Vero/Slam细胞在麻疹病毒分离中的应用

目的评价Vero/Slam细胞对麻疹病毒的敏感性,以及麻疹病毒在Vero/Slam细胞上的生长特点。方法组织细胞培养法分离病毒,将标本接种到长满单层的Vero/Slam细胞上,盲传3代,观察细胞病变(CPE)。将分离到的麻疹病毒通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增出核蛋白(N)基因碳末端450个核苷酸片段,对其产物测定基因序列以定型。结果Vero/Slam细胞对麻疹病毒高度敏感,其CPE特点是典型的细胞融合性病变。此次分离到的麻疹病毒为H1基因型,和中国的本土优势流行株相符。结论Vero/Slam细胞对麻疹病毒敏感,可在麻疹病毒分离中选用。     

广东省实施野生动物市场干预后SARS冠状病毒污染情况分析

目的了解广东省实施野生动物市场干预后野生动物市场SARS冠状病毒污染情况,为防控SARS疫情提供科学依据。方法于2004年9月至2005年5月,每月在广州市两家经营野生动物的场所分别采集动物市场外环境样本和各种动物样本(咽拭子、肛拭子、粪便等),用Realtime-PCR法检测SARS-CoV核酸基因片段。结果2004年1月起,广东省对动物市场进行干预,在全省范围内关闭野生动物交易市场,全面禁止果子狸等野生动物的饲养、运输、销售、屠宰和食用。市场干预后,检测销售飞禽类、水禽类、畜类、兽类、水产类等的动物市场外环境样本共417份,检测动物市场蛇、水产、黄犭京、竹鼠、兔、猫、鸡、鸭、鸽子等动物样本共1 160份,均未检出SARS-CoV核酸片断。结论实施对野生动物市场干预,能有效降低动物市场各种动物SARS-CoV的携带率,对预防SARS的发生和传播起到了重要作用。     

广东省暴发性胃肠炎中诺如病毒的分子流行病学特点分析

目的研究广东省暴发性胃肠炎中诺如病毒的分子流行病学特点。方法对2003年至2004年的13起急性胃肠炎患者的粪便和肛拭子标本,采用针对诺如病毒的特异引物和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术进行检测,再经核苷酸序列测定分析病毒的基因型,同时收集患者相关流行病学资料。结果13起暴发性胃肠炎中有8起是由诺如病毒引起的,时间主要集中在每年的10月至12月,基因分析显示这些病毒都属基因Ⅱ组,但分属3个亚型,6株病毒属GⅡ-4型。结论诺如病毒是广东省暴发性非细菌性胃肠炎的重要病原体之一,具有分布广、流行时间集中在秋冬季的特点。引起暴发的病毒主要为基因Ⅱ组,在现阶段存在优势毒株。     

广东省脊髓灰质炎疫苗免疫状况与脊髓灰质炎发病率关系的探讨

分析了广东省1989～1993年报告的脊髓灰质炎（脊灰）疑似病例的口服脊灰疫苗（OPV）免疫状况和1994～1997年报告的急性弛缓性麻痹（AFP）病例的OPV免疫状况,以及部分AFP病例的血清中和抗体水平．1989～1993年报告的脊灰疑似病例中,服苗＜3次及OPV免疫史不详的占87.0％,每年有脊灰野病毒流行;1994～1997年报告的AFP病例中,服苗≥3次的占79．6％;采集了血清标本的AFP病例中,血清中和抗体阳性率达98．9％．4年间未发现脊灰野病毒引起的麻痹病例．此结果表明,维持高水平的人群全程免疫覆盖率可阻断脊灰野病毒的传播。     

广东省历年流行性脑脊髓膜炎病原体分子特征分析

目的 了解广东省历年流行性脑脊髓膜炎(流脑)病原体的外膜蛋白编码基因porA和porB基因特征,并确定病原体的优势克隆型.方法 对1967-2007年从流脑患者分离的18株脑膜炎奈瑟球菌(Neisseria meningitidis)进行复苏培养和生化鉴定;通过DNA序列测定分析外膜蛋白编码基因porA、porB特征;对菌株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST),采用PHYLIP软件制作进化树,并与脑膜炎余瑟球菌MIST全球数据库(PubMLST)中的菌株比较,确定优势克隆型菌株,探讨广东省历年流脑疫情分离株的看家基因序列多态性.结果 porA可变区(VR)1的型别以20型为主,VR2的型别在2004年前主要为9型,以后呈现多态性;porB可变区Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ主要分别为4、7、11、10型,2004年后可变区Ⅴ、Ⅵ型别增多;除2007年分离的1株W135菌株外,其余菌株的porB基因均无Ⅶ、Ⅷ可变区.在7个看家基因中,abcZ等位基因多态性最低,pgm最高.广东省历年流行性脑脊髓膜炎分离株2004年前的优势克隆为ST-5克隆系,自2004年开始出现高致病性ST-4821克隆系,2007年首次出现高致病性ST-11克降系.结论 广东省历年脑膜炎奈瑟球菌分离株的外膜蛋白编码基冈呈现多态性特征,分离株为多克隆系并存,近期以高致病性克隆系为主.     

珠江河口水体霍乱弧菌污染状况调查研究

目的:了解珠江河口水体01/0139群霍乱弧菌的污染情况,提出改善水体霍乱弧菌监测的建议,为采取针对性措施预防控制霍乱的发生和流行提供依据.方法:根据历年霍乱监测资料和疫点分布状况,在珠江水系广州段选择设立24个采样点,每月采集水体标本进行01/0139群霍乱弧菌分离培养,对分离得到的阳性菌株进行血清分型、噬菌体一生物分型、PCR检测毒力基因、K-B法药敏试验.结果:2006年3月～2007年2月共采取862份水体样本,其中有67份检出01或0139群霍乱弧菌,检出率为7.77%,血清型以01群为主,尤以稻叶型占优;01群菌株均为非流行株,2株0139群菌株检出ctx毒力基因;菌株耐药分析发现不同血清型菌株耐药谱有所差异.结论:01/0139群霍乱弧菌在珠江河口水体环境中广泛存在,常年均可从水体中分离获得.必须加强环境水体及海水产品霍乱弧菌监测,及时了解其污染状况,以便采取针对性措施预防控制霍乱的发生和流行.     

东莞市看守所及收教所羁押妇女艾滋病相关知识、态度和行为调查分析

目的：了解看守所妇女艾滋病相关知识情况,为制定HIV感染预防措施提供依据。方法：应用自行设计的问卷,对看守所及收教所的妇女进行艾滋病相关知识和态度的调查。结果：看守所及收教所妇女艾滋病相关知识部分问题回答正确率较低,卖淫组和吸毒组问题知晓率普遍高于其他组。艾滋病知识获得途径以电视及互联网两种途径最高,分别为67.38％和41.40％。最近6个月性行为安全套坚持使用率平均为65.59％。结论：看守所及收教所羁押妇女对艾滋病知识知晓率仍然偏低,须针对不同人群进行艾滋病的知识宣传和妇女保健干预工作,控制艾滋病传播。     

风疹病毒野生株感染ECV304血管内皮样细胞的细胞病变效应

目的通过体外培养和风疹病毒野生株感染ECV304血管内皮样细胞,初步探讨中国大陆流行的风疹病毒野生株的致病变性特征.方法常规方法培养ECV304血管内皮样细胞和病毒接种,RT-PCR和间接免疫荧光法检测风疹病毒包膜糖蛋白E1基因的表达,相差显微镜及电子显微镜下观察细胞受病毒感染后形态变化,脱氧核糖核酸末端转移酶法（TUNEL）检测细胞凋亡.结果感染后2～3 d即可检测到风疹病毒包膜糖蛋白E1基因表达;感染后4 d,相差显微镜观察呈现明显的细胞病变效应,即细胞悬浮脱壁、细胞体变圆缩小、细胞膜皱缩、染色质浓缩等;电镜下观察可见明显病毒颗粒,核染色质浓集、边缘化,线粒体聚集于细胞核周围呈溶酶体化、空泡化和自噬现象.TUNEL法检测细胞凋亡指数（AI）在病毒感染组与对照组间有显著性差异（P＜0.01）.结论风疹病毒野生株在ECV304细胞中有明显的致细胞病变效应,在体外细胞培养下可诱导ECV304血管内皮样细胞凋亡.     

2006年广东省流感病毒流行的分子基础

目的了解广东省2006年流行性感冒（流感）流行情况的分子基础。方法选择广东省流感监测网络实验室分离的11株流感毒株,对血凝素基因进行基因和抗原性的分析。此外,还检测人群抗体水平。结果2006年流行的H1N1亚型病毒血凝素蛋白重链（HA1）区氨基酸序列与A/New Caledonia/20/99（H1N1）相比,同源性为95.7%～96.3%,有2个抗原决定簇的氨基酸发生了替换。Victoria系的HA1区基因与B/HongKong/330/2001相比,同源性为97.2%～97.5%,有6个位于抗原决定簇的氨基酸发生了替换,这种变化和B/Malaysia/2506/2004相一致,这在B型的基因种系发生树也得到证实。同时发现人群针对H1N1亚型和B/Victoria的抗体水平较低。结论2006年广东H1N1亚型和B/Victoria系病毒株发生了一定程度的变异,以及人群保护性抗体水平较低,共同造成其在本地的流行。