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101.
102.
103.
应用抑制性消减杂交技术筛选转化生长因子β1刺激LX02细胞的反式调节基因 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 构建转化生长因子(TGF)β1刺激大鼠肝星状细胞(LX02)反式调节基因的cDNA消减文库,筛选并克隆TGF β1反式调节相关基因,以阐明TGF β1介导肝纤维化的分子生物学机制.方法 以TGF β1刺激LX02细胞,同时以磷酸盐缓冲液刺激的LX02细胞作为对照.提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa Ⅰ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性多聚酶链反应.将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增;随机挑选克隆经PCR扩增后进行测序及同源性分析. 结果成功构建了TGF β1刺激LX02细胞反式调节基因的cDNA消减文库.文库扩增后得到146个200~1000bp插入片段的阳性克隆;随机挑取其中35个克隆进行测序,30个列序成功,并通过生物信息学分析发现有28个与已知基因序列和2个与未知功能基因序列高度同源.结论 应用抑制性消减杂交技术成功构建了TGF β1刺激LX02细胞反式调节基因的cDNA消减文库,筛选到一些与细胞生长调节、蛋白质合成,信号传导、细胞外基质代谢、扰脂质过氧化等密切相关的蛋白质编码基因,为进一步阐明TGF β1介导肝纤维化的分子生物学机制提供了线索. 相似文献
104.
目的:通过比对养血柔肝润筋开痹法与扶他林片的效果,为膝骨关节炎确定与完善临床治疗路径。方法:选择符合纳入标准的膝骨性关节炎符合Kellen-Lawrence内0-2级分级的患者60例,采用临床随机对照法分为两组,观察组和对照组各30例。观察组给予以体现养血柔肝润筋开痹为治法邓氏舒筋蠲痹汤内服治疗,以1周为一个疗程,连续治疗两个疗程;对照组以口服扶他林缓释片,以1周为一个疗程,连续治疗两个疗程。观察并比较两组患者治疗前和治疗后2周的疗效,分别记录视觉模拟评分(VAS评分)、WOMAC骨关节炎指数评分及总有效率。结果:1、视觉模拟评分(VAS评分):两组患者在治疗前组间情况经统计学比较无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后2周,与治疗前比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。2、WOMAC骨关节炎指数评分法:两组患者在治疗前组间情况经统计学比较无统计学意义(P>0.05),两组治疗后2周,与治疗前比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组与对照组比较,治疗组显著优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3、总有效率:治疗2周后观察组总有效率为96.67%,对照组总有效率为73.33%。差异具统计学意义(P<0.05)。结论:养血柔肝润筋开痹法能有效治疗膝骨性关节炎,且无副作用,有效地改善临床症状、体征,减缓膝骨性关节炎的病情恶化,有利于患者康复。 相似文献
105.
目的:探讨机械通气在治疗儿童危重症甲型H1N1流感肺炎的作用。方法:回顾性分析实施机械通气的11例危重症儿童甲型H1N1流感肺炎的临床资料,根据机械通气的选择时机分A组7例为早期机械通气组,B组4例为常规机械通气组。对该病机械通气指征、呼吸机参数、机械通气时间及治疗效果进行分析。结果:A组在出现气促、胸片两肺出现模糊影、血气示过度通气即予正压通气,呼吸机参数吸气峰压(PIP)达22 cm H2O、呼气末正压(PEEP)达7 cm H2O、氧浓度(FiO2)40%~50%即可改善低氧血症,总上机时间4~5天,全部治愈。B组出现明显低氧血症、肺部大量湿罗音、胸片示两肺白肺、血气示Ⅰ型甚至Ⅱ型呼吸衰竭时上呼吸机,呼吸机参数PIP高达25 cm H2O、PEEP高达10 cm H2O、FiO280%~100%仍不能改善低氧血症,机械通气持续24~48 h后经皮氧饱和度方升至90%以上,总上机时间7~10天,1例死亡、3例安全撤机。结论:早期机械通气是治疗儿童甲型H1N1流感肺炎合并急性呼吸窘迫综合征的有效途径;以最小的PEEP达到适宜的氧合指标是提高机械通气成功率、防止肺损伤的关键。 相似文献
106.
107.
108.
应用酵母单杂交技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅰ的结合蛋白 总被引:4,自引:1,他引:4
目的:寻找与乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因启动子Ⅰ(SPⅠ)相互作用的特异性结合蛋白,进一步探讨肝细胞中的蛋白对于HBV复制和表达的调节作用,阐明其分子作用机制。方法:应用酵母单杂交体系,以3重复串连的SPⅠ核心序列为“诱饵”,对酵母细胞中的人肝细胞cDNA文库进行筛选,应用DNA序列测定及生物信息学方法对筛选出的结果进行分析。结果:共获得了12个双阳性克隆,编码10种不同的蛋白。其中有3个未知功能蛋白,其余为血清类粘蛋白2、丝氨酸脱水酶、人肝细胞生长因子样蛋白等蛋白。结论:这些蛋白在酵母细胞内SPⅠ核心序列结合,可能是作用于SPⅠ的反式作用因子,但它们对HBV-SPⅠ是否有转录调控作用,笔者正进行进一步的研究。 相似文献
109.
背景:骨样骨瘤是于1935年由Jaffe首次报道的一种良性成骨性疾患,具有界限清晰的局限性病灶。最常见的部位为股骨、胫骨等长干骨,而足踝部的骨样骨瘤较为少见。目的:研究足踝部骨样骨瘤的临床特点以及外科治疗效果。方法:回顾性分析2010年1月至2013年10月在我院足踝中心确诊的7例足踝部骨样骨瘤的临床资料,其中男5例,女2例,平均发病年龄21.5岁。受累部位:距骨5例,跟骨2例。发病至确诊时间平均为16个月(8~25个月),症状为疼痛,服用非甾体抗炎药可缓解。2例发病之前有相关部位的外伤史。3例曾于我院或外院诊断为其他疾病,并行相关手术治疗。1例外院确诊骨样骨瘤,手术切除后1年复发。所有患者均接受肿瘤刮除+植骨治疗。结果:术后平均随访14个月(2~24个月),患者疼痛症状均消失,未见病灶复发,无植骨反应,无病理性骨折。结论:足踝部骨样骨瘤发病少见,其临床表现容易与其他疾病相混淆。所以,需要密切结合患病部位的临床表现、完善的影像学检查和准确的组织活检做出明确诊断,并给以相应治疗。 相似文献
110.
目的肺癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤之一,在中国,云南省宣威地区人群以肺癌高发、恶性程度高、预后极差等特点引起了广泛的关注和研究。在对于宣威肺癌的研究中,一直缺乏特异性高、与病情变化相关性高、检测方法简便快速的肿瘤标志物。肿瘤特异性蛋白70(tumor specific protein 70,SP70)是单克隆抗体NJ001识别的特异性抗原,在非小细胞肺癌组织上的表达率为80%~90%,在肿瘤细胞的恶性增殖和侵袭转移中发挥着极其重要的作用。探索肿瘤标志物SP70与宣威肺癌相关性,有助于此类癌症的早期诊断、动态监测以辅助判断病情进展或治疗效果。因此本文就肿瘤标志物SP70在宣威肺癌诊断中的应用现状,对其特点进行分析,从宣威肺癌的疾病背景、肿瘤标志物SP70与宣威肺癌的相关性及检测方法等方面出发,探究肿瘤标志物SP70在宣威肺癌诊断和治疗中的应用,以期为宣威肺癌的早期诊断和预后判断提供新的思路。 相似文献