pIRES2-HPV18E2-EGFP质粒重组及其在HeLa细胞中的表达

目的构建人乳头瘤病毒18型E2基因片段(HPV18E2)重组表达质粒并予以表达,为进一步研制HPV18相关疾病提供材料.方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,PCR方法扩增HPV18E2DNA片段,将HPV18E2DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重组质粒(pIRES2-HPV18E2- EGFP).用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性.重组质粒转染Hela细胞.RT-PCR鉴定转染细胞中E2基因.结果 PCR扩增DNA片段约为1 kb,与预期结果相同.克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2- EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同,而且测序验证插入片段全序列无改变.转染并用G418筛选后,在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达.转染细胞RT-PCR出现特异性条带.结论成功构建表达HPV18 E2蛋白的靶细胞模型.     

蛋氨酸合酶基因A275 6G位点多态性与非综合征型唇腭裂的关联性研究

Objective To study the association of the A2756G polymorphism of the methionine synthase (MS) gene with nonsyndromie cleft lip with or without cleft palate (NSCL/P) in Chinese. Methods Ninety-seven NSCL/P case-parent triads were selected as the case group. One hundred and four healthy subjects and their biological parents were selected as control group. For all subjects the A2756G polymorphism of the MS gene was examined by PCR-RFLP method. Results There was no statistical difference in genotype and allele frequencies for MS A2756G variants among family members between case group and control group. The GG genotype was not detected in the offsprings and mothers. The odds ratio and confidence interval of genotype AG in offspring, father and mother were 1.78(0.74-4.34), 0.80(0. 36-1.79) and 1.26(0. 54-2.93) respectively. The odds ratio and confidence interval of allele G in offspring, father and mother were 1.70(0.78-3.73), 0. 88(0. 49-1. 75) , and 1.23(0.59-2.60) respectively. The G allele did not increase the risk of NSCL/P. Transmission disequilibrium test (TDT) analysis yielded no evidence of linkage disequilibrium (χ2=0.034,P>0. 05). The results of haplotype-based haplotype relative risk (HHRR) analysis (χ2=0.03,P>0.05) and family-based association tests (FBAT) (Z=0. 186, P> 0.05) failed to show association between the MS A2756G variant and the risk of NSCL/P. Conclusion The A2756G polymorphism of the MS gene was not associated with NSCL/P in Chinese in the present study.     

上皮型钙黏蛋白在宫颈癌中作用研究进展

上皮型钙黏蛋白（E-cadhenn，E-CD）是一种钙依赖性细胞黏附分子，分布于人和动物的上皮细胞，是维护上皮细胞形态和结构的完整性和极性的重要分子。近年来大量研究表明，E-CD及其复合物与宫颈癌的发生发展密切相关，对近年来E-CD在宫颈癌方面的研究作一综述。     

固化磷酸钙加钢板治疗肱骨近端粉碎性骨折

目的 讨论固化磷酸钙填塞和三叶钢板固定术治疗肱骨近端粉碎性骨折的疗效。方法 回顾分析2002年1月至2004年12月收治的11例肱骨近端粉碎性骨折临床资料，经肩关节前入路进入复位，三叶草状钢板螺丝钉内固定，并在断端骨折缺失部填入金世植骨灵，术后吊带悬吊，3周后功能锻炼。结果 11例均获随访（平均8．3个月），肩关节外展〉90°，能生活自理，X线片示无肱骨头坏死，骨折对位对线好，按Neer功能评分标准，优9例，良2例。结论 三叶板固定和固化磷酸钙植骨，能够保持骨断端的连续性，维持断端的稳定，对于伴有严重骨质疏松的老年患者，避免人工关节置换。     

自拟活血祛瘀散外敷治疗急性腕关节扭挫伤

腕关节损伤除包括组成腕关节的尺桡骨下端与8块腕骨及5个掌骨基部诸骨构成骨的骨折外；还包括连接以上骨组织并构成关节的外来韧带与内在韧带，尺腕三角软骨盘的急慢性扭、挫、撕裂伤。对于急性外伤后的腕部疼痛，活动受限，无力、肿胀等，即外伤性腕关节损伤，在排除腕关节骨折后，主要指外伤性参与腕关节构成的韧带、软骨的急性损伤。我科自2002年1月到2005年3月应用自拟活血祛瘀散外敷治疗急性腕关节扭挫伤110例，取得满意疗效，现报告于下。     

新生儿永存动脉干1例

患儿 ,男 ,57ｈ ,因“全身皮肤发灰 ,呻吟样呼吸2 0ｍｉｎ”由产科转入。系第 3胎第 1产 ,孕 4 1+2 周 ,因“胎儿宫内窘迫”剖宫产 ,出生体重 2 950 ｇ ,Ａｐｇａｒ评分 1分钟及 5分钟均为 10分 ,羊水Ⅲ°污染。查体 :Ｔ 36℃ ,Ｒ 80次 /ｍｉｎ ,刺激无反应 ,全身皮肤苍白发灰、下腹部散在数个出血点 ,指压皮肤充盈 >3ｓ,前囟平坦 ,双目凝视 ,瞳孔等大等圆 ,对光反应迟钝。唇绀 ,鼻扇 ,两肺呼吸音粗 ,心率 140次 /ｍｉｎ ,心音有力、无杂音。肝右肋下 4ｃｍ ,质中 ,脾未及 ,四肢瘫软 ,肢端厥冷 ,原始反应消失。辅检 :血ＷＢＣ12 .3× 10 9/…     

腰椎管狭窄症合并腰椎间盘突出症的治疗

自1984年5月至1996年6月,采用后路椎管扩大减压术加彻底髓核摘除术,术后早期开始功能锻炼及中药分期辨证施治等综合疗法,治疗腰椎管狭窄症伴腰椎间盘突出症52例,效果满意,报告如下。1　临床资料　　本组男37例,女15例,年龄24岁～70岁,平均445岁。病程6个月～23年,平均3年4个月。有明显外伤史者16例,全部病例均经非手术治疗无效或反复发作,严重影响工作和生活。腰痛48例,腿痛49例,腿麻木48例,下肢无力11例,抽筋5例,跛行40例,间歇跛行45例。腰椎侧弯30例,腰生理弧度变浅或消失41例,腰部后凸11例。腰前屈受限41例,后伸受限42例。棘突间和/或棘…     

以急性重型肝炎并溶血性贫血为首发表现的肝豆状核变性1例

1.临床资料:患者女,12岁。因发热、呕吐2 d伴巩膜黄染,乏力以急性黄疸型肝炎收入院。患者家族病史不详。入院体检:急性病容,意识清楚,皮肤、巩膜黄染,口唇、甲床色浅,肝脏、脾脏未触及。血清总胆红素761μmol/L,直接胆红素     

探讨矫正高度近视的两种眼内屈光手术的临床效果

目的:探讨超高度近视后房型人工晶体手术与透明晶状体切除联合后房型人工晶状体植入术矫正高度近视的临床效果。方法:系统回顾性研究近一年内在本院接受矫正超高度近视眼患者23例(45只眼)。将所有患者随机分为A、B组,A组8例(15只眼),为晶体眼后房型人工晶体手术植入患者,B组15例(30只眼),为透明晶状体超声乳化摘除及低度数或负度数人工晶状体囊袋内植入患者。分别在术后第3、6、12个月,观察两组患者视力、屈光度、角膜内皮细胞计数、眼压、前房反应、后发性白内障及视网膜并发症等方面的变化情况。结果:所有手术没有医源性事故发生。术后12个月裸眼视力≥0.5:A组11眼(73.3%),B组19眼(63.3%),两组差异无统计学意义(P0.05)。手术主要并发症:A组中于术后24 h内高眼压2眼,平均角膜内皮细胞丢失率为4.2%。B组术后12个月行YAG激光后囊切开3只眼,未发生视网膜脱离。两组均有主诉夜间眩光症状,B组视近困难者6例。结论:两种手术临床疗效无明显差异,但需充分做好术前沟通及术前全面细致的眼部检查和评估。超高度近视行眼内屈光手术,是一种安全、有效、稳定性好的治疗方法,值得推广。     

和肽素与急性脑梗死病情及近期预后的关系

目的：探讨和肽素与急性脑梗死病情评估及近期预后的关系。方法收集急性脑梗死138例及同期健康对照60例,采用ELISA双抗体夹心法测定入院时和肽素水平,依据入院时美国国家卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分将患者分为轻、中、重3个亚组,比较各亚组间和肽素水平。随访3个月,以改良Rankin量表（mRS）评分作为预后评价指标,mRS评分大于2分为预后不良。分析血浆和肽素水平与急性脑梗死3个月预后的关系。结果急性脑梗死组和肽素水平较对照组明显升高（P＜0．01）,且重度亚组高于轻、中度亚组（P＜0．05）。多因素Logistic回归分析显示和肽素是急性脑梗死后3个月预后不良的独立危险因素（OR＝4．403,95％CI：1．120～8．328,P＜0．05）。结论和肽素水平可作为急性脑梗死病情评估和近期预后判断的血清学指标。