好主妇不爱唠叨

一到周末,陈小姐就很压抑。她与老公都在外面工作,从周一到周五,家里没人打扫。一到周末,就要打扫房间,但是,她老公连手指都不动一下。整个周末,陈小姐都要一个人和吸尘器、洗衣机、厨房展开战斗。     

乙型肝炎病毒基因组中前-X-编码基因启动子序列的确定及转录活性的鉴定

利用长距离精确聚合酶链反应 (LA PCR)扩增慢性乙型肝炎患者血清来源的 5个全长的HBV基因组DNA ,在分析不同克隆之间的序列变异程度时 ,发现所获得的 5个克隆在X区之前可能还存在一个开放读码框架 (ORF) ,长度 16 8bp ,编码 5 6个氨基酸残基(aa) ,并将其暂时命名为前 X(pre X)。为了解前 X编码区上游DNA序列是否具有启动子活性 ,选取翻译起始密码子ATG上游 2 2 5bp的基因片段 ,将其克隆至报告基因表达载体pCAT3中 ,构建pCAT3 前 X promoter表达载体 ,以该质粒转染HepG2细胞 ,用ELISA法检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶 (CAT)的表达活性。结果发现 ,质粒 pCAT3 前 X promoter能够指导CAT的表达 ,吸光度 (A值 )是pCAT3的 3 5倍 ,提示pCAT3 前 X promoter中插入的DNA序列具有启动子活性 ,说明这一段基因序列中存在新的启动子区 ,为研究、界定前 X的ORF的存在提供了直接的依据。     

羊水量异常

羊水除可给胎儿提供一个有利于生长的环境外,还有保持胎儿新陈代谢和水平衡的功能。一般认为在正常羊水量中93.40％的胎儿发育正常,而羊水异常的胎儿畸形率和围产儿病死率显著增高。chamberlain等报道,羊水过少比羊水量正常者的围产儿病死率高约17倍,羊水量过多比羊水量正常者围产儿病死率高约40倍,说明羊水量与胎儿间关系极为密切。本文仅就羊水量异常的临床意义综述如下:     

人肝再生增强因子下调钙结合蛋白S100A11基因表达的研究

目的 探讨人肝再生增强因子（ALR）对钙结合蛋白S100A11启动子（S100A11p）转录的调节作用。方法 利用生物信息学技术确定S100A11P区域，聚合酶链反应（PCR）扩增S100A11p，克隆至真核报告载体pCAT3中，构建PCAT3-S100A11P报告载体；以该质粒转染HepG2细胞系，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶（CAT）的表达活性。并以人ALR的真核表达载体pcDNA3．1（-）-ALR共转染的HepG2细胞系，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测CAT的表达活性。结果pCAT3-S100A11p在HepG2细胞中具有CAT的表达活性；以pcDNA3．1（-）-ALR和pCAT3-S100A11p共转染HepG2细胞，CAT表达活性是单独转染细胞组pCAT3-S100A11p的0．42倍。结论 所克隆的S100A11启动子有启动子的转录活性，ALR的转基因表达具有对S100A11基因的下调作用。     

乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2原核表达载体的构建及诱导表达

目的体外构建乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2原核表达载体并观察其表达情况。方法以含有HBEBP2全长序列的质粒为模板，通过PCR扩增获得HBEBP2基因片段，将HBEBP2连接到pGEM-T载体，在测序证实正确后将其插入至原核表达载体pET-32a（＋）中，转化BL21大肠埃希菌，经IPTG诱导，并通过SDS-PAGE和Westernblot分析鉴定融合蛋白的表达。结果扩增获得的HBEBP2基因片断被成功构建到大肠埃希菌原核表达载体中。经IPTG诱导，得到了融合蛋白的表达，经Westernblot分析证实其分子量为34kD，具有抗原性。结论体外成功表达HBEBP2蛋白，为进一步研究HBEBP2蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了基础。     

安宁疗护病房团队会议管理与实践

目的 组建安宁疗护病房团队会议团队,为多学科团队交流提供重要途径,提升多学科团队协作工作的效率与质量。方法 我院借鉴国内外多学科会议实践指南,立足专科特色,通过建章建制,对会议制度、流程、成员职责分工等进行规定,保证多学科团队会议的顺利进行。结果 2018—2020年,安宁疗护病房共计340例个案被纳入讨论。其中发生爆发痛的患者181例,经过多学科会诊后使用规范止痛处理,160例患者疼痛降至3分及以下,且爆发痛次数明显减少;患者拒绝心肺复苏签署率由2018年14.8%上升至2020年28.9%。结论 团队会议在医患沟通方面发挥了巨大作用,患者住院期间病情平稳、症状控制较好,实现了医患间零纠纷零争议。     

应用酵母双杂交技术筛选与乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2结合的肝细胞蛋白编码基因

目的构建乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2(HBEBP2)的真核表达载体并筛选人肝细胞中与HBEBP2相互作用的基因。方法通过PCR扩增获得HBEBP2基因,构建真核表达载体pGBKT7-HBEBP2,转化酵母菌AH109并在其中进行表达。随后与预转化了人肝细胞文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)上进行双重筛选获得阳性克隆。提取文库质粒pACT2-DNA并与pGBKT7-HBEBP2共同转化AH109酵母菌株,于铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)上进行筛选以排除假阳性克隆。挑取真阳性克隆送测序,并进行生物信息学分析。结果筛选出6种与HBEBP2相互作用的蛋白,其中包括人类线粒体蛋白、人类α-2-糖蛋白1、人类磷酸甘露糖-p-长醇利用缺陷1和人类丝氨酸蛋白酶抑制剂等4个已知功能蛋白及2个未知功能序列。结论筛出人肝细胞中一组与HBEBP2相互作用的蛋白,为进一步探讨HBEBP2在HBV致病过程中的作用奠定了基础。     

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A结合蛋白37基因的克隆化研究

丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)可与多种细胞内蛋白发生结合，涉及调节细胞生长、干扰素耐受、脂质代谢和其他细胞内信号转导通路。本实验通过酵母双杂交技术筛选得到一个与NS5A相结合的未知功能蛋白基因，命名为NS5ABP37，根据GenBank数据库推定蛋白编码序列的信息，应用反转录聚合酶链反应(PCR)扩增出该基因序列。连接人酵母和真核细胞表达载体表达成功，并经回交实验证实NS5A与NS5ABP37的结合作用，为进一步研究奠定基础。