乙型肝炎病毒对于S100 A11信号转导影响的研究

S10 0A11是具有EF 手型 (EF handtype)结构的Ca2 +调节蛋白 (Ca2 + modulatedprotein)多基因家族的一个成员 ,与钙结合之后 ,蛋白的构象发生改变 ,暴露出疏水区 ,然后与靶蛋白结合。Rintala等[1] 认为S10 0A11的生理学功能属于附加素Ⅰ (annexinⅠ )家族。Tanaka等[2 ] 以COLO 2 0 5细胞建立cDNA文库 ,随机挑选 10 5 6个克隆进行测序 ,38.4 % (2 0 2 / 5 2 6 )的基因与GenBank中的基因序列有 80 %以上的同源性。包括人的钙囊素 (calgizzarin)基因 ,与兔钙囊素的基因序列高度同源 ,在各种不同的细胞系中均有表达。我们的研究表明 ,…     

乙型肝炎病毒XTP12在大肠埃希菌中表达及生物信息学分析

目的构建乙型肝炎病毒X蛋白反式激活蛋白2(XTP12)原核表达载体并诱导其在大肠埃希菌中表达。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,以从HepG2细胞提取的mRNA为模板,扩增XTP12目的基因片段,T-A克隆连接到pGEM-T载体,测序正确后将目的片段插入原核表达载体pET-32a( )中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导XTP12融合蛋白的表达,并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot免疫印迹分析和证实融合蛋白的表达。生物信息学方法对蛋白结构和功能进行预测。结果利用RT-PCR扩增获得XTP12基因片段,IPTG诱导BL21宿主菌成功表达了XTP12融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blot分析得到证实。生物信息学预测结果显示此蛋白富含螺旋结构,为非跨膜蛋白,无信号肽。结论利用大肠埃希菌BL21(DE3)能够成功表达XTP12蛋白,结合生物信息学分析结果,为今后研究XTP12蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了良好的基础。     

工会组织医疗安全沙龙在建设患者安全文化中的应用

患者安全是医疗质量的关键内容之一.近年来,患者安全文化的重要性日益受到关注.美国医学研究院指出建立安全文化是保证患者安全的主要措施之一[1],患者安全文化作为组织文化的分支,特指医疗机构内有关患者安全的价值观、信念和行为准则[2].     

丙型肝炎病毒核心蛋白抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定

为制备抗丙型肝炎病毒核心蛋白的抗独特型单链可变区抗体（抗－Id scFv),采用噬菌体表面展示技术，将抗－HCV核心蛋白的单克隆抗体固相包被于Nunc板，从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮“吸附－洗脱－扩增”筛选过程，获得可与HCV核心蛋白单克隆抗体结合的抗独特型人源单链可变区抗体的噬菌体集落。随机挑选60个克隆，利用酶联免疫吸附法（ELISA）、交叉反应和竞争抑制实验，对其进行免疫学检测和鉴定。获得与HCV核心蛋白单克隆抗体结合活性较强的抗－Id scFv阳性克隆，并对HCV核心蛋白特异性抗－Id scFv的编码序列进行测定分析。结果经过5轮“吸附－洗脱－扩增”筛选，在随机挑选的60个克隆中，有20株克隆ELISA的吸光度（A450nm)值较高，这些噬菌体上清与牛血清白蛋白（BSA）进行交叉反应后，确定了其中有6株交叉反应较弱，结合2次ELISA重复实验的A值及竞争抑制实验结果，最后确定1株阳性克隆，提取质粒，进行DNA序列测定，DNA大小为768bp。本实验结果提示用噬菌体抗体库技术能够成功地获得抗－HCV核心蛋白的抗－Id scFv，为开展用抗－Id scFv防治慢性丙型肝炎的研究创造了条件。     

激发学生好奇心的点滴体会

医学教育与其它各级各类教育一样，在发挥教师的主导作用的同时，必须调动学生的积极性，课堂教学中激发学生的好奇心是提高学生学习兴趣的重要手段。心理学家伯菜恩关于好奇心的见解是：人及高级动物有一种主动探索信息的内驱力，人的信息加工有一个最佳信息水平，信息不足，会使人表现出一般的好奇心，而新鲜变化、夸张、复杂、含糊不清等刺激特性会诱发特殊的好奇心。利用学生的好奇心理，使学生始终处于积极思维状态，     

应用酵母双杂交技术筛选与前S1蛋白反式激活蛋白3结合的肝细胞蛋白基因

目的用酵母双杂交技术筛选白细胞中乙型肝炎病毒(HBV)前S1蛋白反式激活蛋白3(PS1TP3)的结合蛋白。方法通过聚合酶链反应扩增获得的PS1TP3基因,构建诱饵质粒pGBKT7-PS1TP3,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝细胞文库的质粒pACT2的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在涂有X-α-Gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上进行双重筛选,提取阳性酵母克隆的质粒转化大肠杆菌经BglII酶切后测序,进行生物信息学分析。结果筛选出30个与PS1TP3相互作用的蛋白,其中包括泛素蛋白酶E2、丝裂原活化蛋白激酶、β2-微球蛋白、磷酸酯酶张力蛋白等已知功能基因及4个未知功能序列,以及拼接新基因1个。结论成功克隆出PS1TP3蛋白的结合蛋白,为研究PS1TP3的分子生物学功能及HBV的致病机制提供了新的思路和线索。     

醒脑静注射液结合常规疗法治疗手足口病合并脑炎55例

目的观察醒脑静注射液治疗儿童手足口病合并病毒性脑炎的临床疗效。方法将110例手足口病合并脑炎患儿随机分为治疗组和对照组,各55例;两组均给予常规治疗,对照组加用利巴韦林静脉滴注,治疗组加用醒脑静注射液和利巴韦林静脉滴注,疗程10～14天。结果治疗组总有效率为87．3％,对照组为72．7％;治疗组临床疗效优于对照组（P〈0．05）;治疗组患儿体温消退时间、易惊缓解时间及神经系统体征转阴时间均短于对照组（P〈0．01）．结论醒脑静注射液可提高手足口病合并脑炎的临床疗效,缩短疗程。     

普罗布考联合辛伐他汀干预颈动脉粥样硬化的临床研究

普罗布考最初主要用于降低血清胆固醇。近年研究发现其有抗氧化及抗动脉粥样硬化（AS）作用,能够降低氧化低密度脂蛋白水平,预防或延缓动脉粥样硬化的发生和发展,同时可抗冠状动脉介入术后再狭窄,防治心血管意外,保护肝脏等。本研究随访应用普罗布考患者并观察疗效,     

唐山地区儿童病毒性脑炎病原学研究

目的:了解唐山市地区儿童病毒性脑炎的病原学特征。方法:选择2009年1月～2012年12月在唐山市妇幼保健院进行治疗的166例病毒性脑炎疑似患儿为研究对象,入选病例急性期均做血常规检查,采用荧光PCR方法对脑脊液进行病毒检测,采用ELISA的方法检测血清病毒IgM抗体。结果:所有标本中,EV71病毒检出率最高,为20.5%,其次为CV病毒,检出率为12.7%,位居第三位是HSV病毒,检出率为9.6%。PCR和ELISA检测对EV71、CV和HSV检出率有统计学差异(P<0.05)。﹤3岁和≥3岁儿童病原体总检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。PCR检测和ELISA检测对病原体总检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:唐山地区儿童病毒性脑炎的病原体仍以肠道病毒71型、柯萨奇病毒及单纯疱疹病毒为主;尤以3岁以下儿童易感,应加强此类儿童群体的防控;应联合应用PCR与ELISA检测,提高病原体的检出率。     

伴结节性硬化症的原发性免疫缺陷病一例

患儿,男,72 d,因"咳嗽10 d,发热1d"入院.患儿G2P2,40周,剖宫产娩出.患儿10d前出现咳嗽,口服头孢类药物及止咳药治疗无好转,入院前1d出现发热,体温最高39.1℃,无抽搐.出生1个月后在家中无明显诱因出现进乳差.自发病以来,精神尚可,尿便正常.患儿父母为非近亲结婚,否认家族遗传病史.其姐9岁,体健.入院时查体:T 37.0℃,R 39次/min,P 140次/min,体重4.6kg,神志清楚,反应欠佳,躯干部、双下肢、右前臂皮肤可见10余处色素脱失斑.咽充血,三凹征阴性.双肺可闻及中小湿哕音.心音有力,胸骨左缘第2～3肋间可闻及Ⅱ级收缩期吹风样杂音,不传导.腹平软,肝脾肋下未触及.神经系统查体无阳性体征.血常规:WBC 9.54×109/L,N 59.2％,L18.5％(1.76×109/L),Hb 72 g/L,PLT 197×109/L;C反应蛋白26 mg/L.尿便常规正常.