ERK在NGF诱导PC12 细胞分化中的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)在NGF。诱导的PC12细胞分化中的作用机制。方法以NGF处理PC12细胞建立分化模型,运用免疫印迹检测不同浓度不同作用时间时NGF对ERK1／2蛋白和磷酸化ERK1／2蛋白水平的影响,并观察MAPK／ERK激酶(MEK)抑制剂U0126对NGF诱导的细胞形态学改变的影响。结果ERK1／2蛋白的磷酸化呈现NGF剂量和时间依赖性。NGF作用细胞5min即可观察到明显的ERK1／2蛋白磷酸化,持续1h左右,2h时降低到初始水平,而细胞形态的改变出现在NCF作用12h以后。倒置相差显微镜观察可见PC12细胞分化的程度与ERK1／2活化持续的时间正相关,U0126可完全即时抑制ERK1／2的活化,而ERK1／2活化的抑制可完全阻断。NGF诱导的PC12细胞分化。结论ERK1／2的活化是PC12细胞发生分化的必需事件,其活化时间的长短对分化具有决定作用。     

Survivin启动子介导的胞嘧啶脱氨酶(CD)自杀基因的抗肿瘤研究

目的 探讨Survivin启动子介导的CD/5-FC自杀系统的抗肿瘤效果.方法 利用Survivin启动子替换pEGFP-N1载体上的巨细胞病毒(CMV)启动子,构建重组表达载体pSurP-EGFP,通过报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达确定Survivin启动子的特异性;将酿酒酵母的胞嘧啶脱氨酶(CD)基因克隆在pSurP-EGFP中,构建成重组载体pSurP-CD,转染肿瘤细胞后利用毛细管电泳仪检测前药5-氟胞嘧啶(5-FC)的转化效率,同时分析肿瘤细胞的凋亡.结果 GFP的表达表明Survivin启动子具有较好的肿瘤靶向性;毛细管电泳检测表明CD能够有效地将5-FC转化为5-FU,显微镜观察和流式分析表明了Survivin启动子介导的CD的抗肿瘤效果.结论 Survivin启动子能有效地介导CD自杀基因的表达,具有较好的靶向性抗肿瘤效果.     

发展中国家专利药品高价问题及对策研究

当前,对药品进行专利保护使得广大发展中国家专利药价居高不下,并由此引发了药品可及性低与公共健康等亟待解决的问题。本文在对造成发展中国家专利药品高价原因剖析的基础上,借鉴发达国家曾经采取的做法,结合发展中国家药品专利保护的实例,对解决该问题提出五点对策。     

补益类中药黄芪在促进抗肿瘤免疫功能中的作用

黄芪是传统补益类中药,具有广泛的药理学作用.在查阅大量文献基础上,综述了黄芪补益与增强机体免疫力的关系,并探讨了黄芪及其有效成分发挥抗肿瘤免疫功能的可能机制及其抗肿瘤临床应用情况.     

Survivin-2B诱导人乳腺癌细胞凋亡的初步研究*

 目的：探讨存活蛋白2B (survivin-2B)在诱导肿瘤细胞凋亡中的分子机制。方法：将survivin-2B基因插入真核表达载体pCDNA3.1,得到重组载体pCDNA3.1-survivin-2B。将空载体pCDNA3.1及重组载体pCDNA3.1-survivin-2B分别转染人乳腺癌细胞株MCF7,转染后48 h,用annexin V/7-AAD染色法分析细胞凋亡情况,利用碘化丙啶染色法分析转染对细胞周期的影响;同时提取总RNA并反转录成cDNA,进行多重聚合酶链反应。利用GeXP多基因表达分析系统检测21个与肿瘤相关基因的表达情况。结果：过表达survivin-2B基因导致MCF7细胞凋亡与细胞周期阻滞,并引起8个基因表达上调,2个基因表达下调。变化最大的为醛脱氢酶4家族成员A1（ALDH4A1）,表达下降48%;变化最小的为胞质分裂调控蛋白1（PRC1）,上调1.08倍。结论：Survivin-2B能够诱导细胞凋亡与细胞周期G2/M期阻滞,并引起部分肿瘤相关基因的表达变化。     

药品专利保护的博弈分析——从"公地悲剧"到"反公地悲剧"

在医药技术、医药经济和公共健康问题倍受关注的今天,如何对药品专利进行保护,已成为国内外关注的焦点.本文从博弈论的"公地悲剧"和"反公地悲剧"理论出发,结合国内外药品专利保护的实例进行对比分析,指出药品专利保护制度的"双刃剑"性质,并结合实际提出了寻求博弈均衡的对策建议.     

糖尿病酮症酸中毒病人的救治及护理体会

糖尿病酮症酸中毒(DKA)是糖尿病常见并发症之一,由于机体内糖代谢紊乱加重而导致脂肪分解加速造成大量酮体积聚,消耗体内储存碱导致代谢紊乱而伴发代谢性酸中毒[1],其病程进展迅速,常常造成多器官功能衰竭,严重威胁病人的生命。2005年7月—2007年7月我院内分泌科共收治糖尿病病人241例,通过积极治疗和精心护理,取得了满意的效果。现将救治和护理体会报告如下。1资料与方法1.1一般资料2005年7月—2007年7月我院内分泌科共收治糖尿病病人241例,其中2型糖尿病酮症酸中毒27例,1型糖尿病酮症酸中毒14例,共占糖尿病住院人数17%;男31例,女10例,年…     

TCRVβ7.1基因转染对肝癌细胞刺激的外周血单个核细胞ERK信号通路和IFN-γ表达的影响

目的： 研究肝癌特异性识别基因TCRVβ7.1表达重组体转染外周血单个核细胞(PBMCs)后对T细胞细胞因子表达的影响和信号通路的激活作用。方法: 以肝癌特异性T细胞受体Vβ7.1转染PBMCs,流式细胞仪检测TCRVβ7.1表达量;Western blotting检测ERK1/2表达量及磷酸化水平（p-ERK）的改变;用ELISA法检测白细胞介素-4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）的表达量。结果: TCRVβ7.1基因转染健康人PBMCs并得到有效表达,转染TCRVβ7.1基因的PBMCs 与肝癌细胞共培养后ERK蛋白磷酸化水平明显高于未转染组(P<0.01)。p-ERK1/2水平与T细胞激活有关。ELISA结果表明,转染PBMCs细胞与肝癌细胞共培养后,IFN-γ水平明显高于未转染组,而IL-4无明显改变。结论: TCRVβ7.1转染PBMCs与肝癌细胞共培养后,ERK信号通路被激活,IFN-γ表达增高。     

两种营养评估表应用于老年卧床住院患者的一致性评价

目的 研究营养风险筛查2002和微型营养评估简表应用于临床老年卧床患者营养不良风险评估中的一致性评价,为指导老年卧床患者营养干预提供依据。 方法用营养风险筛查 2002和微型营养评估简表对120例患者入院24h内进行营养评价,评价结果与经人体测量及生化检验获得的营养指标进行比较研究,使用Kappa分析检验两种营养评估表评价营养不良的一致性。结果营养风险筛查 2002量表中营养不良发生率68.3%,微型营养评估简表中营养不良发生率63.3%。年龄越大,发生营养不良的风险随之增加,差异有统计学意义（P<0.05）;随着营养不良的发生,血红蛋白、总蛋白、前白蛋白、总淋巴细胞数值随之减小,差异有统计学意义（P<0.001）;营养风险筛查 2002和微型营养评估简表评价老年卧床患者营养不良的一致性率为90%（108/120）,Kappa值为0.778,95%CI=0.655～0.890,P<0.001。 结论营养风险筛查 2002和微型营养评估简表评价老年卧床患者营养不良具有较高一致性,二者均可用于老年卧床患者入院时营养不良的评价标准,为早期的临床营养治疗提供依据。