TCRVβ8.4 基因转染人PBMC对肝癌细胞杀伤活性的研究

目的：探讨转染hTCRVβ8.4基因后健康人PBMC的免疫学特性及其对起源于乙肝病毒的肝癌细胞株BEL-7402杀伤活性的改变。方法：将hTCRVβ8.4基因克隆至真核表达载体pcDNA3．1(-)上，并转染健康人PBMC，流式细胞术检测转染后PBMC中TCRVβ8.4蛋白表达，乳酸脱氢酶释放活性法检测重组质粒转染后PBMC对癌细胞BEL-7402的杀伤活性。结果：TCRVβ8.4在基因转染后淋巴细胞中表达显著增高；与BEL-7402共培养后，基因转染组CD3^ TCRVβ8.4T细胞增殖明显高于对照组；BEL-7402刺激后免疫细胞活化，表达CD122的细胞数量增多，表达CD19(B细胞活化的标志)的B细胞增加；重组质粒转染后，PBMC对肝癌细胞BEL-7402杀伤活性增强；透射电镜观察发现，重组质粒转染的PBMC使BEL-7402凋亡。结论：hTCRVβ8.4基因修饰可显著增强淋巴细胞在超抗原BEL-7402刺激下的增殖及免疫细胞活化，基因修饰后T淋巴细胞杀伤活性明显增强。     

人乙酰肝素酶基因真核表达载体的构建与表达

目的 构建人乙酰肝素酶基因（HPA）的真核表达载体pEGFP-N1/HPA,初步探讨其在人胚肾细胞293T中的表达情况.方法 以pOTB7/HPA质粒为模板,PCR扩增HPA基冈,经限制性内切酶酶切后,连接到pEGFP-N1载体上,并对重组表达载体pEGFP-N1/HPA进行酶切与测序鉴定.用脂质体lipefectmi...     

TCR Vβ17．1基因转染外周血单个核细胞后表达及抗癌作用

目的研究TCR Vβ7．1基因在恢复肝癌病人细胞毒性T细胞(CTL)功能方面的作用。方法以RT-PCR方法扩增TCR Vβ7．1基因并构建Vβ7．1-pLXSN表达载体。重组体以脂质体转染外周血单个核细胞(PBLs)，流式细胞仪检测转染效率，DNA Ladder实验和透射电镜观察转染后T细胞诱导肿瘤细胞凋亡情况。结果TCR Vβ7．1基因转染PBLs后可有效表达并诱导肿瘤细胞凋亡。结论该方法为T细胞介导的肿瘤基因治疗提供了有效途径。     

43例院内真菌感染者抗感染药物使用分析

医院真菌感染日渐增多 ,为了解我院医院真菌感染的临床特点及抗感染药物使用情况以便加强控制 ,对我院 1998年、1999年院内真菌感染病历进行调查并分析如下。1　资料与方法住院病人静脉使用大扶康 5 2例 ,去除资料不全 ,选择入院后抗感染药物应用≥ 3天的院内真菌感染 43例进行调查。医院感染按照全国感染监测网规定的标准诊断。诊断依据由病历记录、临床表现、X线检查、实验室检查等综合分析提供 [1 ]。细菌培养和药敏用梅里埃 Vitek- 32细菌分析仪进行。2　结果2 .1　真菌感染概况 :本组 43例医院真菌感染者中 ,男 31例 ,女 12例 ;年龄 1…     

院内下呼吸道感染108例临床分析

目的了解医院下呼吸道感染的概况,以便加强控制。方法调查我院1997年度院内下呼吸道感染108例。结果≥60岁老年人发生下呼吸道感染多,原发病以脑血管病占多数,致病菌以G-杆菌为主,真菌感染率高达27．78％。常用抗感染药疗程不合理占6．67～36．67％。可参考药敏结果选药占25．93％。结论医院下呼吸道感染病原菌以G-菌为主,值得注意的是真菌已成医院感染的重要致病菌,免疫功能低下、滥用抗感染药是造成医院感染的主要因素,且病原菌耐药严重。     

广州市老年人伤害原因的调查分析

以整群抽样方法对广州市部分医院 6 0岁及以上的住院病人和干休所的老人 90 0人进行伤害原因调查。结果 :共发生 14种伤害 ,其总发生率为 53.77% ,前 6种伤害依次为 :交通伤(11.0 7% )、烧烫伤 (5.94 % )、碰撞伤 (5.2 5% )、刀或锐器伤 (4 .4 5% )、坠落 (3.0 8% )、动物咬伤(1 96 % )。女性发生率是男性的 1.2 2倍 ,且女性跌伤较多 (34.6 8% ) ,男性则以交通伤发生为多(13 55% )。随着年龄增加 ,伤害发生率也增加。跌伤的平均损失为 2 4 6 97.2 3元 ,交通伤平均损失94 99.6 2元。认为伤害严重威胁老年人的生命安全 ,应针对伤害原因采取有效措施。     

医院下呼吸道感染者应用抗菌药调查分析

抗菌药不合理使用已成为医药界共注的问题,而耐药菌株的增加及医院感染的发生给临床带来诊疗困难。医院下呼吸道感染是常见的医院感染性疾病,如何正确合理选用抗感染药,有效地控制耐药菌株的产生,避免药物不良反应发生,是临床治疗成败的关键。笔者对我院1997年下呼吸道感染病例进行调查分析,现报告如下。1材料与方法根据我院感染科登记的1997年度院内下呼吸道感染108例。下呼吸道感染诊断按照全国感染监测网规定的诊断标准[1]。诊断依据由病历记录、临床表现、X线检查、实验室检查等综合分析提供。2结果2．1医院感染的病原菌及药敏概…     

我院抗感染药物的使用情况及管理对策

目的　了解医院抗感染药的使用情况 ,以便加强管理控制。方法 　采用横断面调查及统计每年消耗的抗感染药物计算 DDDs。结果　 2 0 0 0年、2 0 0 1年抗感染药物使用频数 ( DDDs)占前 15位的主要为基础抗菌药物 ;横断面调查抗感染药物的日使用率为 40 .80 %。主要为治疗用药。符合卫生部医院感染管理规范要求 <5 0 %;2 0 0 0年MRSA5 9.4%,ESBLs3 7.45 %。 2 0 0 1年的检出率 MRSA60 %,ESBLs3 1.3 7%;2 0 0 2年 MRSA5 0 .65 %,ESBLs2 2 .3 8%;耐药菌株检出率逐年下降。 结论 　加强抗感染药物的使用管理 ,防止滥用。     

42例产EXBLs细菌分离前后抗感染药物应用分析

目的了解产EXBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分离前后抗感染药物的应用情况,提请医生正确选用抗感染药物,防止由EXBLs引起的医院感染暴发流行.方法 1999～2000年,住院感染产EXBLs的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的42例病人进行临床调查分析.结果本组产EXBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌呈多重耐药,对头孢噻肟钠耐药率分别为95.74%和98.08%:住院期间共使用三代头孢菌素135个疗程,EXBLs分离前二周使用第三代头孢菌素占76.19%,使用2种三代头孢菌素占19.05%;鉴定EXBLs阳性后两周选用三代头孢菌素有20例,占47.62%,使用2种三代头孢菌素的占16.67%.抗感染药的使用都是联合用药,品种更换频繁,同一抗感染药静脉连续使用时间长,并发真菌感染21例,占50%.结论第三代头孢菌素在临床上的大量使用导致了EXBLs的产生,且对多种抗生素高度耐药,治疗最佳的药物是碳青霉烯类抗生素.滥用抗感染药物易产生耐药菌株及真菌二重感染,临床应加强抗感染药物的使用管理.     

TCR Vβ15基因转染外周血单个核细胞体外抗肝癌作用的研究

目的探讨肝癌特异性识别基因TCR Vβ15表达重组体转染外周血单个核细胞后的体外抑瘤作用。方法TCR Vβ15基因表达重组体转染外周血单个核细胞(PBMC),激光共聚焦显微镜观察TCR Vβ15表达情况。淋巴细胞和肿瘤细胞共培养后倒置显微镜观察淋巴细胞诱导肿瘤细胞死亡的情况,MTT法观察淋巴细胞的杀伤活性。结果TCR Vβ15基因转染后的淋巴细胞与未经处理的淋巴细胞相比跨膜蛋白表达增加。倒置显微镜下可见基因转染组肿瘤细胞皱缩,细胞间隙增加。淋巴细胞杀伤活性明显增高,实验组与对照组相比有显著性差异。结论TCR Vβ15基因转染PBMC细胞后可有效表达并明显杀伤肿瘤细胞,导致肿瘤细胞死亡,为该研究方法临床应用提供了实验依据。