18F-FDOPA PET/CT定量分析提高早期帕金森病的诊断效能

目的 探讨6-¹⁸F氟-L-多巴(¹⁸F-FDOPA)PET/CT半定量分析及人工智能平台对帕金森病(PD)的诊断价值。资料与方法 回顾性分析2018年1月—2019年12月南京医科大学附属南京医院经临床确诊的56例PD患者,其中33例早期(Hoehn-Yahr Ⅰ～Ⅱ级),23例晚期(Hoehn-Yahr Ⅲ～Ⅳ级);选取本院体检中心同期健康对照者27例,行¹⁸F-FDOPA PET/CT。于HERMES BRASS平台计算受试者纹状体各亚区与枕叶体积计数比(SORs),完成基于感兴趣区的脑半定量分析,观察早期和晚期PD患者纹状体各亚区不对称性。使用人工智能技术对PD组和健康对照组纹状体各亚区SORs行主成分分析,观察数据聚集度和组间区分度。结果 与健康对照组相比,晚期PD患者尾状体、前壳核、后壳核和纹状体整体SORs显著降低(t=9.02～11.72,P<0.000 1),对应的曲线下面积分别为0.952、0.973、0.995和0.982。早期PD患者纹状体各亚区不对称指数分别为尾状核(7.61±5.50)%...     

人ING4的基因克隆及真核表达

目的 克隆人生长抑制因子家族(inhibitor of growth famility member4,ING4)基因,构建其真核表达载体pEGFP-ING4.方法 提取人胎盘总RNA,经RT-PCR扩增出ING4 cDNA,克隆至pEGFP-C2载体,构建的真核表达载体pEGFP-ING4用双酶切、基因测序进行序列鉴定;转染MCF-7细胞用荧光显微镜和免疫组化检测重组质粒的表达.结果 RT-PCR产物为750 bp的条带,双酶切和基因测序正确,转染可见目的 蛋白融合表达.结论 从人胎盘组织中成功克隆了ING4基因并构建其真核表达质粒在人MCF-7细胞中表达,为进一步研究ING4基因的作用及抗肿瘤机制奠定了基础.     

重组载体pEGFP-ANG的构建及ANG基因在HUVEC中的表达

目的 :建立血管生成素 (angiogenin ,ANG)基因的真核表达系统。方法 :采用化学合成拼接法 ,获得人ANG全长cDNA并测序 ,构建重组荧光真核细胞表达质粒 pEGFP ANG ,然后经脂质体介导转染人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。应用荧光显微镜观测及免疫组化染色 ,对转染细胞内 pEGFP ANG的表达进行鉴定。结果 :测序表明 ,编码的氨基酸序列与人ANG完全一致。荧光显微镜下可见转染的HUVEC内发出强绿色荧光。免疫组化检测显示 ,转染的HUVEC中有棕色颗粒。结论 :获得了人ANG的全长编码基因。构建的重组体pEGFP ANG转染HUVEC后 ,可表达人ANG蛋白     

抗木瓜凝乳蛋白酶单链抗体基因的构建、初步筛选和鉴定

目的 :构建抗木瓜凝乳蛋白酶全套单链抗体 (scFv)噬菌体表面展示文库。方法 :从木瓜凝乳蛋白酶免疫小鼠的淋巴细胞中提取总RNA ,反转录成cDNA后 ,用抗体V区简并引物扩增全套VH 和VL 基因。经重叠延伸反应 ,装配成scFv基因 ,并将其克隆到噬粒载体pFAB5C中 ,构建scFv噬菌体抗体库。对抗体库进行亲和筛选后 ,用ELISA法鉴定抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv。结果 :经 4轮“亲和 吸附 洗脱”的富集过程 ,得到ELISA活性较高可与木瓜凝乳蛋白酶结合的克隆。结论 :成功地构建了抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv噬菌体展示文库 ,并筛选到与木瓜凝乳蛋白酶具有结合能力的scFv基因     

低功率毫米波辐照对HL60细胞增殖的影响

目的为探讨低功率毫米波对HL60细胞活力影响的机制。方法应用细胞培养、活细胞计数、光镜、电镜及增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen,PCNA）免疫组化染色及图像分析等方法,检测低功率（功率密度约2mW／cm^2）及频率41．32GHz的毫米波辐照HL60白血病细胞增殖的影响;分为辐照时间15、30、45、60min组和对照组（0min组）共5组。结果与对照组比较,毫米波辐照45min和60min组,HL60细胞活性增加和PCNA阳性细胞增多,光镜观察各组未见明显差别,超微结构显示HL60细胞形态呈增殖改变。结论低功率毫米波辐照对HL60细胞有促进增殖的作用。     

开展人群大规模新冠核酸筛查的混合检测方法研究

目的 为在大规模人群中进行新型冠状病毒核酸筛查时提高检测效率、缩短检测时间,探索混采混检、单采混检检测的合理比例数。方法 对当天采集的56份新鲜样本进行单独检测,再分为混采混检组和单采混检组,各组中均有3∶1、5∶1、10∶1混合样本,每份混合样本中含1份阳性样本并配备双份样本进行平行试验,比较混采混检和单采混检检测结果的差异。结果 混采混检方案：3∶1、5∶1混采混检阳性样本检测结果与单采单检相比Ct值基本不变,检测灵敏度无差异;10∶1混采混检阳性样本Ct值平均升高2.95个单位（0.71～5.47）,检测灵敏度略有降低,检测结果在临界值（37～40）的样本会成为假阴性。单采混检方案：3∶1、5∶1、10∶1的单采混检阳性样本检测结果与单检相比Ct值平均升高1.13、2.57、4.92个单位（0.30～7.66）,检测灵敏度降低。结论 建议在针对高风险地区的大规模人群筛查时采用5∶1混采混检方案。特殊情况下需要快速提升核酸检测能力时可采取10∶1混采混检方案。对发热门诊、重点人员以及密接人员仍采用单人单采单检的检测方案。