保存时间对去白悬浮红细胞上清中血小板相关生长因子蓄积的作用及其对肿瘤细胞体外增殖的影响研究

目的:探讨保存时间对储存前去白红细胞(LR-pRBC)上清中血小板相关生长因子蓄积的作用及其对肿瘤细胞体外增殖的影响。方法:悬浮红细胞(pRBC)经200 ml红细胞白细胞滤器去除白细胞;随后用四联袋等量分装。所有血袋置于2℃-6℃常规保存。于保存第0、14、21和35天各取1分装袋,以1 006×g离心10 min后留取上清。采用ELISA方法测定血小板衍生生长因子(PDGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的蓄积浓度。体外培养Hep G2肝癌肿瘤细胞贴壁后,加入保存第0天和35 d LR-pRBC上清,与Hep G2细胞共同孵育48 h后,应用MTT法测定上清吸光度,以反映肿瘤细胞的体外增殖程度。结果:LR-pRBC上清中VEGF和PDGF浓度蓄积量随保存期延长进一步升高,VEGF在保存末期35 d时,浓度达900.16(95%CI,552.26-1248.07)pg/ml,而0 d LR-pRBC上清中浓度为[611.84(95%CI,356.45-867.23)pg/ml],其浓度有统计学差异(P0.05)。PDGF在第0天LR-pRBC上清中的初始浓度为2.23(95%CI,0-5.37)ng/L,35 d末其浓度蓄积达5.66(95%CI,-1.16-12.48)(P=0.073)。LR-pRBC上清同Hep G2细胞体外共孵育48 h后,保存35 d的LR-pRBC上清OD值为0.40(95%CI,0.38-0.42),明显促进Hep G2细胞的增殖(P0.05)。结论:LR-pRBC中残留血小板经2℃-6℃储存后,激活、崩解、释放颗粒物质,造成PDGF和VEGF随保存期延长的进一步蓄积,从而导致保存期末的LR-pRBC上清促进肿瘤细胞体外增殖。     

葛根总黄酮对实验性哮喘大鼠的预防效应

目的:探讨脾T淋巴细胞亚群在实验性大鼠哮喘模型中的表达,和葛根总黄酮对T淋巴细胞亚群及对实验性哮喘的预防作用。方法:实验于2003-03-01/04-02在解放军总医院实验动物中心完成。用卵蛋白致敏并激发建立了SD大鼠哮喘模型,32只大鼠随机分为4组,每组8只。为正常对照组、卵蛋白激发哮喘发作组、葛根总黄酮灌胃组、葛根总黄酮预防组,每组分别测定动脉血血气作为哮喘严重程度的缺氧评定指标,测定血液中白细胞介素4水平,同时采用流式细胞仪观察脾T细胞亚群的变化。结果:4组32只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠血气结果:卵蛋白激发哮喘发作组动脉血氧分压低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组犤(4.24±2.20),(10.04±1.13),(9.68±1.35)kPa,P<0.01犦;卵蛋白激发哮喘发作组剩余碱低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组犤(1.82±1.31),(2.77±2.18),(2.67±2.18)mmol/L,P<0.01犦;卵蛋白激发哮喘发作组血氧饱和度低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组犤(51.8±35.9),(64.55±29.87),(62.51±40.31)%,P<0.05犦。②各组大鼠脾T淋巴细胞亚群变化:葛根总黄酮预防组CD4+低于卵蛋白激发哮喘发作组(13.19±3.33,18.37±1.98,P<0.01),葛根总黄酮预防组CD8+高于卵蛋白激发哮喘发作组(8.01±0.42,6.25±0.63,P<0.01),葛根总黄酮预防组CD4+/CD8+低于卵蛋白激发哮喘发作组(1.61±0.35,2.94±0.32,P<0.01)。③白细胞介素4:卵蛋白激发哮喘发作组为(85.2±12.3)ng/L,比正常对照组和葛根总黄酮预防组大鼠显著增高犤(3.3±0.7),(7.7±1.0)ng/L,P<0.01犦。结论:脾T淋巴细胞亚群的活化参与哮喘的发病过程,葛根总黄酮可以抑制免疫细胞T淋巴细胞的活化和过表达,可能通过恢复CD4+/CD8+比值,加强CD8+T淋巴细胞对CD4+T淋巴细胞的抑制作用,抑制嗜酸性粒细胞增生和IgE的合成从而阻断哮喘发病。     

青少年女性中长跑运动员集训前后体能变化与中药的调控作用

目的:观察青少年女性中长跑运动员这一特殊群体在大运动量集训期前后血清细胞因子及生化指标的变化,探讨运动应激条件下运动员机体变化和细胞因子免疫网络的应答机制以及纯中药制剂--纳米力谷源胶囊对其的调节作用。方法:于2004-06选择北京市某体校青少年女性中长跑运动员20名,为运动员组。又分为运动员对照组和运动员服药组,每组10名。取自无免疫性疾病、无现症、体检健康的青少年女性10名,为正常对照组。运动员服药组服用纳米力谷源胶囊(北京长城制药厂生产,批号:20040201,所含成分为葛根素、精氨酸和玉米抗氧化活性物质),3次/d,2粒/次。两组运动员共同参加训练,使用相同的训练方案:训练时间2004-06-22/07-28,共5周。每日上午:20km×7次/周×5周=700km;下午:节奏跑10km×3次/周×5周=150km,随意跑40min×2次/周×5周=400min,其余两天下午休息。运动员组休整后于2004-06-21取第1次血,第2天开始5周集训,并于集训后2004-07-29取第2次血。应用EVIDENCE180全自动化学发光生物芯片分析仪和HITACHI7600型全自动生化分析仪对20名青少年女性中长跑运动员集训前后及服药后血液标本分别进行12项细胞因子(白细胞介素1α、白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素10、血管内皮生长因子、γ-干扰素、表皮生长因子、单核细胞趋化性肽1、肿瘤坏死因子α)和33项生化指标(三酰甘油、胆固醇、载脂蛋白A1、载脂蛋白B、高密度脂蛋白C、低密度脂蛋白C、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、血清白蛋白、总胆红素、直接胆红素、总胆汁酸、钠、钾、氯、二氧化碳、钙、磷、镁、铁、不饱和铁结合力、总铁结合力、葡萄糖、尿素氮、肌酐、尿酸、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、淀粉酶、肌酸激酶同工酶)的定量检测,比较运动应激对机体的影响。结果:纳入运动员20名和正常对照青少年10名,均进入结果分析。①血清细胞因子检测结果:女性青少年长跑运动员在休整后安静状态下与正常人相比较表皮生长因子显著偏低[运动前、正常对照分别为(18.94±14.04),(62.97±38.07)ng/L];而运动员在一个时期的强度训练以后与运动前相比白细胞介素8显著下降[运动前后分别为(21.82±11.52)ng/L,<9.7ng/L],血管内皮生长因子也显著下降[运动前后分别为(113.13±47.34),(96.90±47.30)ng/L],表皮生长因子显著上升[运动前后分别为(18.94±14.04),(58.93±25.48)ng/L];运动员服药组在经过相同的训练期后与运动员对照组相比白细胞介素1β显著降低[运动员服药组、运动员对照组分别为(2.97±0.82),(3.90±0.53)ng/L],且接近正常人水平。②血清生化指标检测结果:女性青少年长跑运动员在一个时期的强度训练以后与运动前相比三酰甘油显著下降[运动前后分别为(0.74±0.21),(0.51±0.10)mmol/L]、胆固醇显著下降[运动前后分别为(4.29±0.83),(3.96±0.76)mmol/L]、高密度脂蛋白显著下降[运动前后分别为(1.60±0.24),(1.50±0.28)mmol/L]、血清白蛋白显著下降[运动前后分别为(45.77±1.57),(44.23±1.88)g/L]、葡萄糖显著下降[运动前后分别为(5.39±0.20),(4.85±0.30)mmol/L],尿酸显著上升[运动前后分别为(232.34±32.23),(278.89±22.69)μmol/L],可能与大运动量训练后造成机体贮存消耗有关,而钠、钾、氯显著下降,可能与出汗等生理反应有关。而运动员服药组服药后除三酰甘油显著上升[服药后、运动后分别为(0.89±0.41),(0.51±0.10)mmol/L]外,其他各项生化指标与运动员对照组相比变化不是很明显。结论:大运动量的集训可导致运动员机体应激性改变,免疫力下降,还可造成机体内贮能物质的大量消耗。纳米力谷源胶囊可有效的增强运动员机体的抗应激能力,提高运动员的免疫力和抗疲劳能力。     

132例血液病患者血小板输注效果的影响因素分析

目的 探讨影响血液病患者血小板输注疗效的相关因素.方法 对2014年1月至6月在我院输注血小板的132例血液病患者的临床资料进行回顾性分析.以输血后血小板增高指数(CCI值)来评价血小板输注效果,同时对影响血小板抗体阳性率的相关因素如病因、患者性别、输注次数、血型及年龄和影响输注效果的相关因素如抗体强度、血小板种类、保存时间、患者体重及并发症等进行统计学分析.结果 132例血液病患者,抗体总阳性率18.94％,输注1376次,有效率为59.23％;有效组抗体阳性率为8.33％,远低于无效组抗体阳性率31.67％(P＜0.05).不同疾病、输注次数和不同年龄阶段血小板抗体阳性率差异均有统计学意义(P＜0.05).ITP组抗体阳性率最高,随着输注次数的增多,血小板抗体阳性率增高,在三个年龄段中21～40岁年龄段的抗体阳性率最高.血小板抗体的产生与患者性别和血型无关.随着抗体强度和患者体重的增加,血小板输注有效率均降低;辐照机采血小板的输注有效率最高;在同种类型的血液病患者中,无并发症患者的血小板输注疗效明显优于有并发症的患者;血小板保存天数与输注有效率无明显相关性.结论 血液病患者的疾病、年龄、血小板输注次数、血小板抗体的产生、抗体强度、血液成分、体重和并发症对血小板输注均有一定的影响.     

白细胞滤除对新鲜冰冻血浆质量影响的研究

目的探讨白细胞滤除对新鲜冰冻血浆（FFP）质量的影响。方法32例新鲜冰冻血浆解冻后滤除白细胞,检测滤除前后血浆容积,血浆中蛋白、Ⅴ因子、Ⅷ因子、纤维蛋白原（Fg）以及补体的含量变化。结果血浆中白细胞滤除率均〉99.9%;滤除白细胞前后血浆容积回收率无明显变化（P〉0.05）;血浆蛋白含量,血浆中Ⅴ因子、Ⅷ因子、Fg和补体含量无明显差异（P〉0.05）;去白细胞血浆的血培养检测均未见细菌生长。结论新鲜冰冻血浆解冻后迅速进行白细胞滤除能有效去除绝大多数白细胞及其复合物,对血浆中的蛋白及凝血因子含量无显著影响。     

新冠肺炎疫情期间北京某三甲医院临床用血特点分析

目的通过对疫情期间临床用血特点的分析,为今后发生同类型疫情时制定血液保障方案提供参考依据。方法查阅2020年1月21日～2020年3月21日我院疫情期间住院和门急诊患者的用血记录,并与同期2019年1月21日～2019年3月21日的住院、门急诊患者用血量进行比较分析。结果疫情期间本院用血总量为10 616.3 U,红细胞总量为5 130.5 U(48.33%),其中门急诊患者用血总量为1 410.5 U,红细胞用血量为1 037 U(73.52%),与去年同期比较用血总量下降5.88%,红细胞用血量下降5.47%;门急诊红细胞用量占用血总量20.21%,去年同期门急诊红细胞用量占用血总量13.23%;疫情期间平均每人次红细胞用血量、红细胞用血率与去年同期相比均有统计学意义;结果还显示门急诊患者红细胞用血量中,以消化道出血和血液病患者为主,多发伤患者用血量与去年同期相比显著下降(90.38%);住院患者中,手术患者的红细胞用血量较治疗患者用量明显下降。结论疫情期间我院临床用血总量显著下降,门急诊患者红细胞用量显著增加,但多发伤患者的红细胞用量显著降低。     

红细胞密度与天龄相关性研究

目的研究红细胞密度与天龄的相关性,不同密度红细胞所对应的平均天龄。方法采用非连续密度梯度分离方法,将全血红细胞分为6个不同密度的红细胞部分。测定不同部分红细胞丙酮酸激酶活性,通过各部分丙酮酸激酶活性与全血红细胞丙酮酸激酶活性的比值(Ratio)推测各部分红细胞平均天龄;测定各部分红细胞膜表面磷脂酰丝氨酸(PS)表达阳性率,来反映红细胞密度与衰老(天龄)的相关性。结果根据红细胞比值,各部分红细胞平均天龄由低密度至高密度依次为11.5、466、3.87、4.6、80.5、102.2 d。随着红细胞密度的增加,PS表达阳性率也逐渐增高。结论不同密度的红细胞代表不同的细胞天龄,采用密度梯度分离方法可以分离出不同天龄段的红细胞,为进一步研究红细胞天龄与功能的相关性提供了方法学基础。     

黄芪提取物免疫调节作用的实验研究

目的：探讨黄芪提取物的免疫调节作用。方法：实验设三个浓度的药物组和空白对照组，采用小鼠内脏体重比、迟发型变态反应（DTH）（足跖增厚法）、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验（MTT法）、脾脏抗体生成细胞检测（Jeme改良玻片法）；半数溶血值（HC50）的测定；碳粒廓清试验；腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验（半体内法）；NK细胞活性测定（乳酸脱氢酶LDH测定法）试验。结果：黄芪提取物对小鼠体重、脏器重比无明显影响；对淋巴细胞转化功能和NK细胞活性及细胞吞噬指数与对照组比较也无明显差异；足跖肿胀度与对照组比较均有显著性差异；其抗体生成细胞数中、高剂量组明显增高，而低剂量组则无显著差别；半数溶血值也明显高于对照；中、高剂量组的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数与对照组比较均有显著性差异。结论：黄芪提取物具有一定的免疫调节作用。     

纳米化技术对抗疲劳药物的增效研究

目的：探讨药物力谷源不同制作加工工艺后的抗疲劳功能差异。方法：普通力谷源和力谷源纳米制剂分别喂养小鼠，通过小鼠负重游泳实验观察不同喂养组之间游泳时间差异，分析抗疲劳能力。结果：与对照组及力谷源喂养组比较，力谷源纳米制剂喂养组可明显延长小鼠负重游泳时间（P〈0.001）。结论：力谷源纳米制剂具有抗疲劳作用。     

原子力学显微镜对液体纳米药物的直接观察

目的：建立液体纳米药物的观察方法。方法：用原子力学显微镜观察液体纳米药物。结果：未纳米药物在云母片上呈不均匀分布，呈现大小不同的颗粒，而液体纳米药物则呈均匀分布，并且颗粒比较均一。结论：为进一步探讨液体纳米药物在生物医学的应用及临床价值提供了依据。