开口箭皂苷对S-180肉瘤细胞荷瘤小鼠NF-κB mRNA的影响及其机制研究

目的观察开口箭皂苷对S-180肉瘤细胞荷瘤小鼠NF-κB mRNA的影响,证实开口箭对实体瘤的抑制作用,探讨其分子机制。方法计算四噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度的开口箭皂苷对S-180肉瘤细胞体外培养下抑制率,并进行电镜形态观察。同时建立S-180肉瘤荷瘤小鼠模型,给予不同浓度的开口箭皂苷进行干预,以5-氟尿嘧啶(5-Fu)为阳性对照,观察细胞形态,用凝胶电泳迁移率实验(EMSA)技术检测NF-κB的变化;实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR)检测各组NF-κB mRNA。结果开口箭皂苷呈浓度依赖性抑制S-180肉瘤细胞增殖,以48h作用最佳。开口箭各组荷瘤裸鼠的瘤质量呈浓度依赖性下降,差异均有统计学意义(均P0.05),各给药组瘤组织NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平均明显低于空白组(均P0.05),并随着开口箭皂苷浓度的增加逐渐降低,各组间比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结论开口箭皂苷明显抑制S-180肉瘤细胞体外增值,具有抑制实体肉瘤作用,降低NF-κB mRNA是其分子机制之一。     

免疫学课堂教学中调动学生参与活动的尝试

课堂阅读已成为众多教学方法中重要的环节，也是课堂教学中学生参与活动的重要形式之一。教师在组织学生阅读过程中要加强阅读指导，要求边读边思考。在阅读提纲的引导下，让学生带着问题阅读教材。例如，在学习“免疫系统”一课时，引入课题后出示阅读提纲：（1）什么是免疫系统？由哪几部分组成？（2）其特点是什么？     

血尿-黑便-关节腔出血

传统的医学教育模式常常是从疾病出发向学生讲授知识，如肺炎、冠心病、阑尾炎……等等。然而在实际工作中，患者往往是带着症状来就诊的，如咳嗽、头晕、乏力……等等。一些看似简单的症状，后面常常隐藏着许多问题，如何从症状入手，分析问题，从而明确诊断，这是医生常常要面临的。随着医学的发展，新的诊断方法不断涌现，相反，医生的思维却变得越来越简单。例如“胸痛”是个症状，许多医生一碰到就首先想到“冠心痛”，常常先给患者安排冠心痛的相关检查如心脏超声、核素检查、冠状动脉造影等，可能最后发现不是冠心病，再重新考虑别的病，对患者往往造成巨大负担。因此，从症状出发，一步步深入分析，选择必要的辅助检查手段，最终得出正确的诊断，是医生必须训练的临床思维能力。为此，本刊特开辟“由症状到诊断”栏目，旨在通过一些案例的分步分析，体现这种诊断思维的精神，再现诊断的艺术供同行们交流。[编者按]     

六味地黄丸对糖尿病大鼠骨骼肌GLUT-4基因表达的影响

目的:研究六味地黄丸对糖尿病大鼠血糖、胰岛素、葡萄糖转运蛋白-4(glucosu tramporter-4,GLUT-4)基因表达的影响.方法:20只雄性Wistar大鼠尾静脉注射四氧嘧啶复制糖尿病动物模型.将成模的糖尿病大鼠按血糖和体重随机分为糖尿病组、六味地黄丸组,同时设立正常对照组,并分别给予蒸馏水和六味地黄丸灌胃6周,6周后测定空腹血糖,血清胰岛素水平,RT-PCR.半定量测定骨骼肌GLUT-4mR3qA表达.结果:糖尿病组大鼠血糖显著升高,GLUT-4mRNA含量显著降低;补充六味地黄丸后血糖显著下降,GLUT-4mRNA含量显著增加.结论:六味地黄丸能改善糖尿病大鼠糖代谢,降糖机制可能与增加骨骼肌GLUT-4mRNA的表达有关.     

表皮生长因子对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的 探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)对小鼠卵母细胞体外成熟及受精的作用.方法 在体外成熟液中分别添加0、0.1、1、5、10ng/Mlegf,12h后检查成熟率,并观察EGF对体外受精的影响.结果 添加5ng/Ml和10ng/Mlegf组卵母细胞第一极体排出率较对照组显著提高(P<0.05),并且5ng/Ml组的效果显著高于其他各组(P<0.05);比较培养液中添加以上浓度EGF对体外受精胚发育的影响,结果发现添加5ng/Ml EGF虽不能显著提高囊胚发育率(P>0.05),但可显著提高其通过二细胞阻滞率和囊胚孵化率(P<0.01).结论 EGF对小鼠卵母细胞体外成熟及受精有促进作用,可提高体外成熟率及囊胚孵化率,还可促进受精卵通过二细胞阻滞.     

核因子-κB对ApoE^-／-小鼠肾动脉粥样硬化斑块破裂肾损害的实验研究

目的探讨核转录因子-κB(NF-κBp65)在ApoE-/-小鼠肾动脉粥样硬化斑块破裂肾损害发生中的作用及其对细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达和单核巨噬细胞浸润的影响。方法采用ApoE-/-小鼠制作动脉粥样硬化性肾动脉狭窄动物模型。选择肾动脉粥样硬化斑块造成肾动脉狭窄程度小于50%的ApoE-/-小鼠,按斑块分为:破裂组和未破裂组;选择同条件喂养的C57BL/6J野生型小鼠为对照组。取各组肾动脉及肾脏:采用免疫印迹(Western blot)法检测NF-κBp65及ICAM-1表达;采用免疫组化法检测单核巨噬细胞(F4/80)表达。结果(1)无论在血液、肾动脉及肾脏组织中,NF-κBp65在破裂组明显高于未破裂组(P<0.05),而未破裂组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);(2)ICAM-1、F4/80的表达变化与NF-κBp65的趋势相同。结论肾动脉粥样硬化斑块发生破裂,首先是动脉炎症引起,继而波及到下游的肾脏发生炎症性损害。NF-κB的活化在其中占有重要地位。     

不同途径中心静脉置管对血液透析并发症的影响

目的 总结中心静脉置管(CVC)在血液透析患者中的应用,探讨导管合理留置途径、时间及并发症防治.方法 回顾性分析7年间我科对1 966例急、慢性肾功能衰竭患者穿刺股静脉、锁骨下静脉和颈内静脉3个部位CVC共2 000 例次,其中股静脉450例次,锁骨下静脉86例次,颈内静脉1 464例次.结果 股静脉留置5～75(20.5±13.1)d,血栓形成19.11%,感染18.22%,误穿入动脉5.77%,穿刺总渗血4%,导管脱出2.22%,血肿形成1.33%;锁骨下静脉留置10～84(41.8±20.1)d,感染12.79%,血栓形成9.3%,误穿入动脉9.3%,穿刺点渗血5.81%,血肿形成3.48%,血、气胸2.33%,导管脱出1.16%;颈内静脉留置12～155(53.8±28.5)d,误穿入动脉13.4%,感染8.06%,血栓形成6.08%,穿刺点渗血1.91%,血肿形成0.68%,导管脱出0.27%,心律失常0.10%,损伤喉返神经0.05%.结论 血液透析应用CVC具有快捷、方便、安全的优点,导管留置时间在颈内静脉比股静脉和锁骨下静脉明显延长.并发症的发生率在股静脉最高,其次为锁骨下静脉和颈内静脉.颈内静脉置管可作为临床上首选方法.     

大剂量ARB对肾移植后蛋白尿治疗作用的临床研究

目的观察大剂量ARB对肾移植后蛋白尿的疗效及安全性。方法83例肾移植后蛋白尿患者,分为治疗组50例(采用2~4倍剂量ARB治疗)和对照组33例(不使用ARB治疗),观察不同治疗时间两组患者24h尿蛋白、血肌酐、血生化、血压、远期人/肾生存率及药物不良反应。结果治疗组24h尿蛋白排出显著低于对照组;治疗组血肌酐倍增时间、进展到移植肾功能衰竭或死亡的时间显著高于对照组〔(34.42±12.56)个月与(17.51±10.26)个月,(38.12±22.51)个月与(24.25±13.56)个月〕;治疗组出现2例血钾升高,4例低血压。结论大剂量ARB可有效控制肾移植后蛋白尿,提高移植患者人/肾远期存活率,使用安全有效。     

重组人成骨生长肽对化疗小鼠白细胞减少的影响

目的 研究重组人成骨生长肽(rhOGP)对环磷酰胺(Cy)化疗损伤小鼠白细胞减少的影响;观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响.方法 用Cy腹腔注射每日100mg/kg,连续3d,造成小鼠的化疗损伤模型.拮抗实验中,分别给予低、高剂量的rhOGP,连续13d,采用皮下注射给药途径,于第0d、第4d(Cy造模后)、第9d、第14d检测外周血白细胞(WBC)数变化.预防实验中,分别给予rhOGP、DTT与生理盐水,连续10d,并于第8、9、10d同时给予Cy,分别于实验前、实验后记取外周血WBC数.利用MTT法和细胞生长曲线观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响.结果 rhOGP能促进Cy损伤小鼠WBC数的恢复,高、低剂量组间略有差异.rhOGP能明显降低Cy损伤小鼠外周血白细胞减少的幅度.rhOGP对人肺腺癌Anip细胞及人胃癌SGC-7901细胞的增殖无明显促进作用.结论 rhOGP可促进Cy损伤小鼠外周血白细胞的恢复,rhOGP对Cy化疗小鼠白细胞数减少有预防作用,且对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞的增殖无促进作用,提示rhOGP作为肿瘤治疗辅助用药的潜在价值.     

缺血后处理对缺血/再灌注损伤大鼠肾脏Fas,Bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨缺血后处理对缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠肾脏Fas,Bax和Bcl-2表达的影响.方法:将24只SD大鼠随机分为假手术(S)组、I/R组和缺血后处理(IPO)组,每组8只,分别建立动物模型.各组分别采用免疫组化和免疫印迹法检测肾脏Fas,Bcl-2和Bax蛋白的表达变化.结果:IPO组较I/R组Fas阳性染色指数和表达显著降低,分别为[(31.17±4.81)% vs (36.26±5.32)%.P<0.05)]和[(0.98±0.11)vs(1.28±0.19),P<0.05)];IPO组和I/R组Bcl-2阳性染色指数和表达分别为[(32.34±5.12)%vs(31.33±4.55)%.P0.05)]和[(1.03±0.17)vs(0.75±0.11),P<0.05)],Bax阳性染色指数和表达分别为[(25.60±3.79)%vs(29.67±4.34)%,P<0.05)]和[(0.59±0.08)vs(0.91±0.16),P<0.05)].结论:IPO可使Fas和Bax的表达减少,同时可使Bcl-2的表达增加,从而减少缺血再灌注损伤大鼠肾脏细胞的凋亡.