纳米胶体金的制备及粒径的测定

目的利用柠檬酸三钠作为还原剂,制备颗粒均一、分布均匀的纳米胶体金。方法通过考察反应时间、搅拌速度以及初始沸腾时间3个因素来确定最佳的制备条件,以紫外吸收峰、粒径及透射电镜扫描结果进行综合评价。结果胶体金溶液的最佳制备条件为：在200 r/min的搅拌速度加热至沸腾,沸腾后立即加入还原剂,反应12 min后停止搅拌;所制得的胶体金的粒径为20 nm左右。结论采用优化条件所制得的胶体金颗粒均一、分布均匀。     

人乙酰肝素酶稳定表达CHO细胞株的建立

目的 在CHO细胞中表达人乙酰肝素酶(HPA)并建立该酶的稳定表达细胞株.方法 在脂质体的介导下,用本实验室构建的pEGFP-N1-HPA重组质粒转染CHO细胞,经G418筛选稳定表达的细胞.通过荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的表达情况,同时通过RT-PCR检测HPA基因转录水平、免疫细胞化学法检测HPA蛋白表达、MTT方法测定外源基因对CHO细胞增殖的影响.结果 荧光显微镜下可见转染的CHO细胞有绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR证实转染细胞中存在HPA基因mRNA的表达,成功获得HPA的稳定表达细胞株.结论 成功建立人HPA稳定表达CHO细胞株,为该酶的功能研究奠定了基础.     

抗CTLA-4单抗阻断肿瘤免疫抑制的研究

目的：研究抗CTLA－4在淋巴细胞的信号传导和对肝癌细胞（BEL－7402）的杀伤活性。方法：在淋巴细胞培养体系中加入抗CTLA－4，并将淋巴细胞作用BEL－7402，用DNA梯子电泳检测BEL－7402的凋亡，MTTI地测淋巴细胞的杀伤活性，结果：抗CTLA－4能提高淋巴细胞的杀伤活性，BEL－7402出现了凋亡，结论：抗CTLA－4能够与淋巴细胞表面的CTLA－4分子结合，从而阻断CTLA－4的抑制作用，提高了T淋巴细胞反应性，增强了淋巴细胞对BEL－7402的杀伤作用，能够促进BEL－7402的凋亡。     

β-内酰胺类皮肤过敏试验

β-内酰胺类是临床上应用最广泛的一类抗生素 ,随着临床应用的增加 ,过敏反应也有上升的趋势。对青霉素类过敏者约有 10 - 30 %对头孢菌素类过敏。目前有许多医院应用半合成青霉素和头孢菌素时都用青霉素作皮内试验 ,皮试结果阴性即直接应用该类药物 ,在应用青霉素治疗的过程中 ,如加用或换用半合成青霉素或头孢菌素时均不另作使用品的皮内试验。由于皮试引发的许多严重问题 ,我们对青霉素皮内试验结果取代半合成青霉素和头孢菌素皮内试验的做法提出置疑 ,建议应以所用抗生素本品制备皮试液进行药物敏感试验 ,在保证安全有效的同时 ,保留仅…     

TCR Vβ7.1基因转染外周血单个核细胞后表达及抗癌作用

目的研究TCRVβ7.1基因在恢复肝癌病人细胞毒性T细胞(CTL)功能方面的作用。方法以RTPCR方法扩增TCRVβ7.1基因并构建Vβ7.1-pLXSN表达载体。重组体以脂质体转染外周血单个核细胞(PBLs),流式细胞仪检测转染效率,DNALadder实验和透射电镜观察转染后T细胞诱导肿瘤细胞凋亡情况。结果TCRVβ7.1基因转染PBLs后可有效表达并诱导肿瘤细胞凋亡。结论该方法为T细胞介导的肿瘤基因治疗提供了有效途径。