超声诊断腹外疝的临床价值

腹外疝是外科常见病之一．超声检查腹外疝为临床提供非常实用的诊断方法。对本院2000年3月至2008年7月经手术证实的107例腹外疝患者超声检查结果进行回顾性分析，旨在评价高频超声在腹外疝诊断中的应用价值，并探讨不同类型腹外疝的临床病理类型及其声像图特点。     

HCV核心蛋白结合蛋白基因6的克隆

目的：克隆与丙型肝炎病毒（HCV）核心蛋白结合的肝细胞中的未知蛋白基因。方法：应用酶母双杂交系统，构建丙型肝炎病毒核心蛋白诱铒质粒，转化酵母AH109后与含文库质粒的酵母Y187进行配合，在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选。筛选出30个克隆，既能在四缺营养缺陷培养基上生长(SD/Trp-Leu-Ade-His）又能在涂有x-α-gal的四缺培养平皿上长出蓝色菌落，提取此酵母克隆的质粒，转化大肠埃希菌后进行测序，进行生物信息学分析。结果：分析结果显示，其中6号克隆的测序结果与Genbank中的2个未知功能序列有98％的同源性，初步证明了此基因与丙型肝炎病毒核心蛋白有结合性。结论：丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白肝基因克隆成功。     

HCV p7下调基因p7TP2编码蛋白的亚细胞定位研究

目的进一步研究HCV p7下调基因p7TP2编码蛋白的亚细胞定位。方法构建p7TP2与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的表达载体,转染肝癌细胞系HepG2及绿猴肾细胞系COS-7,通过荧光显微镜观察其亚细胞定位。利用多克隆抗体的免疫组织化学技术,检测p7TP2蛋白在正常肝组织、HBV感染的肝组织、HCV感染的肝组织、肝硬化肝组织、肝癌组织、正常肾脏组织及肾癌组织中的表达。结果蛋白荧光主要集中在细胞浆部分,p7TP2蛋白在阳性组织中同样分布在细胞浆,且在正常组织的表达量显著高于病理组织。结论为进一步p7TP2蛋白的结构和功能的研究奠定了基础。     

丙型肝炎病毒蛋白结合蛋白

0引言丙型肝炎病毒(HCV)是1989年Choo et al应用分子生物学技术克隆成功的一个RNA病毒,属黄病毒科.可以引起慢性肝炎?肝硬化及肝癌,目前全世界有1.7亿人感染,干扰素联合利巴韦林是其治疗药物,但是疗效不佳[1-9].目前正在积极研究其发病机制,探索新的治疗方案.HCV的宿主范围较窄,只能在人及黑猩猩中繁殖,为研究带来困难.目前机制的研究限于体外的细胞模型或转基因动物.HCV是怎样与宿主细胞相互作用的,世界上进行了广泛的研究,特别是HCV各蛋白组分(C?E1?E2?P7?NS2?NS3?NS4a?NS4b?NS5a和NS5b)[10]与人体蛋白之间的相互作用,为HCV…     

酵母双杂交技术筛选克隆丙型肝炎病毒NS3结合蛋白基因

为克隆与丙型肝炎病毒（HCV）NS3蛋白结合的肝细胞中的蛋白基因，采用酵母双杂交系统Ⅲ技术进行筛选。构建HCV NS3蛋白诱饵酵母质粒，转化酵母AH109后与含文库质粒的酵母Y187进行配合，在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选。选择既能在4重营养缺陷培养基（SD／－Trp-Leu-Ade-His)上生长，又能在涂有X－α－半乳糖（X－α－gal）的四缺培养平皿上生长的蓝色菌落，提取此酵母克隆的质粒，转化大肠杆菌后进行测序，并进行生物信息学分析。分析的结果显示，筛选出19个阳性克隆，包括已知功能基因17个，还有1个克隆的测序结果与GenBank中的1个未知功能序列有44％的同源性，初步证明了此基因与HCV NS3有结合活性。说明成功克隆了HCV NS3蛋白结合蛋白基因，为以后研究此基因在HCV致病机制以及在肝细胞中的生理功能提供了线索。     

用噬菌体随机12肽库筛选单纯疱疹病毒2型gD基因模拟抗原表位的研究

目的用针对HSV-2gD的单克隆抗体（McAb）从噬菌体展示随机12肽库中筛选HSV-2gD基因的抗原模拟表位，寻找更有效的小片段短肽作为HSV新型基因工程疫苗的候选抗原。方法利用HSV gD McAb淘筛噬菌体随机12肽库，经“吸附-洗脱-扩增”的4轮筛选，随机挑取噬菌体克隆经酶联免疫吸附实验（ELISA）进行鉴定，并对阳性克隆所携带的外源DNA片段进行序列测定和计算机辅助分析。结果经4轮生物淘筛后特异性噬菌体克隆得到了富集，对阳性克隆的分析结果表明P-PLW和PYH--H氨基酸序列是模拟妒基因抗原表住的骨架结构，携有此短肽的噬菌体可以与McAb特异结合。结论从噬菌体随机12肽库中筛选到的外源序列可以模拟HSV-2 gD McAb针对的抗原表位，可能是HSV-2gD一个抗原表住的替代抗原，为进一步研究HSV-2基因疫苗奠定了基础。     

354红景天提取物SHR-5对脑力工作的影响及与剂量的关系

作者采用随机、双盲、安慰剂对照的平行试验，比较研究了红景天 Rhodiola rosea口根标准提取物SHR-5两种剂量对在疲劳和应激状态下的受试者脑力工作的影响。     

体育锻炼对增强学生体质的效果评价

国内外曾报导体育锻炼对儿童少年身体形态、机能发育有良好作用。吉玉申、张国栋等人对少年业余运动员的免疫状况进行了观察;贺敬昌等人曾报告体育锻炼对防治学生近视眼及其他疾病的作用。他们各自从不同角度评价了体育锻炼对儿童少年健康成长的作用。本文的目的是采用多种指标,进行较全面的对比观察,来评价体育锻炼对学生健康的作用,并探讨其作用的主要方面。     

乙型肝炎病毒mRNA转录后剪接加工的研究进展

据统计,全世界乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的携带者可达两亿人。在我国,它是导致肝炎、肝硬化、肝癌的主要原因。然而,到目前为止,ＨＢＶ的某些遗传特性及转录后调控的分子生物学机制尚不十分清楚。本文试就ＨＢＶ ｍＲＮＡ转录后剪接加工的机制、类型、及可能的生物学作用作一综述。１ＨＢＶ基因组及其复制与表达 ＨＢＶ基因组由一个约３．２ｋｂ的双链环形ＤＮＡ组成,双链长度不对称,全长的一链因与病毒ｍＲＮＡ互补,定为负链,较短一链定为正链。正链仅５’端固定,长度为负链的５０％～１００％,其３’端位置不定,因而在病毒群体中…     

应用抑制性消减杂交技术筛选血小板衍生生长因子上调的大鼠肝星状细胞靶基因

目的应用抑制性消减杂交（SSH）技术构建血小板衍生生长因子（PDGF）-BB刺激的大鼠HSC上调基因的cDNA消减文库,从分子生物学角度阐明PDGF在肝纤维化中的作用机制。方法以PDGF-BB刺激的HSC作为实验组,以未用PDGF-BB刺激的HSC作为对照组,分别收获细胞提取总mRNA,并逆转录为cDNA。经RsaⅠ酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR扩增。将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库,并转化大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆经PCR扩增后进行测序及生物信息学分析。结果成功构建了PDGF-BB刺激HSC差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后得到102个阳性克隆,经菌落PCR分析,得到93个200～1000 bp的插入片段。挑取含有插入片段的31个克隆进行测序,通过生物信息学分析获得13种已知基因序列,主要包括电压依赖性阴离子通道、热休克蛋白质47、Ras家族基因RAN等蛋白质基因。结论PDGF- BB作为最有效的促有丝分裂原在激活HSC过程中上调某些与细胞生长相关的蛋白质、参与细胞内代谢的蛋白质及分子伴侣蛋白质等基因的表达,这将为进一步阐明PDGF-BB刺激HSC介导肝纤维化的分子生物学机制提供理论依据。