中国南部人群家族性及早发性乳腺癌患者p53基因胚系突变分析

目的：分析p53基因在中国南方部分地区家族性和早发性乳腺癌中的突变位点及特征。方法：以中国南 方地区150例家族性和早发性乳腺癌患者为研究对象,提取静脉血基因组DNA,对p53基因的全部编码序列及外显子 与内含子拼接区进行扩增。 采用变性高效液相色谱进行预筛后,应用DNA测序分析和证实基因突变的结果。结果： 150例患者中,9例的p53编码区域共发现6种不同的p53变异,其中869_888ins20(插入突变)为新发现的致病性突变, 643_660del18(缺失突变)为已报道的致病性突变,91G>A,215C>G,537T>G和743G>A为已报道有致病意义的错义突 变位点。此外,还发现了第4外显子区域的同义突变141G>A及第3内含子区域的缺失突变IVS3+54_70del16和9个基因多 态性位点。家族性及早发性乳腺癌的p53总突变率为6.00%,其中家族性乳腺癌的p53突变率约为6.81%。早发性乳腺癌 突变率约为6.25%。结论：中国南部人群家族性乳腺癌患者的p53基因胚系总突变率高于国内外文献报道,首次发现 的插入突变869_888ins20的致病意义有待今后的功能学验证。缺失突变643_660del18丰富了国人p53基因突变数据库, 有可能是中国乳腺癌人群的特有突变。     

淫羊藿化学成分分析及其药代动力学研究进展

淫羊藿作为补肾阳中药,具有悠久的用药历史。通过回顾淫羊藿化学成分分析及其药代动力学研究,发现淫羊藿成分复杂多样(如黄酮类、生物碱类、酚酸类等),易受到品种、产地、部位、加工炮制等因素的影响,且淫羊藿各类成分的体内过程差异较大,疾病、组方配伍、炮制加工及中西药联用对其药代动力学参数均有不同程度的影响。文章归纳淫羊藿成分分析及体内过程的研究思路和方法,探讨了目前研究中存在的一些问题,以期为淫羊藿质量控制、新药开发与临床应用研究提供参考。     

MicroRNA-429靶向抑制occludin及对糖尿病小鼠肠上皮屏障功能的影响

 目的: 探讨microRNA-429(miR-429)在体内对糖尿病(DM)小鼠肠上皮细胞(IECs)内闭合蛋白(occludin,Ocln)表达及肠上皮屏障功能的影响。方法: 构建糖尿病小鼠模型(腹腔内注射链脲佐菌素);通过尾静脉注射antagomiRNA-429抑制DM小鼠IECs内miR-429的表达;real-time PCR检测miR-429和Ocln mRNA的表达变化;Western blotting及免疫组化检测Ocln蛋白表达变化;气相色谱法检测小鼠尿液乳果糖/甘露醇比值;显色基质鲎试剂法检测小鼠血浆LPS浓度。结果: 尾静脉注射antagomiRNA-429能显著抑制DM小鼠IECs内miR-429的表达,注射后6 d恢复至正常小鼠IECs表达水平。抑制DM小鼠IECs内miR-429表达后,Ocln表达显著提高(P<0.05),小鼠尿液乳果糖/甘露醇比值及血浆LPS水平均明显下降(P<0.05)。结论: AntagomiRNA-429能有效抑制DM小鼠IECs内miR-429的表达,进而使小鼠IECs内Ocln的表达升高,从而使肠上皮屏障功能部分恢复。     

细辛水提物HPLC指纹图谱及化学模式识别的研究

[目的]通过建立中药细辛水提物高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,评价不同产地细辛药材水提物的质量差异.[方法]采用ZORBAX Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱洗;流速为1 mL/min;柱温:30℃;进样量:5μL;检...     

三七总皂苷对杠柳毒苷药代动力学的影响

[目的]建立液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）定量分析方法,考察三七总皂苷对杠柳毒苷在大鼠体内的药动学影响。[方法]将18只大鼠随机分成杠柳毒苷单独给药组、杠柳毒苷和低剂量三七总皂苷配伍组、杠柳毒苷和高剂量三七总皂苷配伍组,大鼠连续口服给药7 d,在最后1次给药前和给药后不同的时间点从眼底静脉丛取血,采用LC-MS/MS法,以补骨脂素为内标,测定大鼠体内杠柳毒苷的含量,并运用DAS 1.0软件计算待测物的药动学参数。[结果]杠柳毒苷在1~500 ng/mL的范围内线性关系良好,方法学符合要求。药动学结果表明,杠柳毒苷配伍三七总皂苷后,杠柳毒苷在大鼠血浆中的主要药动学参数C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞与杠柳毒苷单独给药相比存在统计学差异。[结论]本研究所建立的LC-MS/MS方法快速、灵敏、准确,可用于杠柳毒苷在大鼠体内的药动学研究。三七总皂苷对杠柳毒苷在大鼠体内的药动学存在影响。     

周期性区域阻断大剂量动脉灌注化疗近期疗效探析

目的 探讨周期性区域阻断大剂量动脉灌注化疗的可行性及其临床应用价值。方法 对19例骨肉瘤患者周期性区域阻断大剂量动脉灌注化疗前活检病理标本和化疗后手术切除的病理标本分别应用DNA原位末端标记法、免疫组化S-P法检测骨肉瘤细胞凋亡及Survivin蛋白表达，同时记录患者化疗前后的临床疼痛症状、邻近关节功能及患肢瘤体的最大周径。结果 化疗后骨肉瘤细胞凋亡指数为15．47％，明显高于化疗前的7．21％。化疗后Survivin阳性表达率(42．1％)较化疗前(78．95％)明显减少，患者疼痛症状明显减轻，邻近关节功能改善。瘤体最大周径缩小。结论 周期性区域阻断大剂量动脉灌注化疗可以诱导骨肉瘤细胞凋亡的增加。降低骨肉瘤组织Survivin蛋白的表达，是骨肉瘤综合治疗的有效措施之一。     

抗凝及抗血栓药物的临床研究进展

凝血酶在调节凝血过程中起了重要作用，且是抗凝、抗血栓药物瞄准的目标之一，但细胞、非凝血酶蛋白酶、遗传因子也是重要的相关因素［１］。因此新的抗凝、抗血栓药物的作用机制集中在影响止血系统的多种环节上［２］。下面就一些抗凝及抗血栓药物临床研究进展作一阐述。...     

布地奈德联合孟鲁司特钠对急性小儿哮喘发作的预防效果观察

目的 观察布地奈德联合孟鲁司特钠对急性小儿哮喘发作的预防效果.方法 我院接诊的120例小儿哮喘患儿进行研究.随机均分为两组.两组患者均采用吸氧、平喘、抗感染等常规治疗措施进行治疗.对照组60例患儿在常规治疗基础上,雾化吸入布地奈德进行治疗.观察组60例患儿在对照组用药的基础上,口服孟鲁司特钠进行治疗.治疗后,观察记录两组患者的β受体激动剂使用次数、呼气高峰流量(Peak expiratory flow rate,PEFR)、嗜酸性粒细胞(Eosinophilic granulocyte,EC)及哮喘急性加重率,并且记录两组的疗效及不良反应.结果 治疗后,观察组患者的β受体激动剂使用次数明显少于对照组(P<0.05),PEFR及EC水平明显低于对照组(P<0.05),哮喘急性加重率明显低于对照组.观察组治疗的总有效率明显高于对照组,两组比较差异有统计学意义.两组不良反应发生率无显著性差异.结论 布地奈德联合孟鲁司特钠对急性小儿哮喘发作的预防效果良好,值得在临床中进行广泛推广应用.     

毛细管电泳血红蛋白A_2增高对诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血符合率分析及应用价值

目的分析毛细管电泳血红蛋白A2增高患者β-珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)确诊符合率,探讨其在β-地贫中诊断中的应用价值。方法选择该院2014年5月至2015年5月门诊及住院血红蛋白A2增高患者260例进行地贫基因检测。结果 260例血红蛋白A2增高患者中,有257例检测到β-地贫基因突变,符合率达98.85%,另外3例未检测出常见的17种β-地贫基因突变,后续经进一步进行罕见型β-地贫基因检测及β珠蛋白基因测序,发现1例为SEA-HPFHβ缺失型,1例为Taiwaneseβ缺失型,1例为Codon 89-93(-AGT GAG CTG CAC TG)杂合突变,证实3例未检测出17种常见β-地贫基因突变的血红蛋白A2增高标本仍为β链发生突变或大片段缺失引起。同时257例β-地贫基因突变标本中有42例复合α-地贫,占β-地贫的16.34%。结论毛细管电泳血红蛋白A2增高能为β-地贫的诊断提供快速准确的依据,但不能排除复合α-地贫的可能,当患者血红蛋白A2增高时,应同时进行α-地贫和β-地贫基因诊断。     

基于公共数据库分析NPY1R在乳腺癌中的表达及与他莫昔芬耐药的关系

目的 ：研究NPY1R在乳腺癌他莫昔芬耐药中的作用,为预测和逆转乳腺癌内分泌耐药提供新的分子标志物。方法 ：从GEO数据库中获取乳腺癌他莫昔芬耐药前后基因表达数据集,并通过GEO2R筛选出NPY1R为乳腺癌他莫昔芬耐药前后差异表达基因,利用TCGA数据库和CPTAC数据库分析NPY1R在乳腺癌组织中的mRNA和蛋白表达水平,收集我院临床组织样本并通过免疫组化验证NPY1R在他莫昔芬耐药前后的配对组织中的差异,通过STRING数据库构建NPY1R编码蛋白互作网络并进行GO/KEGG分析以及利用starBase数据库预测靶向作用于NPY1R的miRNAs;最后使用Kaplan-Meier Plotter数据库分析NPY1R在乳腺癌患者中的生存及预后。结果 ：与正常组织比较,NPY1R在乳腺癌中mRNA表达下调且其编码蛋白表达水平也同样降低;免疫组化结果显示NPY1R在乳腺癌他莫昔芬耐药后复发组织中表达下降;临床相关性分析发现NPY1R的表达与乳腺癌中ER、PR、Her2状态显著相关;GO/KEGG分析显示NPY1R及其相关蛋白主要作用于G蛋白偶联受体等信号通路,star Base预测mi ...