茶黄素-3,3′-双没食子酸酯对人骨肉瘤细胞的抑制作用及转录组学分析

目的 采用转录组学等技术探讨茶黄素-3,3′-双没食子酸酯(theaflavin-3,3′-digallate,TF3)对人骨肉瘤(HOS)细胞的抑制作用及其潜在机制。方法 分别使用不同浓度的TF3和体积分数0.05%的二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)处理HOS细胞后,采用CCK-8(cell counting kit-8)法、结晶紫染色、集落形成实验和流式细胞术来检测TF3对HOS细胞增殖的影响; Hoechst33258染色实验及流式细胞术检测TF3对HOS细胞凋亡的影响;Western blot检测HOS细胞增殖和凋亡相关蛋白的水平;采用转录组测序检测TF3处理组和对照组HOS细胞的差异基因表达情况,并使用生物信息学分析潜在分子机制。根据转录组测序结果,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2),蛋白酪氨酸激酶受体B1(EPHB1)和紧密连接蛋白7(CLDN7) mRNA 的表达。结果 与对照组相比,TF3处理组中HOS细胞的增殖能力明显受到抑制(P＜0.05),同时细胞凋亡率显著增高(P＜0.05),呈浓度依赖性;增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞增殖抗原(Ki67)及抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达量降低,凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的水平下降,凋亡标志蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)和细胞色素C的表达量升高(P＜0.01);HOS细胞转录组测序结果显示,TF3处理组与对照组相比有809个差异表达基因(P-adjust＜0.05),其中596个上调,213个下调;基因本体论 (gene ontology,GO)主要富集于DNA复制的正调控、膜及蛋白结合等功能方面,京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)主要富集于缺氧诱导因子1信号通路、癌症通路及肿瘤坏死因子信号通路等包括凋亡在内与肿瘤相关的信号通路。与对照组相比,TF3处理组的SCG2, EPHB1, 和CLDN7 mRNA 表达水平下调(P＜0.05)。结论 TF3可能通过多靶点调控多种信号通路的活性,从而抑制HOS细胞增殖并促进其凋亡。     

左炔诺孕酮宫内节育器的研制

制备一种每天释放１０μｇ左炔诺孕酮（ＬＮＧ）的宫内节育器（ＩＵＤ）。在硅橡胶制成的控制释药管中填入ＬＮＧ和硫酸钡混合细粉，并与乙烯－醋酸乙烯共聚物（ＥＶＡ）铸成的横臂粘接成钥匙形ＩＵＤ，体外释药速度测量表明本品释放符合零级动力学。测得的标化速度为１．６７μｇ．ｍｍ／ｃｍ＾２．ｄ。其释药速度（ｑ）与药管壁厚度（ｈ）的倒数呈良好线性关系，并表明本品释药过程符合骨架控制释放机理。     

丙型肝炎病毒感染相关自身抗体(抗-GOR)的测定及其临床意义

本文以人工合成肽GOR作为包被抗原建立ELISA法检测患者血清中HCV感染相关自身抗体(抗-GOR)。检测581份各类临床标本,其中急、慢性NANBH的抗-GOR阳性率分别为19.2％和25.7％,而属于甲、乙型急慢性肝炎、SLE等均在10％以下。抗-GOR总检出率低于抗-HCV,但两者间具有互补性,且抗-GOR效价与HCV核心抗体有很好的相关性。以上结果表明:①GOR抗体的出现与HCV感染有关。②同时检测抗-GOR和抗-HCV可提高HCV感染的诊断率。③HCV感染的致病可能是通过HCV核心蛋白和自身蛋白联合触发而诱导机体产生自身抗体即抗-GOR。     

癌细胞膜靶向相变纳米分子探针研制及光声/超声双模态显像与光热治疗乳腺癌

目的 制备一种癌细胞膜包被的相变纳米分子探针,观察其体外光声/超声双模态成像效果,并探讨其靶向同源乳腺癌细胞的能力及光热治疗(PTT)杀伤效果.材料与方法通过化学裂解和反复冻融提取乳腺癌4T1细胞膜(CCM),然后以双乳化法联合膜挤压法制备CCM包被的同时携载全氟戊烷(PFP)和Fe3O4的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PL...     

针灸配合早期康复治疗周围性面瘫67例疗效观察

目的:观察针灸配合早期康复训练的疗效。方法:将就诊患者按就诊先后顺序随机分为针灸组和观察组,针灸组采用常规针灸治疗,观察组采用常规针灸配合早期康复训练。结果:观察组疗效优于针灸组。结论:针灸配合早期康复训练可提高疗效,减少后遗症的产生。     

基于Gabor特征的MRI椎间盘定位与退行性变分级算法研究

提出一种基于Gabor特征的非监督、全自动的椎间盘定位与退行性变分级算法。首先通过对一系列脊柱Gabor特征图像的处理,得到脊柱和椎间盘的边缘信息,并基于脊柱边缘信息提取脊柱区域;然后根据以上信息及椎间盘位置的先验信息,在脊柱区域定位椎间盘;最后根据定位结果和Gabor系数图,结合椭圆拟合的方法,得到髓核和纤维环灰度信息,并根据灰度和几何信息实现分级。通过37个病人MRI数据,验证算法的准确率和可行性,其中定位方法的准确率达96.6%,在与已有方法准确率相当的情况下降低了算法复杂度,并将定位精度提高至1.46 mm,而分级算法可以实现前5级的退行性变评定。     

腹腔镜胆囊切除术前肠道清洁的比较研究

目的探讨腹腔镜胆囊切除术前不行肠道清洁准备的可行性。方法选择腹腔镜胆囊切除术患者80例,随机分为观察组42例与对照组38例。对照组术前常规服用50％硫酸镁50ml和温开水1000ml,观察组,术前不行肠道准备。比较两组患者术中肠胀气情况、手术时间、术后肠功能恢复时间、术后24h恶心呕吐的发生率。结果80例患者均安全接受手术,术中未发生结肠负损伤或因肠胀气延误手术的情况;两组患者平均手术时间、术后肠功能恢复时间和术后24h恶心呕吐的发生率差异均无统计学意义。结论腹腔镜胆囊切除术前不行肠道清洁准备是可行的,且可避免饮用导泻药及大量饮水导致的腹胀、恶心呕吐等不良反应。     

心肌梗死前后联合运动对大鼠心梗微血管密度和血管内皮细胞生长因子及其受体通路的影响

目的 观察心肌梗死（心梗）前、心梗后及心梗前后联合运动对大鼠心肌梗死后晚期微血管密度的影响,并检测不同运动方案对左室血管内皮细胞生长因子 (VEGF)及其受体mRNA和蛋白表达的调控效应。 方法 采用随机数字表法将96只雄性SD大鼠分为假手术不运动组（Sed-Sh组）、假手术前运动组（PreE-Sh组）、心梗不运动组（Sed-MI组）、心梗前运动组（PreE-MI组）、心梗后运动组（PostE-MI组）及心梗前后联合运动组（ComE-MI组）,每组16只。在正式实验前,各运动组大鼠先在跑台上进行适应性训练,然后给予跑台训练,每天60 min,每周训练5 d,共训练5周;而不运动组大鼠整个实验过程中均不进行运动训练。在第5周最后1次训练结束24 h后,所有大鼠均进行急性心肌梗死手术或假手术。经休息康复4周后,PostE-MI组及ComE-MI组进行5 d适应性训练,随后进行8周跑台运动,每天60 min,每周训练5 d。于实验结束时处死所有大鼠,应用Ⅷ-related Antigen染色进行左室梗死区和非梗死区毛细血管密度测定;采用实时PCR方法检测VEGF及其受体mRNA表达;采用免疫印迹法检测VEGF及其受体蛋白表达。 结果 与Sed-Sh组比较,PreE-Sh组微血管密度有增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);与Sed-MI组比较,PostE-MI组和ComE-MI组微血管密度均明显增加（P<0.05）,PreE-MI组大鼠微血管密度有增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。另外PostE-MI组微血管密度显著高于PreE-MI组(P<0.05),而ComE-MI组微血管密度显著高于PostE-MI组(P<0.05)。与Sed-MI组比较,PostE-MI组和ComE-MI组大鼠心脏VEGF及其受体mRNA表达均明显增强(P<0.05),但PostE-MI组与ComE-MI组大鼠组间差异无统计学意义(P>0.05)。与Sed-MI组比较,PostE-MI组和ComE-MI组大鼠心脏VEGF及其受体蛋白表达均明显增强(P<0.05),但PostE-MI组与ComE-MI组大鼠组间差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 心梗前运动对于心梗晚期微血管密度无显著影响,而心梗后运动及联合运动能增加心脏微血管密度,改善心梗后左室功能。心梗后运动及联合运动能上调VEGF及其受体表达,激活VEGF信号通路,使微血管密度增加,这可能有益于心肌梗死后左室重构及左室功能改善。