重组人DcR3腺相关病毒的构建和表达

目的克隆人DcR3基因于腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)载体pAAV-IRES-hrGFP中,以获得高感染滴度及纯度的重组人DcR3腺相关病毒,为将其用于感染移植肝,研究其对大鼠移植肝的保护作用打下基础。方法用基因重组的方法构建含全长人DcR3基因的重组腺相关病毒骨架质粒,利用脂质体法将腺相关病毒载体系统共转染入病毒包装细胞AAV-293细胞中,合成重组DcR3腺相关病毒,经PEG/氯仿纯化,用SDS-PAGE鉴定其纯度,扫描电镜观察病毒颗粒形态,倍比稀释法测定重组病毒的感染滴度。并用重组病毒感染COS-7细胞鉴定DcR3的表达。结果正确构建组装重组人DcR3腺相关病毒,纯化后病毒感染滴度为1.1×1010U/mL。在重组DcR3腺相关病毒感染的COS-7细胞上清液中检测到了DcR3的表达。结论成功构建了重组人DcR3腺相关病毒,为下一步研究DcR3对大鼠移植肝的保护作用打下基础。     

稳心颗粒在治疗心律失常中的优势

经过多年实验研究及临床应用,稳心颗粒的抗心律失常作用得到了证实,药理研究表明稳心颗粒可推迟心律失常的出现时间,缩短心律失常持续时间;通过全细胞膜片钳技术研究结果提示,稳心颗粒的甘松提取液对心肌细胞膜的离子通道有抵制作用。稳心颗粒作为中药组方,对功能性心律失常、老年及儿童心肌炎患者伴发的心律失常均有良好的疗效。     

胆管细胞源性恶性肿瘤的外科影像学评估

起源于胆管细胞的胆系恶性肿瘤包括肝脏胆管细胞癌、胆管癌和胆囊癌.进展期胆管细胞源性肿瘤除了粘膜下浸润和表层扩展外,常直接累及或浸润主要肝胆管及周围结构,包括门静脉、肝动脉、肝脏、胰腺等.同时尚有沿着淋巴管和周围神经浸润生长的特性[1].这样的解剖学特点和生物学特性使得针对进展期胆管细胞源性恶性肿瘤的根治性手术成为外科临床的难题.     

专题论坛二-数字化医院的设备及应用：放射信息系统

放射信息系统(radiology information system．RIS)是在放射科的相关事务中用计算机及通讯设备收集、存储、处理、检索和通讯病人的诊断、治疗及科室管理数据．满足被授权用户功能需求的信息系统．     

雷帕霉素抑制大鼠移植肝胆管上皮细胞增殖作用的研究

目的探讨雷帕霉素对大鼠移植肝胆管上皮细胞增殖及其周围成纤维细胞活化的抑制作用。方法“二袖套法”建立大鼠原位肝移植模型,并随机分为供肝冷保存1h组、12h组、雷帕霉素组（冷保存12h组术后给予雷帕霉素）、对照组。分别于术后1、3、7、14d检测血清ALT、TB、ALP,免疫组化法检测各组胆管上皮细胞增殖率及肌纤维母细胞分布,并统计各组生存率。结果冷保存12h组术后生存率明显低于冷保存1h组（P=0.0174）,血清ALT〉200IU/L、ALP〉160IU/L、TB〉3.6μmol/L,持续高于冷保存1h组（ALT〈160IU/L、ALP〈200IU/L、TB〈3.6μmol/L）,各时相点胆管上皮细胞增殖率（7%,27.8%,23.1%,17.8%）显著高于冷保存1h组（2%,6%,2.6%,2.3%）和对照组（1.3%）。冷保存12h组术后7、14d可见胆管周围较多肌纤维母细胞聚集;雷帕霉素组术后2周生存率与冷保存12h组接近（P=0.89）,胆管上皮细胞增殖率（5.9%,15.8%,13.6%,11.4%）明显降低,胆管周围肌纤维母细胞分布较少。结论冷保存-再灌注直接损伤肝脏,诱导胆管上皮细胞增殖及肌纤维母细胞聚集,雷帕霉素明显抑制胆管上皮细胞增殖及肌纤维母细胞活化并对移植肝具有保护作用。     

乳糜腹水的诊断和治疗

乳糜腹水是由于外伤或淋巴管阻塞而致的内淋巴瘘，使含脂丰富的淋巴液积聚腹腔而形成的乳白色腹水。较罕见，处理不当死亡率高。兹重点对乳糜腹水的病因、诊断和处理原则进行复习，供临床诊治时参考。     

应用抗菌药物防治外科感染的指导意见（草案）Ⅻ——胰肾联合移植术后感染的防治

胰肾联合移植手术(SPK)是治疗糖尿病合并终末期肾病的最有效手段之一。同所有器官移植术后患者相似，SPK术后患者面临两大问题：一是随时可能出现的移植物排斥反应，二是感染。由于SPK患者术前已经罹患糖尿病，术后又接受免疫抑制治疗，因而感染在目前仍是造成移植物丧失功能甚至危及患者生命的主要原因之一。     

肝硬化环境下黏附分子表达对肝癌转移的影响

目的 探讨肝硬化环境对肝癌肝内、外转移的影响.方法 健康雄性BALB/c小鼠,采用CCl4诱导建立肝硬化小鼠模型并设正常对照组.分别在肝硬化组及对照组的肝脏左叶上原位种植小鼠肝癌细胞,术后1、2、3周收取标本.通过大体及病理切片观察肿瘤的生长及转移行为.检测了肝脏组织中血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)和E-钙黏附素(E-cadherin)的表达情况.结果 术后观察发现,肝硬化基础上的肝癌更容易出现肝内转移(14/19)与远处转移(4/19),与对照组相比(5/17,1/17)差异具有统计学意义(P＜0.05).同时肝硬化组黏附类分子较对照组表达明显上调(P＜0.01).钙黏附素表达则无明显差异.结论 肝硬化环境更利于肝癌发生肝内、外转移.这种转移行为可能与肝硬化组织中各种黏附因子表达增高有关.     

低氧诱导因子-1α在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的表达

目的　观察低氧诱导因子 1α(HIF 1α)在大鼠脊髓缺血再灌注损伤 (SCII)中的表达变化及其意义。方法　制备大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型 ,分别于再灌注后 8、12、2 4h ,3和 5d取腰骶段的脊髓 ,以假手术组大鼠相同阶段的脊髓为对照 ,采用Westernblotting法和免疫组织化学检测伤后脊髓组织中HIF 1α的表达变化。结果　再灌注 8h左右 ,HIF 1α在整个脊髓灰质开始表达上调 ,在 2 4h达峰值 ,在伤后 3d表达回落 ,5d显著减少 ,灰度值在 8、12、2 4h ,3和 5d不同时相 ,分别为 (2 11.3 9± 5 .5 8)、(184.5 3± 6.5 6)、(167.3 9± 5 .76)、(198.44± 3 .98)和 (2 2 8.3 9± 2 .87) ,分别与假手术组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。HIF 1α在灰质中的表达以中央管周围和前角、后角最为显著。再灌注 2 4h和 3dHIF 1α在脊髓白质出现弱的表达 ,灰度值分别为 (2 3 8.15± 6.87)和(2 3 6.87± 7.41) ,分别与假手术组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。但在白质后索 ,HIF 1α的表达相对较强。HIF 1α在灰质中主要定位于神经元和星形胶质细胞 ,在白质中主要定位于神经胶质细胞。结论　HIF 1α呈现时序性的表达变化在脊髓缺血再灌注损伤中 ,可能是一种重要的脊髓缺血再灌注损伤的适应性调节。     

肝脏移植术后肺部感染病原体调查及危险因素分析

目的　总结肝移植术后肺部感染的病原体分布特点并探讨其危险因素。方法　对我院1999年 11月至 2 0 0 3年 6月间的 130例肝脏移植进行前瞻性调查 ,统计其发病率、病死率 ,描述其时间分布、病原学分布 ,利用非条件Logistic回归方程筛选术后肺部感染危险因素。结果　肝移植术后肺部感染发病率为 32 .31% ,病死率为 35 .71%。 78.5 7%的肺部感染发生在术后第一周。革兰氏阴性菌是最常见肺部感染病原体且多高度耐药。肝移植术后肺部感染危险因素包括 :术后使用呼吸机≥ 2d、长时间手术、纤支镜检查或治疗、术前大量腹水、术后气管切开、术后肾功能异常、术后肺水肿、术后长时间留置胃管、术中长时间低血压。结论　肝移植术后肺部感染多发生在移植术后早期 ,具有高发病率、病死率高的特点。病原体多为具耐药性的革兰氏阴性菌。围手术期多方面因素均可能成为肺部感染的诱因 ,其防治工作必须贯穿整个围手术期