提高胚胎大鼠神经干细胞数量的实验方法

目的:通过培养了解神经干细胞的生物学特性,着重从胎龄选择、优化分离和换液方法上提高神经干细胞的增殖能力和生长数量。方法:实验于2004-04/2005-09在锦州医学院中心实验室完成。①雌性SD大鼠35只,每日做阴道细胞涂片,排卵期雌雄合笼,以出现精栓计为受孕第0.5天。分别于孕10.5,11.5,12.5,13.5,14.5,16.5,18.5d取出大鼠胚胎体,每时间点各5只。②通过采用机械分离和酶消化分离相结合的方法分离培养不同胎龄大鼠脑神经干细胞。③换液首次采用分瓶法以后采用低速离心半量换液。④采用免疫细胞化学技术分别检测神经干细胞特征性标志巢蛋白表达和用血清诱导分化为大量神经元微管组合蛋白2和神经胶质纤维酸性蛋白表达。结果:①胎龄为12.5d的胎鼠提取的神经干细胞集落最多,其次为13.5d。②在上述条件下培养及传代的细胞不断分裂增殖,形成悬浮生长的呈巢蛋白阳性的神经球。③用血清诱导分化为大量表达微管组合蛋白2阳性的神经元和胶质纤维酸性蛋白阳性的神经胶质细胞。结论:考虑到生长因子在孕13～15d能够很好地发挥作用,故选择胎龄为13.5d胎鼠作为实验材料较为合适。通过采用机械分离和消化分离相结合的方法分离和原液首次采用分瓶法显著提高了神经干细胞的培养数量,培养出的细胞具有自我更新能力和增殖能力,可分化为神经元、神经胶质细胞及少突胶质细胞。     

高效液相色谱法测定全天麻泡腾颗粒中天麻素含量

目的 建立测定全天麻泡腾颗粒中天麻素含量的高效液相色谱法.方法 KronosilTM C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸-水(2.8:0.2:97),检测波长为221 nm,流速为0.8 mL/min,柱温为25℃.结果 天麻素进样量线性范围为2.60～ 23.40 μg/mL(r =0.9997),平均回收率为98.90％,RSD为0.75％(n=5).结论 所用方法简便、准确,灵敏度高,重现性好,可用于天麻及全天麻泡腾颗粒的含量测定.     

舒芬太尼和芬太尼用于神经外科手术麻醉的比较研究

目的 观察全身麻醉药物舒芬太尼和芬太尼对中枢神经系统肿瘤切除术患者围手术期血流动力学、苏醒期恢复情况及机体应激反应的影响.方法 50例择期行中枢神经系统肿瘤切除术患者,随机接受舒芬太尼和芬太尼全身麻醉,观察并记录麻醉诱导后、插管后1 min、头架固定时、切开皮肤、切开硬脑膜、关闭硬脑膜、恢复呼吸即刻和拔管即刻等不同观察时间点平均动脉压、心率、脉搏血氧饱和度等项指标的变化,测定麻醉诱导前后血糖和肾上腺素水平.结果 与基础值相比,两组患者在切开硬脑膜、恢复呼吸即刻和拔管即刻心率增加(均P＜0.05),麻醉诱导后、切开硬脑膜、关闭硬脑膜时平均动脉压下降(均P＜0.05),但芬太尼组患者在切开皮肤和拔管即刻均出现平均动脉压升高现象(P＜0.05).手术过程中不同观察时间点,芬太尼组患者平均动脉压和心率均高于舒芬太尼组(P＜0.05或P＜0.01),舒芬太尼组患者自主呼吸恢复时间早、拔管时间短(均P＜0.05).两组患者手术前、切开皮肤30min、拔管即刻血糖和肾上腺素水平比较,差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 与芬太尼组比较,舒芬太尼组患者在不同麻醉时期血流动力学更稳定,气管插管时心血管反应更小;舒芬太尼和芬太尼对患者围手术期血糖和肾上腺素均无明显影响.     

原发性高血压患者红细胞Mg2+/Na+交换速率的研究

目的：探讨国人原发性高血压（EH）患者红细胞Mg2 ／Na 交换速率（VNDmax）、红细胞镁含量（EMC）及其与血压的关系。方法：原子吸收光谱火焰法。结果：（1）EH组的VNDmax显著高于正常对照组（分别为155．3±15．2和96．8±13．2μm·L-1,P＜0．05）,而EMC显著低于对照组（分别为2．03±0．06和2．16±0．04mmol／L,P＜0．05）;（2）EH组的VNDmax与舒张压显著相关（r＝0．4872,P＜0．05）。结论：EH患者VNDmax明显升高,可能是造成EMC低下的原因,在疾病的发生和发展中起一定作用。     

miR-146a通过靶向调控TLR4减轻脊髓缺血再灌注大鼠损伤

目的 检测miR-146a在脊髓缺血再灌注(IR)大鼠脊髓组织的表达情况,探索miR-146a对IR大鼠炎症蛋白表达和神经功能影响的潜在机制.方法 SD大鼠通过主动脉弓夹闭14min建立IR模型,通过鞘内注射miR-146a的mimics质粒构建miR-146a过表达模型,随机分为Sham组(假手术组),IR组(缺血组...     

Ang-(1-7)与肺高压状态下肺血管平滑肌细胞的增生

背景：Ang-(1-7)虽然具有抗血管平滑肌细胞增殖作用,但在不同的血管床中其作用可能存在差异。直接给予外源性Ang-(1-7)是否可抑制肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞的增殖尚不清楚。 目的：探讨Ang-(1-7)对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞增殖的影响。 方法：雄性SD大鼠颈部一次性注射60 mg/kg野百合碱制备肺动脉高压模型。24 h后,分别经微泵持续泵入Ang-(1-7)(治疗组)或生理盐水(模型组),并设立未造模的对照组。给药2,4周,测定大鼠的右心室收缩压、心室质量、肺小动脉管壁厚度占管径的百分比及管壁面积占血管总面积的百分比。免疫组织化学方法检测肺血管平滑肌细胞α-平滑肌肌动蛋白及增殖细胞核抗原的表达。 结果与结论：野百合碱诱导2周,与对照组比较,模型组大鼠右心室收缩压、各心室的质量无明显变化,肺小动脉管壁厚度占管径的百分比、管壁面积占血管总面积的百分比、增殖细胞核抗原阳性率显著增高,α-平滑肌肌动蛋白显著降低;野百合碱诱导4周,模型组大鼠右心室收缩压、各心室的质量、肺小动脉管壁厚度占管径的百分比、管壁面积占血管总面积的百分比、增殖细胞核抗原阳性率均显著增高,α-平滑肌肌动蛋白显著降低。而治疗组上述指标与对照组比较差异无显著性意义   (P > 0.05)。说明在野百合碱诱导的肺动脉高压模型中,在肺动脉压增高之前已有肺血管形态学的变化,Ang-(1-7)可通过减轻肺血管平滑肌细胞的增生抑制大鼠肺动脉压的升高。     

电子束CT冠状动脉钙化与影像学斑块负荷的量化关系

探讨经电子束CT检测的冠状动脉钙化积分与影像学斑块负荷的量化关系。 32 0例临床疑诊为冠心病而行选择性冠状动脉造影的患者行电子束CT检查 ,并计算冠状动脉钙化积分 ,分析钙化积分与冠状动脉粥样斑块负荷之间的关系。结果发现 ,全组冠状动脉钙化积分为 0～ 3 346 ,中位数 45 ,钙化积分的自然对数转换值平均为 3 .64± 2 .1 8。钙化积分的自然对数转换值与狭窄程度呈轻度正相关 (r=0 .385 ,P <0 .0 0 1 ) ,与斑块负荷总分呈高度正相关 (r=0 .768,P <0 .0 0 1 )。结果提示 ,电子束CT检测的冠状动脉钙化积分与斑块负荷之间有良好的相关性 ,而与狭窄程度的相关性较差。     

北京市350家用人单位重点职业病危害因素监测结果分析

采用判断抽样法，选取“北京市职业健康监管系统”中存在矽尘、水泥粉尘、铅、苯、噪声等五种重点职业病危害因素的350家用人单位作为调查对象。分析接触职业病危害因素（以下简称“接害”）人数、行业、规模分布及职业病危害因素超标和劳动者体检异常情况。结果显示，350家用人单位中，五种重点职业病危害因素接害人数24 664人，接害人数由多至少的危害因素依次为噪声、苯、铅、矽尘和水泥粉尘，噪声、矽尘的超标率分别为32.00%和4.60%，其他危害因素未超标。接触噪声人员体检异常率较高（2.53%，415/16 419）。不同行业、不同规模用人单位的噪声超标率和体检异常率比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；接触不同职业病危害因素人员的体检异常率比较，差异亦有统计学意义（P<0.05）。提示相关部门应有针对性地对重点行业、重点规模的用人单位开展职业卫生监管工作，提高管理效率，保护劳动者健康。