RNAi下调PIK3 CB表达抑制U251胶质瘤细胞生长的体内外研究

目的 探讨应用RNAi技术靶向磷酸肌醇酯-3-激酶β催化亚单位(PIK3CB)抑制恶性胶质瘤细胞系U251的PIK3CB表达后在体内外对U251细胞生长抑制作用.方法 将短发夹RNA(shRNA)表达载体psiRNA-PIK3CB进行脂质体介导的U251人脑恶性胶质瘤细胞系表达,检测细胞转染前后的细胞增殖能力和凋亡的变化.应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导shRNA基因治疗对U251细胞生长抑制作用,对肿瘤组织应用免疫荧光双染色和免疫组化的方法分析结果.结果 靶向PIK3CB的shRNA转染后U251细胞生长受到抑制,细胞周期出现G2/M阻滞,细胞明显凋亡.裸鼠皮下荷瘤模型实验显示psiRNA-PIK3CB显著抑制皮下肿瘤生长(P＜0.01).结论 靶向PIK3CB的shRNA基因治疗可以成为胶质瘤治疗的新策略.     

人隔蛋白7的真核表达载体的构建及表达

目的 构建人隔蛋白7(SEPT7,hCDC10/SEPT7)的表达载体并对U251人脑恶性胶质瘤细胞系进行转染且检测其表达.方法 RT-PCR方法扩增SEPT7 cDNA片段,并将扩增的片段插入pCDNA3真核表达载体,构建成含SEPT7cDNA的重组载体pCDNA3/SEPT7,以脂质体介导该质粒转染人脑恶性胶质瘤细胞系U251,应用RT-PCR和免疫荧光染色鉴定转染细胞中hCDC10/SEPT7的表达.用流式细胞术对转染前后的U251细胞进行细胞周期分析.结果 成功构建含SEPT7cDNA的重组载体pCDNA3/SEPT7,并使其稳定转染U251细胞,在转染的细胞中,证实有SEPT7mRNA表达上调.细胞周期检测结果G0/G1期细胞增多,SPF降低.结论 成功构建SEPT7表达载体,并在人脑恶性胶质瘤细胞系获得表达,延迟细胞周期进展.     

靶向Ku70重组腺病毒shRNA在C6胶质瘤细胞的表达

目的 研究重组腺病毒Ad—Ku70shRNA对C6胶质瘤细胞系Ku70蛋白表达的影响，探讨放射治疗过程中基因增敏的新途径。方法以穿梭质粒为基础，构建重组腺病毒Ad—Ku70shRNA载体，扩增并鉴定其病毒滴度。然后转染至C6鼠脑胶质瘤细胞中，应用WestemBlot及免疫荧光观察其Ku70蛋白的表达情况，研究重组腺病毒Ad—Ku70shRNA对C6细胞Ku70表达的抑制效果。结果成功构建并扩增Ad—Ku70shRNA重组腺病毒，感染C6胶质瘤细胞后Ku70的表达明显降低。结论Ad—Ku70shRNA重组腺病毒载体可以明显降低C6胶质瘤细胞Ku70的表达。该结果为放射治疗基因增敏研究提供了有利的工具。     

反义表皮生长因子受体RNA对U251胶质瘤细胞生长的抑制作用

目的探讨反义靶向表皮生长因子受体（EGFR）在体内外对U251细胞生长抑制作用。方法构建反义EGFR的pcDNA3表达质粒并进行了脂质体介导的U251人脑恶性胶质瘤细胞系基因转染。应用RT-PCR检测EGFR表达水平，应用MTT法、流式细胞术、Matrigel基质生长实验和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后的生物学行为。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导反义EGFR基因治疗对U251细胞生长抑制作用。对肿瘤组织应用免疫组织化学的方法进行EGFR、PCNA和GFAP表达比较。结果脂质体介导反义EGFR可显著抑制U251细胞ECFR表达，MTT法分析显示反义EGFR转染组胞生长抑制率为68％；与对照组和pcDNA3转染组比较，细胞周期分析结果表明p-anti-hEGFR转染组G0～G1期细胞数没有明显变化，进入S期的细胞数较对照组减少了，而进入G2期细胞则增加。Matrigel基质生长实验显示对照组和peDNA3转染组细胞呈正常形态贴壁生长。而p-anti-hEGFR转染组细胞不能贴壁生长，呈团块状簇集生长。Transwell方法显示肿瘤细胞的体外侵袭能力显著下降。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示反义EGFR RNA可以显著抑制皮下肿瘤生长，组织病理学分析显示治疗组EGFR表达下降而GFAP表达上调。结论反义EGFR可以显著抑制U251细胞的EGFR表达，在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用。     

左侧三房心的X线诊断(附3例报告)

三房心为一种少见的先天性心脏病 ,约占总数的 0 .1% 0 .4% [5] 。本病临床诊断困难 ,易和二尖瓣病变相混淆。现将我院经手术证实的 3例报告如下。例 1　男 ,2 4岁 ,因反复发作心慌 ,气喘 2 0余年 ,劳动后加重入院就诊。查体 :慢性病容 ,发育营养中等 ,二尖瓣区可闻及Ⅲ级收缩期杂音。心电图 :右心室肥厚。胸部正位Ｘ线平片示双肺纹理增粗 ,肺门影增大 ,模糊 ,肺野呈淤血征象 ,心界增大 ,呈二尖瓣型。侧位胸片示食管左房段受压轻度后移 ,提示左房、右室增大。超声心动图 :右心室增大 ,左心房增大 ,左房内可见一回声增强异常光带将左房分成上…     

Wnt5a在肿瘤研究中的进展

近年来研究发现WnL5a与肿瘤发生、发展关系密切.根据细胞类型不同,Wnt5a既可以起到促癌作用,又可以起到抑癌作用,其信号级联反应复杂,受多种因子调节.     

生育及不育男性血清抑制素B水平的检测(简报)

不育男性激素评价报告表明,23％不育者伴有内分泌异常。而与男性生殖有关的主要内分泌腺是“下丘脑-垂体-睾丸轴系”,其内分泌调节是精子发生的重要环节,其中之一障碍或受其他疾病或因子干扰导致性腺激素生理水平紊乱均可能引发不育。因此,检测激素水平可评价下丘脑-垂体-     

前列腺炎的实验室诊断分析

前列腺炎为成年男性的常见病、多发病。它是一组具不同病因、临床表现及结果的综合征，常侵犯到前列腺周围间隙或后尿道，并可继发附睾炎、精囊炎。引起前列腺炎的病因较为复杂，细菌可经尿道逆行侵犯前列腺发病，也可因血行感染而来，还可继发于膀胱炎和肾盂肾炎以及邻近直肠内细菌直接或经淋巴播散等途径感染所致，因此它严重危害着患者的身体健康和生活质量，前列腺炎有细菌性和非细菌性及前列腺痛之分，细菌性前列腺炎以革兰氏阳性细菌为主，     

吐鲁番地区维吾尔族空腹血糖(FBG)≥5.6mmol/L者代谢综合征(MS)患病情况

MS是糖尿病心脑血管疾病发生的高危因素.人们需要较准确地了解、比较MS在不同地区、国家、种族分布的情况,分析造成MS相同与不同表现的原因,找到可预防干预的途径.我们以新疆吐鲁番地区FBG≥5.6 mmol/L的维吾尔族人群调查为依据,在不同空腹血糖范围就MS忠病特点进行了研究.