RNA干扰抑制c-myc基因对体外培养大鼠血管平滑肌细胞活性的影响

目的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖是导致移植静脉再狭窄的主要原因之一,早期应答基因c-myc是促进平滑肌细胞持续增殖的关键基因。探讨针对c-myc基因的RNA干扰对体外培养平滑肌细胞增殖和活性的影响。方法体外培养大鼠VSMCs,构建3对针对c-myc基因的RNA干扰序列(siRNA-1#、siRNA-2#、siRNA-3#)和1组阴性对照序列,以Lipo2000为载体转染体外培养细胞,Q-RT-PCR检测c-myc mRNA表达,Western blot检测转染c-myc蛋白表达,MTT法检测细胞增殖状态和活性。结果转染3对siRNA序列48h后,各组c-myc mRNA表达水平显著低于阴性对照组和正常细胞组,3组转染组之间c-myc mRNA表达无显著差异。转染siRNA-1#、siRNA-2#序列后,c-myc蛋白表达低于转染siRNA-3#序列组、阴性对照组和正常细胞组,而转染siRNA-3#序列组c-myc蛋白表达与阴性对照组和正常细胞组相比无明显差异。转染24 h各组间细胞活性未见显著差异,48h时细胞活性与24h相比无显著增加,至72h时各组细胞活性有明显增加,以转染siRNA-1#序列组增加量最少。阴性对照组和正常细胞组抑制效率基本保持为零水平。转染siRNA-1#、siRNA-2#序列后,24、48、72 h后抑制效率逐渐增加,转染siRNA-3#序列后72h后其抑制效率开始降低,各相同时间点以转染siRNA-1#序列后抑制效率最高。结论体外转染c-myc基因siRNA序列,能显著降低平滑肌细胞c-myc基因mRNA和蛋白表达,抑制细胞活性和增殖。随着作用时间延长,RNA干扰(RNA interference,RNAi)后细胞活性缓慢增加,而抑制效应持续显著增加,以siRNA-1#序列抑制作用最为明显。     

同种双腔静脉原位心脏移植1例

1999年 5月 2 7日我们完成 1例同种异体双腔静脉原位心脏移植 ,术后 1年病人情况良好 ,植入的心脏功能正常。病人　男 ,2 6岁。 9年来反复发作心悸、憋喘、不能平卧、下肢水肿而丧失劳动能力 ,因屡发心衰多次住院治疗。超声心动图示全心扩大 ,二、三尖瓣及肺动脉瓣反流 ,两室壁运动减弱 ,射血分数仅 0 2 0 ;胸部Ｘ线示两肺淤血 ,心胸比率0 80 ;心导管检查示肺动脉压 (ＰＡＰ) 2 1ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ =0 133ｋＰａ) ;心电图示心房纤颤 ,频发室早 ;肝肾功能不同程度受损。临床诊断为晚期扩张型心肌病 (术后病理检查亦证实 ) ,心功能ＩＶ级 …     

无创机械通气治疗COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭临床观察

COPD是呼吸系统疾病中的常见病和多发病，患病率和死亡率均高。而Ⅱ型呼吸衰竭是COPD病人重要死亡原因，故积极防治呼衰至关重要。现将我院2005年1月～2005年12月收住的COPD合并Ⅱ型呼衰病人40例。取得良好疗效．现报告如下。     

《儿童家庭医疗保健丛书》征订

经脉气血深聚之处的腧穴，称郄穴。自《针灸甲乙经》明确十六郄穴的名称，厘定其具体定位，详论其针灸法，阐明其主治病症以后，临床多应用郄穴治疗本经循行所过部位及所属脏腑的病症，主要体现在“阳经郄穴多治痛，阴经郄穴多治血”，近人则常用于急症。笔者从事针灸临床和教学多年，运用郄穴治疗多种经脉和脏腑的顽固性疾病，尤其是神经系统疾病和脑血管疾病，常获良效，现结合临床病案介绍如下。     

补充维生素D对COPD患者骨密度及炎症因子的影响

目的:探讨补充维生素D对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者骨密度及炎症因子的影响。方法:将维生素D缺乏的COPD患者随机分成观察组175例和对照组175例,两组常规治疗相同,观察组加用骨化三醇胶丸(0.25μg·d-1)治疗,比较两组治疗3个月后骨密度、炎症因子及肺功能的差别。结果:1治疗后,观察组血钙、25(OH)D、骨密度和T值均显著高于对照组,血磷、TNF-α和IL-6均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2治疗后,观察组第l秒用力呼气容积(FEV1)、第l秒用力呼气容积/肺功能包括用力肺活量(FEV1/FVC)、单位肺泡一氧化碳弥散量(DLCO/VA)均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补充维生素D可提高COPD患者骨密度,降低炎症因子水平,并改善肺功能。     

闭合复位微创经皮锁定加压钢板内固定治疗胫骨骨折

目的：探讨常规切口钢板与微创经皮锁定加压钢板治疗胫骨骨折的临床疗效。方法对2008年1月至2011年12月岳阳市中医院收治的100例胫骨骨折患者的临床资料进行回顾性分析,其中观察组采用微创经皮锁定加压钢板（45例）,对照组采用常规切口钢板（55例）,比较两组切口长度、术中出血量、手术时间、住院时间、骨折愈合时间及Johner-Wruhs评分等指标。结果观察组切口长度、术中出血量、手术时间及骨折愈合时间均优于对照组（P＜0.05）。术后随访9～26个月,平均随访时间15个月。术后3个月Johner-Wruhs评分：对照组优32例、良14例、差9例,优良率为84%;观察组优24例、良16例、差5例,优良率为89%。两组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论采用微创经皮锁定加压钢板内固定治疗胫骨骨折,能够在缩短手术时间、降低术中出血、减少手术损伤的前提下,取得与常规切口钢板内固定相似的治疗效果,提高治疗成功率,促进患者肢体功能恢复。     

艾滋病免疫重建炎症综合征研究进展

目前,IRIS尚无一个明确的定义。IRIS是在开始HAART后的最初几个月里出现的一种高异质性的不良反应…,发生率为10％～32％。通常认为,IRIS发生在AIDS患者HAART治疗早期,其HIV血浆病毒载量下降且CD4＋T细胞计数增加,但临床却表现为恶化的炎症,严重时可出现死亡,而这种表现不能用新的机会性感染或者炎症来解释。     

表达丙型肝炎病毒核心蛋白的人肝癌稳定转染细胞株的建立与鉴定

目的建立能表达丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV core)的人肝癌细胞SMMC-7721的稳定转染细胞株。方法构建含目的基因HCV core的重组质粒,转染HEK293T细胞,包装获得含ZsGreen和HCV core基因的慢病毒后,感染SMMC-7721人肝癌细胞,采用实时荧光定量PCR检测HCV core mRNA表达,采用免疫荧光细胞化学染色和Western blot法检测HCV core蛋白表达,筛选稳定表达HCV core的细胞株。结果质粒酶切和序列测定证实重组载体构建正确;慢病毒包装48 h后可见清晰ZsGreen表达,感染SMMC-7721细胞后筛选获得稳定转染的细胞株,实时荧光定量PCR检测到HCV core mRNA,免疫荧光细胞化学染色和Western blot法均检测出HCV core蛋白表达。结论成功构建了表达HCV core蛋白的SMMC-7721人肝癌细胞的稳定转染细胞株。     

临时人工心脏起搏抢救缓慢性心律失常51例观察

我院7年来收治各种严重缓慢性心律失常51例,目前对于极缓慢的心律失常没有理想的药物救治,在无充足的时间安装永久性心脏起搏器的情况下,我们采用临时性经静脉心内膜起搏治疗,取得极满意效果,现总结报告如下.     

临时人工心脏起搏抢救缓慢性心律失常51例观察

我院7年来收治各种严重缓慢性心律失常51例,目前对于极缓慢的心律失常没有理想的药物救治,在无充足的时间安装永久性心脏起搏器的情况下,我们采用临时性经静脉心内膜起搏治疗,取得极满意效果,现总结报告如下.