显高于LRFA组（P〈0.05）,LRFA组与PRFA组差异无统计学意义。结论 LRFA治疗HCC兼具腹腔镜和射频消融的优点,术后肝功能和AFP的恢复程度与PRFA、手术治疗方法相当。该方法有助于患者术后疼痛缓解,并发症少,肝内复发率低,无瘤生存率、总生存率高,是一种安全微创、疗效确切的肝癌治疗方法,值得临床广泛推广。     

血卟啉光动力作用杀伤人胆管癌细胞的实验研究

目的研究血卟啉化衍生物（hematoporphyrin derivative，HPD）光动力作用（photodynamic therapy，PDT）对人胆管癌细胞QBC939的杀伤效应：方法以人胆管癌细胞系QBC939为研究对象，采用血卟啉化合物作为光敏剂，半导体激光治疗仪为光源。实验分为对照组（空白对照组、单纯光动力组、单纯光敏剂组）和光动力作用组，以系列浓度的血卟啉经不同强度光照后，用MTT法测定PDT对QBC939细胞的相对抑制率和筛选最佳PDT参数。结果光动力作用组的吸光度（OD值）与对照组间的差异具有统计学意义（P〈0.01），随着HPD浓度的增加和光照强度的增大，光动力作用对细胞的相对抑制率逐渐增大。不同的光敏剂浓度和光照强度间组合能达到相同的抑制率，如以10mg／L HPD经5J／cm^2光照强度或以4mg／L HPD经15J／cm^2光照强度对QBC939均可以达到92％相对抑制率。在最佳光照能量密度条件下，设计三组功率-时间组合，组间没有显著差异。结论1）PDT对人胆管癌细胞QBC939具有明确的杀伤作用，其对细胞的抑制率具有显著的剂量效应关系。光敏剂浓度和光照强度间存在交互关系，从临床角度考虑，采用较低的光敏剂浓度经较大的光照强度照射是理想的PDT治疗方案。2）改变功率时间的组合不会影响光动力对胆管癌细胞杀伤作用，采用在光纤承受范围内的大功率短时间的照射方式可达到安全快捷的目的。     

ERCP治疗医源性胆道损伤应用价值（附27例分析）

目的 探讨ERCP对医源性胆道损伤的诊断与治疗。方法 回顾2009年1月至2011年1月收治的医源性胆道损伤27例,先行ERCP检查,明确损伤的部位、性质及程度,继而行内镜下乳头括约肌切开（EST）,胆道球囊扩张及鼻胆管引流（ENBD）或胆道内支架植入术（ERBD）。结果 27例胆道损伤病人,除1例恶性肿瘤病人死于肿瘤转移,其余26例病人临床症状完全缓解;10例胆瘘者内镜引流术,腹腔平均胆汁引流量由术前300mL/d减至50mL/d以下,两者比较有显著性减少（P<0.01）,窦道多在1~2周内自行愈合。发生黄疸者19例,治疗后第1天平均总胆红素由术前（65.2±11.6）μmol/L下降到（31.6±9.1）μmol/L,治疗前后相比有显著性降低（P<0.01）。3例患者术后出现一过性血淀粉酶增高,4～6d后恢复正常,1例出现胆道感染,无出血、穿孔和急性胰腺炎发生。结论 ERCP可作为处理胆道手术并发症如大流量胆瘘和或胆道狭窄的首选治疗。内镜下乳头括约肌切开鼻胆管引流能降低胆道内的压力,减少瘘口流量,促进瘘口闭合;大口径内支架植入能有效扩张狭窄胆管,有利于胆汁排泄通畅。     

一种斑马鱼原始造血髓系细胞突变体的研究

摘要：目的斑马鱼原始造血髓系细胞突变体1276的表型鉴定及性状分析。方法利用化学诱变剂N-乙基-N-亚硝基脲诱变野生型AB斑马鱼雄鱼的精原细胞,突变基因组保留传代,采用中性红染液对F3代的胚胎进行细胞化学染色,筛选原始
造血髓系细胞突变体。并通过细胞化学染色及检测不同谱系血细胞标记基因在不同发育阶段的mRNA及蛋白的表达水平,对其中之一突变体1276进行表型鉴定及性状分析。结果成功筛选1296个F2家族,2140个突变基因组,发现中性红
染色信号异常突变体12个。突变体1276在原始造血阶段,中性红染色全身信号缺失,小胶质细胞标记基因apoe 表达缺失,巨噬细胞标记基因l-plastin,头部表达减少,背主动脉壁腹侧区域表达正常,粒细胞、红细胞均未见异常;在定向造血阶
段,巨噬细胞仍存在异常,但粒细胞、红细胞、淋巴细胞以及造血干细胞均未见明显异常。结论突变体1276在原始造血阶段,巨噬细胞存在功能障碍,以及不同程度发育及迁徙异常;在定向造血阶段这一性状并未得到代偿。