体外培养大鼠骨髓基质细胞分化为成骨细胞新方法的建立和鉴定

目的 改进成骨细胞骨髓培养法并进行鉴定。方法 建立分离和培养大鼠骨髓基质细胞(MSC)的新方法，并用活细胞形态学观察、HE染色、组织化学和放射免疫测定等技术进行观察和鉴定。结果 MSC呈典型的成纤维样细胞，细胞生长旺盛，增殖能力强。体外培养第40d后碱性磷酸酶、骨钙素量达到最高峰，维持至第60d左右开始下降。结论改进后的成骨细胞骨髓培养法具有分离时间缩短、污染机会减少、工作效率提高等优点．并且有助干MSC分化和增殖为具有良好功能特件的成骨细胞。     

高校贫困生认定的问题与思考

高校贫困生认定作为高校贫困生资助工作的首要环节,其准确性直接影响到高校贫困生资助的效益?通过分析现行高校贫困生认定中存在的问题及原因,对贫困生的认定工作提出了一些新的思考?     

脐血间充质干细胞磁探针标记和MR成像研究

目的　应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸 (Poly L Lysine ,PLL)的偶联物Fe2 O3 PLL ,体外标记人脐血间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCS) ,磁共振进行标记细胞成像。方法　制备Fe2 O3 PLL ,分离人脐血MSCS 进行纯化并传代培养 ,标记Fe2 O3 PLL ,普鲁士蓝染色显示细胞内铁 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色试验评价不同浓度Fe2 O3 PLL标记MSCS 后对细胞生长状况的影响 ,Annexin/碘化吡啶 (PI)双染色法检测细胞凋亡 ,应用MR的T1WI、T2 WI、T2 WI3个序列进行细胞群成像。结果　普鲁士蓝染色清晰显示蓝色铁颗粒位于MSCS 胞质内 ,MTT比色试验示 5～ 2 0 0 μg/ml等7个铁浓度组 ,Fe2 O3 PLL标记后细胞的光吸收值与未标记MSCS 者比较 ,各组间总体比较差异无统计学意义(Kruskal Wallis秩和检验 ,χ2 =10 35 ,P =0 17)。标记MSCS 时 ,铁浓度采用 2 0 μg/ml较合适。标记MSCS、未标记MSCS 者晚期凋亡及坏死细胞分别为 5 4 3%、2 95 % ,早期凋亡细胞分别为 9 93%、10 14 %。在MR的T1WI、T2 WI、T2 WI中 ,标记 1× 10 6个MSCS 者、标记 5× 10 5个MSCS 者较未标记MSCS 者均有信号降低改变 ,且前者的降低率大于后者 ,3个序列中以T2 WI的信号强度变化率最大 ;标记 1× 10 6个MSCS 者 ,标记后培养 8d的信号     

TGF-β1对老年人牙周膜细胞分化功能的影响

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）对老年人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌的影响。方法：将不同浓度的TGF-β1（0．5μg／L，1μg／L，2μg／L）与体外培养的老年人牙周膜细胞-同培养后，采用酶动力学方法和放射免疫法检测碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌水平，并与青年人牙周膜细胞进行比较。结果：①在老年组，TGF-β1各浓度组细胞裂解液和培养液中碱性磷酸酶活性均明显高于对照组（P〈0．05，P〈0．01）。老年组和青年组差值比较，除TGF-β1（0．5μg／L）组细胞培养液外，无论是细胞裂解液还是培养液中碱性磷酸酶活性青年组均明显高于老年组（P〈0．05，P〈0．01）。②在老年组，只有7d时的TGF—β1（0．5μg／L）组骨钙素分泌高于对照组（P〈0．05）；在青年组，7d时各组和21d时TGF—β1（1μg／L）组骨钙素分泌均明显高于对照组（P〈0．05，P〈0．01）。老年组和青年组差值比较，7d时TGF-β1（1μg／L）、（2μg／L）组和21d时的TGF-β1（0．5μg／L）、（1μg／L）组骨钙素分泌青年组明显高于老年组。结论：合适浓度的TGF-β1不仅可以促进青年人而且可以促进老年人牙周膜细胞向成骨样细胞转化，增强其成骨能力；其对青年人牙周膜细胞的作用强于老年人。     

甲壳胺对人牙周膜细胞增殖和分化的影响

目的探讨甲壳胺对人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响。方法用原代培养的人牙周膜细胞,采用MTT法、酶动力学法和放射免疫法检测不同浓度甲壳胺(Chitosan,Chi,0.05,0.1,0.2g·L-1)对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌的影响。结果与对照组比较,(1)Chi(0.05g·L-1)和Chi(0.1g·L-1)2组在3,5,7d时A570值均明显升高(P<0.05),Chi(0.2g·L-1)组仅在3d时明显升高(P<0.01);(2)不论是细胞裂解液还是细胞培养液中,甲壳胺均能明显增强牙周膜细胞碱性磷酸酶活性(P<0.05);(3)不同浓度的甲壳胺刺激牙周膜细胞骨钙素分泌量均较对照组高,但只有Chi(0.1g·L-1)组比较有显著性差异(P<0.05)。结论甲壳胺对人牙周膜细胞的增殖和分化功能有明显的促进作用。     

原发部位不明转移癌免疫组化检测及临床病理

目的 对41例老年原发部位不明的转移癌（metastases of unknown origin,MOU）进行原发灶的探讨,并分析可能提示原发部位的免疫组织化学及病理形态特征。方法 以多项指标结合的5组免疫酶标谱为主,配合大样本对照。检测前后分别进行临床及病理的前瞻性原发灶初诊及回顾性复诊。结果 41例老年MUO给出意向诊断31例（75．6％）,其中明确原发部倍位的11例（35．5％）;并对原发灶的明确有提示意义的病理形态特征进行了详细的分析。结论 免疫酶谱多指标分析对老年MUO原发灶鉴别诊断有实用价值,但须对其生物学行为,转移灶病理形态特征及临床各种检查进行综合分析,有针对性地实施检查。     

人参皂苷Rg1、甲壳胺和转化生长因子β1对人牙周膜细胞增殖和分化功能的作用

目的:探讨人参皂苷Rg1、甲壳胺(Chi)和转化生长因子β1(TGF-β1)对原代培养的人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响. 方法:用原代培养的人牙周膜细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法、酶动力学方法、放射免疫法和流式细胞仪检测人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)、不同浓度Chi(0.05 g/L、 0.1 g/L、 0.2 g/L)、不同浓度TGF-β1(0.5 μg/L、 1 μg/L、 2 μg/L)和单纯DMEM培养液(对照组)对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌和细胞凋亡的影响. 结果:①与对照组比较除TGF-β1 (0.5 μg/L、2 μg/L)组和Chi(0.2 g/L)组第7天外,TGF-β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组在3、5、7天均能明显增强牙周膜细胞的增殖能力(P<0.05).②TGF-β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组细胞裂解液中ALP活性均明显高于对照组(P< 0.05).③ 7天时,除Chi(0.2 g/L)组外,其他各组骨钙素分泌均明显强于对照组(P<0.05);21天时,人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)组明显高于其他各组(P < 0.05).④TGF-β1 (1 μg/L)组、Chi (0.1 g/L)组和人参皂苷Rg1(0.01 μmol/L)组细胞凋亡百分率与对照组比较均明显降低(P< 0.01). 结论:与TGF-β1一样,Chi及人参皂苷Rg1有促进牙周膜细胞增殖的作用,能增强人牙周膜细胞ALP活性,增加牙周膜细胞骨钙素的分泌,有降低牙周膜细胞凋亡率的作用.     

嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究

目的:研究携带35型腺病毒纤毛的嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35能否有效地将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并观察eGFP基因在大鼠BMSCs内持续表达的时间.方法:贴壁培养法分离、扩增大鼠BMSCs.用带有eGFP基因的Ad5/F35(Ad5/F35-eGFP)分别以1、10、100、1000的感染复数(MOI)转染第2代大鼠BMSCs;荧光倒置显微镜和流式细胞仪(FCM)检测eGFP基因的转染效率与表达水平,观察细胞生长状态以评估病毒对大鼠BMSCs基本生物学特性的影响;对MOI=100的病毒转染的大鼠BMSCs在转染后第2、7、14、21、30天分别用FCM检测大鼠BMSCs内eGFP的表达情况.结果:MOI在1到1000范围内,eGFP基因转染效率和表达水平与Ad5/F35-eGFP的MOI呈正向剂量相关性.MOI=100的病毒可转染90%左右的大鼠BMSCs,且eGFP基因在1个月内均有表达.MOI为1、10、100的病毒不影响大鼠BMSCs的活力和增殖能力.结论:Ad5/F35可以高效地将eGFP基因体外转染大鼠BMSCs,eGFP基因可持续表达1个月.本研究为Ad5/F35作为BMSCs的基因转移和表达载体进行细胞治疗与基因治疗提供了实验依据.     

甲壳胺对老年人牙周膜细胞分化功能的影响

目的：探讨甲壳胺（Chi）对老年人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌的影响。方法：将不同浓度的Chi（0．05g／L，0．1g／L，0．2g／L）分别与体外培养的老年人牙周膜细胞一同培养后，采用酶动力学方法和放射免疫法检测老年人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌水平，并与青年人牙周膜细胞进行比较。结果：①在老年组，Chi（0．05g／L）组细胞裂解液中和Chi（0．1g／L）及Chi（0．2g／L）组细胞培养液中碱性磷酸酶活性明显高于对照组（P〈0．05，P〈0．01）。老年组和青年组差值比较，甲壳胺各组无论是细胞裂解液还是培养液中碱性磷酸酶活性青年组均明显高于老年组（P〈0．05，P〈0．01）。②在老年组，只有21d时的Chi（0．1g／L）组、Chi（0．2g／L）组骨钙素分泌高于对照组（P〈0．05）。在青年组，7d时Chi（0．05g／L）和Chi（0．1g／L）组、14d时Chi（0．1g／L）组及21d时Chi（0．1g／L）组骨钙素分泌均明显强于对照组（P〈0．05，P〈0．01）。老年组和青年组差值比较，7d和21d时Chi（0．05g／L）、（0．1g／L）组骨钙素分泌青年组明显高于老年组。结论：一定浓度的甲壳胺不论对青年人还是老年人的牙周膜细胞向成骨样细胞转化和成骨能力均有明显的增强作用，对青年人牙周膜细胞的作用程度强于老年人。     

健康体检中心规范化管理的现状与对策

随着社会经济的发展以及人们生活水平的提高,人们的健康意识在不断增强,健康体检中心数量也得到了快速的发展和壮大。健康体检中心为人们提供医疗卫生服务的同时,也对我国的医疗卫生事业产生很大的影响,健康体检中心的规范化管理对其发展具有重要意义。本文将在健康体检中心规范化管理现状的基础上,探讨加强健康体检中心规范化管理的对策。