肾小管间质纤维化动物模型和药物干预

肾小管间质纤维化（ tubulointerstitial fibrosis,TIF）是几乎所有肾脏疾病进展至终末期肾病的共同病理表现,已经作为判断肾功能下降严重程度和预后的一个重要指标［1］。建立稳定的肾纤维化动物模型,研究TIF 的发病机制、抑制TIF 的发生发展具有重要意义。     

miR-19b-3p 靶向LRIG1 调控喉癌细胞凋亡和放射敏感性分子机制研究

目的:探讨miR-19b-3p是否通过靶向调控富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域(LRIG1)表达从而对喉癌细胞凋亡及放射敏感性的影响。方法:喉癌Hep2细胞分为anti-miR-19b-3p组、anti-miR-NC组、pcDNA-LRIG1组、pcDNA组、anti-miR-19b-3p+si-LRIG1组、anti-miR-19b-3p+si-NC组、miR-19b-3p组、miR-NC组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹(Western blot)分别检测miR-19b-3p、LRIG1表达水平;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用克隆形成实验检测各组细胞的放射敏感性。双荧光素酶报告基因实验验证LRIG1是否为miR-19b-3p的靶基因;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、cleaved-caspase3的表达。结果:miR-19b-3p在喉癌组织及细胞系中表达水平显著升高,而LRIG1表达水平显著降低;转染anti-miR-19b-3p或pcDNA-LRIG1后可显著增强喉癌细胞凋亡能力并降低细胞存活分数从而增强细胞的放射敏感性,促进Bax、cleaved-caspase3表达,抑制Bcl-2表达;双荧光素酶报告实验证实LRIG1是miR-19b-3p的靶基因;抑制LRIG1表达逆转了抑制miR-19b-3p表达对喉癌Hep2细胞凋亡和放射敏感性的作用。结论:沉默miR-19b-3p表达可上调LRIG1表达从而诱导喉癌细胞凋亡并增强其放射敏感性。     

洛铂联合吉西他滨治疗晚期肺癌安全性的临床观察

目的观察评价新一代铂类抗癌药物洛铂（labaplatin,LBP）联合吉西他滨（gemicitabine,GEM）组成的GP方案治疗晚期肺腺癌和晚期小细胞肺癌（SCLC）的安全性。方法开放性、单试验组、Ⅰ期临床研究,共入组2例,均为常规放化疗效果差的患者,男性1例,女性1例,年龄分别为79岁、53岁。病理类型分别为小细胞肺癌（广泛期）、肺腺癌（Ⅳ期）。应用GP方案,即LBP30mg／m^2,静滴,d1;GEM1000mg／m^2,静滴,d1.8,21d为1个周期。其中男性SCLC患者接受1个周期化疗、女性NSCLC患者接受1．5个周期化疗,按照WHO和NCI标准评价客观疗效和毒副反应,定期随访。结果2例毒副反应主要表现为可逆性的骨髓抑制、胃肠道反应、一过性肝损害、脱发,未见明显心肾毒性。结论LBP联合GEM组成GP方案治疗晚期NSCLC和SCLC的毒副反应可以耐受,可进一步研究观察。     

松弛素保护心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤的机制

背景：研究报道松弛素可显著改善病理因素导致的心肾功能障碍,抑制心肌肥厚、抗纤维化以及改善缺血再灌注损伤等,但其对内皮细胞缺氧复氧损伤的保护机制尚不明确。目的：探讨松弛素保护心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤的机制。方法：取生长状态良好的小鼠心肌微血管内皮细胞系(H5V),分3组处理：对照组常规培养33 h,模型组常规培养24 h后给予6 h缺氧+3 h复氧模拟心肌缺氧再灌注损伤,松弛素组常规培养(加180 ng/mL松弛素)24 h后给予6 h缺氧+3 h复氧(加180 ng/mL松弛素)模拟心肌缺氧再灌注损伤。检测细胞通透性与Caspase-3的表达,细胞上清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6水平,RT-PCR检测细胞中钙黏蛋白、Akt1、GSK-3β mRNA表达;Western blot检测细胞中钙黏蛋白、Akt、GSK-3β蛋白表达。结果与结论：(1)与对照组比较,模型组细胞通透性增强(P <0.05),细胞内Caspase-3表达升高(P <0.05);与模型组比较,松弛素组细胞通透性降低(P <0.05),细胞内Caspase-3表达降低(P &l...     

艾司氯胺酮临床应用的研究进展

氯胺酮一直作为非巴比妥类静脉麻醉药广泛应用于临床麻醉和镇静,其右旋异构体艾司氯胺酮于2019年在我国上市,镇静、镇痛效果优于氯胺酮且不良反应更少。本文将针对艾司氯胺酮在精神神经系统疾病、临床麻醉及急危重症等领域的临床应用及常见不良反应作一系统综述,以期对临床使用提供参考。     

京医药特色敷贴疗法在急性痛风性关节炎患者中的应用效果

目的 探讨京医药特色敷贴疗法在急性痛风性关节炎患者中的应用效果。方法 以2021年2月至2022年2月防城港市中医医院收治的60例急性痛风性关节炎患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组(30例)和观察组(30例)。对照组患者予以常规干预,观察组患者基于常规干预联合使用京医药特色敷贴进行干预。比较2组患者的症状积分、肿胀度、疼痛程度和实验室指标。结果 干预3 d及7 d后,2组的症状积分、视觉模拟评分法(VAS)评分、血尿酸(UA)、红细胞沉降率(ESR)和C反应蛋白(CRP)水平均较干预前降低,肿胀度均轻于干预前(P均<0.05);观察组的症状积分、VAS评分、ESR、UA和CRP水平均较同期对照组更低,肿胀度均轻于同期对照组(P均<0.05)。结论 京医药特色敷贴疗法能够减轻急性痛风性关节炎患者的肿胀及疼痛程度,降低ESR、UA和CRP水平,缓解临床症状。     

血清NLRP3、HMG-1、IL-10表达水平与脓毒症患者病情及预后的关系探究

目的 研究脓毒症患者血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、高迁移率族蛋白1(HMG-1)、白细胞介素-10(IL-10)的表达水平状况及与病情和预后结局的相关性。方法 选取该院于2022年1-12月收治的180例脓毒症患者作为脓毒症组,180例健康志愿者作为对照组。检测血清NLRP3、HMG-1、IL-10表达水平,分析对比三者在对照组、脓毒症组血清中的表达水平差异及与病情程度的关系。脓毒症患者入院后均行疾病针对性措施治疗,根据28 d预后进行预后分组,比较不同预后结局患者的NLRP3、HMG-1、IL-10表达水平及预测脓毒症患者预后结局的效能,以及NLRP3、HMG-1、IL-10不同表达水平患者28 d的生存率,明确脓毒症患者预后结局的影响因素。结果 脓毒症组血清NLRP3、HMG-1、IL-10表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。随着病情的加重,脓毒症患者血清NLRP3、HMG-1、IL-10表达水平逐渐升高,脓毒性休克患者表达水平高于重度脓毒症患者,重度脓毒症患者表达水平高于轻度脓毒症患者,差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组...     

结核分枝杆菌MPT64双抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用

目的 建立结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)分泌蛋白MPT64的双抗体夹心ELISA检测方法并评价初步应用效果。方法 采用间接ELISA和ELISA叠加试验在各株抗MPT64 mAb中筛选出亲和力较高的识别不同抗原表位的配对抗体;Protein A亲和层析纯化配对的2株mAb腹水,其中1株mAb偶联生物素(Biotin)作为检测抗体,另1株作为捕获抗体,棋盘滴定法优化捕获抗体和检测抗体的工作浓度,建立双抗体夹心ELISA方法;以常规条件作为初始反应条件,依次优化包被、封闭、抗原、抗体以及底物反应环节的条件;以MPT64抗原检测评估建立的ELISA方法的检测限、线性范围、精确性、准确性和特异性;采用该方法检测Mtb H37Ra不同阶段培养上清中MPT64含量,初步评价应用效果。结果 ELISA法成功筛选出配对抗体H2F4和A5B2 mAb;液相色谱法从腹水中纯化获得的mAb滴度分别为1∶102 400、1∶51 200。以生物素偶联的A5B2 mAb作为检测抗体,以H2F4 mAb为捕获抗体,建立并优化MPT64双抗体夹心ELISA方法,确定的试...     

胃癌与微小RNA研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类长度为21～25个核苷酸的非编码小RNA,调节内源基因表达,在生物发育过程中起重要作用,其表达具有高度的保守性、时序性和组织特异性.     

小鼠精原细胞的分离和纯化

目的　探讨小鼠精原细胞的分离纯化。　方法　用组合酶消化法制备 7～ 8d小鼠的生殖细胞悬液 ;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。　结果　所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90 .0 8%、9.92 %及 8.91% ;平均每个睾丸可获得 4.136× 10 5 个细胞 ;精原细胞主要分布于位于 2 7%～ 35 %间的Percoll梯度中 ,其超微结构与 7～ 8d小鼠睾丸切片内精原细胞的超微结构一致 ,经纯化后其纯度达 6 8.76 %。　结论　用组合酶消化、Percoll不连续密度梯度法分离的 7～ 8d小鼠的精原细胞能满足体外培养的需要