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HBsAg与结核杆菌热休克蛋白70融合质粒在真核细胞中的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 探讨HBsAg与结核杆菌热休克蛋白(70(Mt.HSP70)融合表达质粒在真核细胞中的表达。方法 用真核表达质粒pCI-neo作为载体构建HBsAg及其与Mt.HSP70的融合表达质粒(pCI-S,pCI-S-HSP70);用脂质体介导的转染法将重组质粒转染HepG2细胞,48h后,采用RT-PCR,免疫细胞化学和ELISA检测重组质粒在HepG2细胞中的表达。结果 质粒pCI-S和pCI-S-HSP70转染的HepG2细胞总RNA用RT-PCR可检测到目的基因mRNA的表达;pCI-S和pCI-S-HSP70转染的HepG2细胞用免疫细胞化学检测,结果显示在胞浆及核周有大量的阳性颗粒;ELISA检测pCI-S转染的细胞培养上精液HBsAg为阳性,而pCI-S-HSP70转染的细胞培养上清液HBsAg为阴性;在细胞裂解液中,二者转染的细胞均为阳性。结论 HBsAg与Mt.HSP70的融合表达质粒可在HepG2细胞中表达,但表达的融合蛋白不分泌出细胞外。 相似文献
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目的:探讨碱性磷酸酶和淋巴细胞比值(ALR)在预测巴塞罗那(BCLC)分级A-B级肝癌患者肝动脉灌注化疗栓塞术(TACE)术后生存情况的价值。方法:以肝癌TACE术后肿瘤进展或死亡为状态变量,分别以中性粒细胞和淋巴细胞比值、淋巴细胞和单核细胞比值、碱性磷酸酶、淋巴细胞计数以及ALR作为检验变量,进行两者的ROC分析,根据术前ALR预测肝癌患者TACE术后肿瘤进展或死亡的最佳诊断截点将所有纳入患者分为A组和B组,对两组肝癌患者通过倾向性评分匹配法进行配对分组,通过logistic回归估计倾向性评分值,检验匹配后两组临床病理指标的均衡性,匹配后标准差异绝对值均控制在 0.10以内,Kaplan-Meier生存分析分别比较匹配后A组和B组两组肝癌患者TACE术后无进展生存率和总生存率,采用Cox 回归分析评价匹配前后ALR对肝癌患者TACE术后PFS和OS的预测价值。结果:根据ALR最佳诊断截点将纳入所有患者分为ALR<5.4×10-7(A组)和ALR≥5.4×10-7(B组),通过倾向性评分匹配,两组共 57对匹配成功,匹配前两组间有显著性差异的临床指标经匹配后均达到平衡,其他无显著性差异的指标均衡性也得到了明显的提高,Kaplan-Meier生存分析显示,匹配后A组肝癌患者TACE术后1年、2年、3年无进展生存率显著高于B组(60.5%、41.2%、33.6% vs 47.9%、20.9%、20.9%,P<0.05),A组肝癌患者TACE术后1年、2年、3年总生存率显著高于B组(72.3%、62.4%、55.2% vs 63.5%、51.5%、31.8%,P<0.05),Cox回归分析显示,匹配前后ALR均为肝癌患者TACE术后PFS和OS的独立预测因素。结论:术前ALR水平预测BCLC分级A-B级肝癌患者TACE术后远期生存情况具有较高的价值。 相似文献
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树突细胞 (dendritic cell, DC,也称树突状细胞 )作为功能最强的抗原提呈细胞,目前已广泛应用于抗病毒和抗肿瘤免疫研究,特别是近年来, DC瘤苗在临床治疗中取得了良好效果.然而, DC在体内含量极低,用直接分离法获得的 DC数量难以满足临床需要.业已证实 [1],用不同细胞因子组合可以从脐血、胚肝、骨髓、外周血培养扩增出大量 DC,然而胚肝、骨髓来源困难,不适宜临床应用,脐血来源方便,但其抗原提呈功能弱于外周血来源的 DC.王月丹等 [2]比较不同来源的 DC,发现外周血单核细胞诱导分化的 DC,其抗原提呈能力最强.因此,本实验从正常人外周血中分离单核细胞,用 GM- CSF和 IL- 4组合诱导分化 DC,经形态学、功能学及特异标记鉴定为典型的 DC.用模拟体内实验的方法体外诱导出针对肝癌细胞抗原的特异性细胞毒性 T淋巴细胞 (cytotoxic T lymphocyte,CTL),并用于荷瘤裸鼠的治疗以观察其抑瘤效应. 相似文献
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目的 探讨传染性非典型性肺炎 (SARS)除肺脏外的多脏器损害情况。方法 对5 0例SARS患者与 4 0例普通肺炎患者的实验室检查结果进行回顾性分析与对照检验。结果 SARS患者血清谷丙转氨酶 (ALT)、血清谷草转氨酶 (AST)、乳酸脱氢酶 (LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸同工酶 (CK -MB)、LD同工酶 (LD - 1)早期均出现升高 ,极期升高更明显 ,与普通肺炎组相比均有显著性差异 (P均 <0 .0 5 ) ,极期与早期相比均有显著性差异 (P均 <0 .0 5 )。结论 传染性非典型性肺炎除肺明显损害外还有心、肝损害。 相似文献
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为适应传染病发展新形势的要求,在传染病临床病房见习和病案讨论的教学中,尝试应用以问题为基础的学习和扩展型教学相结合的模式。通过课堂效果及问卷调查对教学效果予以评价,结果显示这种结合教学方式培养了学生的自学能力,扩展了学生的临床视野和临床思维。 相似文献
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目的:观察人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对裸鼠肝癌移植瘤模型的作用。方法:实验于2005-04/12在广州医学院动物实验室进行。取24只雄性裸鼠(BALB/C-nu/nu),将体外培养人肝癌Bel-7402细胞株种植于左前上肢腋窝皮下,然后单纯随机分为4组(n=6):①人参皂甙Rg3组:自接种肝癌细胞株第3天起,灌胃给予10mg/kg人参皂甙Rg3,隔日1次,灌胃20次。②三氧化二砷组:自接种肝癌细胞株第3天起,腹腔内注射三氧化二砷40μg/d,1次/d,连续28d。③联合用药组:同时用人参皂甙Rg3灌胃和三氧化二砷腹腔注射,用药量和时间同上2组。④对照组:等量生理盐水灌胃,方法同人参皂甙Rg3组。停药1周后分别观察裸鼠的生存质量(包括精神状态、活动状况、对刺激的反应、体质量下降幅度、食欲和尿、便6项指标),测定瘤质量,计算肿瘤抑制率,计数肿瘤内微血管密度。结果:①治疗方案结束时,联合用药组6只裸鼠均存活,人参皂甙Rg3组和三氧化二砷组有5只存活,对照组只有4只存活。人参皂甙Rg3组和联合用药组荷瘤裸鼠生存质量较高。②人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组平均瘤质量明显轻于对照组[(0.83±0.22),(0.68±0.16),(0.56±0.11),(1.52±0.60)g,P<0.05],但前3组之间差异不显著(P>0.05)。③人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组肿瘤抑制率分别为45.1%,55.3%,63.1%,3组比较差异不显著。④人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组肿瘤内微血管密度明显低于对照组[(12.71±2.75),(18.00±2.24),(10.00±2.92),(27.00±2.94)个/200倍视野,P<0.05],人参皂甙Rg3组和联合用药组微血管密度值低于三氧化二砷组(P<0.05),但2组间比较差异不显著(P>0.05)。结论:人参皂甙Rg3能明显抑制肿瘤新生血管形成,与三氧化二砷联合应用具有协同作用,能明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长,改善荷瘤裸鼠生存质量。 相似文献