耐亚胺培南铜绿假单胞菌β-内酰胺酶相关基因及Ⅰ类整合子的检测

目的 研究耐亚胺培南铜绿假单胞菌(PA)β-内酰胺酶相关基因及Ⅰ类整合子的携带情况.方法 采用K-B法对临床分离的PA进行药敏试验,选出26株耐亚胺培南PA,用PCR法检测其β-内酰胺酶相关基因和Ⅰ类整合子(int Ⅰ1和qacE△1-sull基因).结果 26株耐亚胺培南PA体外对15种抗菌药物的药敏结果显示对多黏菌素B的敏感率为100%,对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星的敏感率分别为61.54%、61.54%、65.39%、30.77%、50.00%.对复方新诺明的耐药率为100%.16种基因检出率由高到低依次为qacE△1-sull(92.31%),OprD2缺失(46.15%),TEM(42.31%),OXA-10(26.92%),VIM(11.76%),SPM(7.69%),VEB(7.69%),SHY(7.69%),未检出IMP、GIM、PER、GES、CARB、DHA、CTX-M、intⅠ 1基因.结论 耐亚胺培南PA的耐药主要与Ⅰ类整合子、OprD2缺失有关.     

幽门螺杆菌感染在胃黏膜病变中三种基因表达及相互关系的研究

目的　研究幽门螺杆菌 (HP)感染胃黏膜病变中细胞表面分子 (CD4 4V6 )、p16基因及细胞核增殖抗原 (PCNA)的表达及相互关系。方法　 114例病人经胃镜及病理证实的不同胃黏膜病变标本 ,应用免疫组化染色法检测CD4 4V6、p16基因及PCNA基因的表达。HP感染由快速脲酶试验结合Warthin Starry银染色确定。结果　各组胃黏膜病变中HP阳性的病人与HP阴性的病人相比较 ,HP阳性的病人p16基因表达显著低于HP阴性的病人 (P <0 0 1) ;CD4 4V6表达HP阳性的病人显著高于阴性的病人 (P <0 0 1) ;HP阳性的病人PCNA LI%表达显著高于HP阴性的病人 (P <0 0 5 )。HP感染的胃黏膜病变中p16基因表达与CD4 4V6表达呈负相关 (rs=- 0 6 971,P <0 0 1) ;p16基因表达与PCNA表达呈负相关 (rs=- 0 6 0 75 ,P <0 0 1) ;CD4 4V6表达与PCNA表达呈正相关 (rs=0 4 799,P <0 0 1)。结论　CD4 4V6、PCNA、p16基因在胃黏膜病变、癌前病变向胃癌转化中起了非常重要作用。HP感染直接或间接的促进了CD4 4V6、PCNA的表达 ,并抑制了p16基因的表达。HP感染患者 3种基因之间存在一定相关性。     

黄连中药根碱分别联合阿米卡星与头孢哌酮/舒巴坦对泛耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌作用

目的探讨黄连中药根碱分别联合阿米卡星与头孢哌酮/舒巴坦2种抗菌药物对泛耐药鲍曼不动杆菌的抑菌作用。方法应用肉汤稀释法测定不同浓度组合黄连中药根碱与阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦对25株临床分离泛耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC)及分级抑菌浓度(FIC)指数,并观察其对25株泛耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌效果。结果黄连中药根碱分别联合阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦后,其MIC范围与3药单独相比保持不变或有所降低,而黄连中药根碱联合头孢哌酮/舒巴坦的MIC及分布浓度均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在累计抑菌率相同时,联合用药的药物浓度较单独用药时低,其中黄连中药根碱联合头孢哌酮/舒巴坦的药物浓度降低最明显,差异有统计学意义(P<0.05)。黄连中药根碱联合阿米卡星用药的FIC指数为1.0~<2.0时占比为72%,以无关作用为主;黄连中药根碱联合头孢哌酮/舒巴坦用药的FIC指数为0.5~<1.0时占比为72%,以相加作用为主。结论黄连中药根碱联合头孢哌酮/舒巴坦增强了单独用药(头孢哌酮/舒巴坦)的抑菌效果,通过减少头孢哌酮/舒巴坦的用量可以延缓细菌耐药。     

不同冲洗液在大鼠开放性骨折早期清创中疗效对比实验研究

目的比较不同冲洗液在大鼠开放性骨折早期清创中的疗效,探寻更为安全有效、经济易行的方法。方法选取雄性成年健康SD大鼠45只,随机平均分成3组,建立大鼠开放性股骨干骨折模型,旷置2h后,分别采用生理盐水、碘伏、过氧化氢冲洗创面,比较冲洗前后创面细菌菌落数变化,创面炎症反应和伤口愈合情况。结果 3组大鼠创面冲洗前后菌落计数均明显变化,但组间创面细菌清除率比较差异无统计学意义(P>0.05);过氧化氢冲洗组大鼠创面炎症反应明显;所有大鼠伤口愈合良好。结论开放性骨折早期,单独应用生理盐水,可以清除创面绝大多数细菌,降低感染率,减少对组织创面的刺激,缩短清创时间,经济易行。     

多重降落PCR检测痰标本肺炎链球菌与b型流感嗜血杆菌

目的:建立可同时检测痰标本中肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Sp)与b型流感嗜血杆菌(Hae-mophilus influenzae type b,Hib)的多重降落PCR。方法:以Sp cpsA基因、Hib capⅡ区为靶标设计引物,并用Primer-BLAST在线软件检测其特异性,多重降落PCR检测492份痰标本,并以标准菌株作为对照,结果与细菌培养法进行比较。结果:所建立的多重降落PCR对Sp、Hib的检测下限分别达6.3 pg、0.2 pg;与细菌培养法相比,灵敏度及总灵敏度均达100%,检测Sp、Hib特异性分别为94%、98%,总特异性达92%。结论:所建立的多重降落PCR具有高灵敏度与特异性,可作为Sp、Hib感染的快速诊断与流行病学研究的备选手段。     

幽门螺杆菌空泡毒素及其致病性

幽门螺杆菌感染呈全球性分布,与多种胃部疾病有密切关系,人群感染率在50％以上。该菌分泌的空泡毒素VacA在其致病过程中起重要作用。不同幽门螺杆菌菌株的VacA存在基因型和表型的差异。不同基因型的致病性不同,不同地区的基因型分布亦不同。研究该菌VacA基因(vac4)及其产物,以及不同基因型与疾病的关系,对于进一步阐明幽门螺杆菌与临床症状的关系、幽门螺杆菌感染性疾病的防治都有十分重要的意义。     

重组多肽酶联免疫吸附法检测抗LKM-1抗体的初步应用

目的：制备人自身抗原细胞色素P4502D6（CYP2D6）257-351位氨基酸片段融合蛋白作为自身抗原,探讨ELISA检测抗LKM-1抗体的敏感性和特异性。方法：以肝脏的cDNA混合文库为模板作PCR,将PCR产物与真核表达载体pEGH共同转化酿酒酵母Y258,碱裂解法进行质粒制备,PCR扩增鉴定。表达载体构建成功后,在半乳糖的诱导下表达产生重组融合蛋白,经GST亲和层析法进行纯化后,免疫印迹法鉴定抗原性,ELISA检测抗LKM-1抗体阳性血清及部分其他结缔组织病患者血清中的抗LKM-1抗体。结果：重组融合蛋白在宿主菌中获得表达,免疫印迹法鉴定表明其能与标准抗LKM-1抗体阳性血清反应,而与正常血清、其他抗血清无反应。在26份抗LKM-1抗体阳性血清中,6份抗HCV抗体阳性血清用重组多肽ELISA检测有5份呈阳性,其余20份血清用重组多肽ELISA检测均呈阳性；20份其他结缔组织病患者血清用重组多肽ELISA检测均为阴性。结论：重组的257-351位氨基酸片段是CYP2D6抗原的主要抗原表位区域,以重组多肽为基质ELISA检测抗LKM-1抗体的敏感性较高,为进一步研究抗体水平与临床病情变化的相关性奠定了基础。     

标准菌株和临床菌株oipA基因的检测及其核苷酸序列比对

目的：检测幽门螺杆菌标准菌株NCTC11637及临床分离菌株Hp1和Hp2的oipA基因,分析其核苷酸序列,比对其与国际标准菌株Hp 26695的同源性.方法：常规方法培养幽门螺杆菌,提取DNA,PCR法扩增oipA基因,检测其核苷酸序列,并比较其与Hp 26695的同源性.结果：NCTC11637及Hp1、Hp2均表达oipA基因.其核苷酸序列与Hp 26695比对,NCTC11637有48个突变位点、Hp1有48个突变位点、Hp2有50个突变位点,同源性均为94%.NCTC11637与Hp1的同源性为100%、与Hp2的同源性为97%.结论：NCTC11637、Hp1、Hp2均表达oipA基因,但不同菌株oipA基因的核苷酸序列有所不同.     

幽门螺杆菌空泡毒素及其致病性

幽门螺杆菌感染呈全球性分布，与多种胃部疾病有密切关系，人群感染率在50％以上。该菌分泌的空泡毒素Va认在其致病过程中起重要作用。不同幽门螺杆菌菌株的VaeA存在基因型和表型的差异。不同基因型的致病性不同，不同地区的基因型分布亦不同。研究该菌V以基因(t础)及其产物，以及不同基因型与疾病的关系，对于进一步阐明幽门螺杆菌与临床症状的关系、幽门螺杆菌感染性疾病的防治都有十分重要的意义。     

从黄花鱼中检出一株副溶血弧菌

1998年 8月中旬 ,我们对本市饮食业进行卫生学监测时 ,从某海产品销售处的黄花鱼中检出一株副溶血弧菌 ,现将结果报告如下 :1　材料与方法1.1　样品来源 :以无菌手续称取上述黄花鱼 1g1.2　培养基 :购于卫生部上海生物制品研究所1.3　微量生化管 :由上海医学化验所供给 ,部分自