多发性骨髓瘤恶性相关基因MYEOV2对NIH/3T3细胞生长的影响

目的　分析多发性骨髓瘤恶性相关基因MYEOV2对NIH/ 3T3细胞生长的影响。方法　将MYEOV2基因克隆到真核表达载体pcDNA3 1( +)上 ,并将阳性重组子通过脂质体转染入NIH/ 3T3细胞中 ,G418筛选获得转染阳性克隆并用RT -PCR检测MYEOV2基因的表达。运用流式细胞分类法、细胞生长曲线分析MYEOV2基因对NIH/ 3T3细胞生长的影响。结果　成功获得转染pcDNA3 1( +) /MYEOV2的细胞阳性克隆。流式细胞分析显示转染pcDNA3 1( +) /MYEOV2、转染空载体及未转染的NIH/ 3T3细胞的S期细胞分别为 3 0 9%、2 0 1%、16 1% ,前者较后两者S期细胞增多 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。细胞生长曲线显示转染pcDNA3 1( +) /MYEOV2、转染空载体、未转染的NIH/ 3T3细胞的倍增时间分别为 13 6h、2 5 3h、2 7 4h ,前者细胞倍增时间较后两者缩短 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　MYEOV2基因的表达增加促进DNA合成增加 ,细胞增殖加快 ,是多发性骨髓瘤瘤细胞恶性增殖的一个重要因素     

抑菌晕法筛选抗菌织物试验的评价

随着科学技术的发展，人民生活水平的提高，纺织品已从满足人们御寒遮体这一主要功能逐步转化，抗菌织物就是一新的功能织物。由于该类产品种类繁多，使得其抗菌性能检测变得十分复杂。为建立简便、快速、准确的抗菌织物定性筛选实验方法，我们对武汉市市售的102件不同种类抗菌织物用抑菌晕法进行了抑菌活性的检测。结果报告如下。     

临床分离金黄色葡萄球菌的耐药特点和MRSA分子分型

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其基因分型。方法收集某院2014年1月—2015年11月检出的非重复金黄色葡萄球菌967株,检测其药敏结果及mecA抗性基因、杀白细胞素(PVL)基因;MRSA菌株经多重PCR进行葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)分型、多位点序列分型(MLST)、金黄色葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型、金黄色葡萄球菌附属因子调节子(agr)分型。结果 967株金黄色葡萄球菌共检出210株MRSA,MRSA检出率为21.72%;痰标本MRSA检出率高于皮肤软组织标本(68.09%vs 11.83%,P0.05);金黄色葡萄球菌中未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,MRSA对庆大霉素、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、呋喃妥因、利福平的敏感率均低于MSSA,差异均有统计学意义(均P0.05);MRSA对复方磺胺甲口恶唑的敏感率高于MSSA,差异有统计学意义(P0.05)。皮肤软组织分离的MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、利福平的敏感率为86.90%~95.24%,而痰分离的MRSA仅为1.56%~15.63%。967株金黄色葡萄球菌检测出210株携带mecA基因,10株携带PVL基因,210株MRSA中有8株未分型,占3.81%。MLST主要以ST239(177株)为主;SCCmec分型主要以Ⅲ型(177株)为主;spa分型主要以t 030(177株)为主;agr分型主要以Ⅰ型(196株)为主。结论该院MRSA菌株主要流行克隆ST239-MRSA-SCCmecⅢ-t030,耐药形势严峻,应加强医院内耐药菌株的监测。     

武汉市肺炎链球菌耐药分析及多位点序列分型

目的 对武汉市分离自12 ～18月龄健康婴幼儿鼻咽部的75株肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Spn),进行耐药检测及多位点序列分型(muhilocus sequence typing,MLST),了解该市Spn耐药菌株遗传背景.方法 用E-test方法检测菌株对8种抗菌药物的耐药情况,并对多重耐药株进行MLST分型.结果 左氧氟沙星(LVX)、莫西沙星(MFx)、头孢曲松(CRO)、青霉素(PEN)及阿莫西林/克拉维酸(AMX)对该组Spn细菌有良好的体外活性,敏感率分别为100.00％,100.00％,88.00％,92.00％,89.30％.此组Spn对阿奇霉素(AZM)和红霉素(ERY)的耐药率很高,分别为90.67％,90.67％.对头孢呋辛(CXM)的耐药率为24.00％.75菌株中24株为多重耐药,以CXM/AZM/ERY多重耐药模式为主.MLST分型表明,ST3173(6)、ST271 (4)、ST876(4)、ST3397(3)为多重耐药菌株常见型别.研究得到的12个ST型别中,有4个型别ST271 (4)、ST320(2)、ST90(1)、ST1661(1),共8菌株,属于国际流行耐药克隆株克隆株(Pneumococcal molecular Epidemiology Network,PMEN)Taiwan19F-14及Spain6B-2.多重耐药菌株中一株属于新的型别ST6318,与研究中其它ST型存在两个以上等位基因差别.结论 武汉市健康婴幼儿Spn分离株中,国际PMEN克隆株的传播对耐药性的增加发挥了重要作用.同时,抗性基因水平转移也促进了耐药性的改变.     

武汉市2006～2007年细菌性痢疾监测病原菌分析

目的:了解武汉市细菌性痢疾的病原菌志贺菌生化血清学分型和相关毒力基因分布及其药物敏感状况,为细菌性痢疾临床治疗和预防控制提供依据.方法:按<全国细菌性痢疾监测方案>提供的方法进行病原菌分离鉴定和药敏试验;利用PCR方法采用8对引物setlA、setlB、shet2A、shet2B、ial、ipaH、stxl与virA分别对志贺菌分离株毒力相关基因进行检测.结果:临床初步诊断为细菌性痢疾标本539份,经生化与血清学复核鉴定为志贺菌17株,检出率为3.2%.其中宋内氏菌15株,福氏志贺菌2株.经PCR方法检测ipaH阳性27份,检出率为5.0%,且17株分离培养阳性的志贺菌均100%ipaH-PCR阳性,宋内氏与福氏志贺菌分离株毒素基因分布有所不同.药敏试验显示17株志贺菌敏感药物为阿莫西林Amoxicillin(100%)、环丙沙星Ciprofloxacin(100%),全部耐药的有利福平Rifampicin(100%),且有5株菌出现了3种或3种以上的多重耐药现象.结论:2006～2007年武汉市细菌性痢疾病原菌以宋内氏志贺菌为主,其次为福氏志贺菌;ipaH-PCR比传统分离培养的阳性率高;并对目前常用的抗生素表现一定的耐药性,应引起重视.     

耐喹诺酮类药物金黄色葡萄球菌研究进展

自1962年人工成功合成了以萘啶酸为代表的第一代喹诺酮类（quinolones）药物至今,已发展到第四代,其中第三、四代又称为氟喹诺酮类药物（fluoroquinolones,FQNs）,因其抗菌谱广、抗菌作用强和耐受性好而广泛用于各种感染的治疗。然而,随着喹诺酮类药物的频繁使用,其耐药程度也日趋严重。本文主要针对临床分离的耐喹诺酮类药物金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）的流行病学、耐药机制、耐药检测方法及控制对策研究方面作一综述,为该类细菌耐药性的预防与感染控制提供参考。     

志贺菌毒力相关基因的PCR检测分析

目的：利用PCR方法对武汉地区近年来收集的17株志贺菌进行毒力相关基因检测并分析其分布情况。方法：采用8对引物set1A、set1B、shet2A、shet2B、ial、ipaH、stx1与virA分别对志贺菌中毒力相关基因进行检测,结合常规鉴定方法对PCR扩增结果进行分析。结果：SHET1仅在福氏志贺菌（福氏Ⅱ型、福氏Ⅳ型）分离株（包括其标准株）中存在;SH-ET2存在于各型志贺菌（包括其标准株）;ipaH基因存在于各种类型志贺菌（包括其标准株）;17株志贺菌中,引物shet2A和引物shet2B用于检测sen基因分别检出16株和13株;ial、virA在反复复苏的菌株中检出率有所下降,stx1基因只在痢疾志贺菌中检出。结论：志贺菌快速诊断方法（PCR）中应首选检测志贺菌相关毒力基因ipaH基因。     

武汉市2008年-2010年餐饮具卫生状况分析

目的:了解武汉市餐饮具的卫生状况,为卫生行政监管提供科学依据。方法:用大肠菌群快速纸片法进行采样和检测,按《GB14934-94食(饮)具消毒卫生标准》进行评价。结果:2008年-2010年共检测4417件餐饮具,合格4024件,总体合格率为89.2%,餐饮具合格率呈逐年上升趋势;不同规模的餐厅的餐饮具检测结果差异显著,大型酒店合格率最高为98.2%,小型饭店合格率最低为77.2%(χ2=277.99,P<0.01);不同季节检测结果差异明显,春冬两季合格率较高,夏秋两季合格率较低(χ2=110.56,P<0.01)。结论:武汉市餐饮业中使用的餐饮具卫生状况整体情况较好,建议卫生监督部门加强对小型餐馆和夏秋两季的餐饮具卫生监管力度。