TRAIL基因与顺铂协同诱导横纹肌肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因(TRAIL)和顺铂联合应用对人RD胚胎型横纹肌肉瘤细胞的生长抑制和凋亡的诱导作用。方法 将重组腺病毒载体(Ad)介导的TRAIL基因作用于人RD胚胎型横纹肌肉瘤细胞，通过电镜、MTT比色法、RT-PCR及流式细胞仪方法，观察和分析其对RD胚胎型横纹肌肉瘤细胞作用的效果，并与联合应用顺铂的效果进行对比，分析其作用机制。结果MTY法显示顺铂浓度为1．0μg／ml、5．0μg／ml和10．0μg／ml对RD细胞生长的抑制率分别为9．8％、23．4％和43．8％；按MOI值1000转染腺病毒Ad／GT-TRAIL对RD细胞生长的抑制率为41．2％，再联合Ad/PGK-GV16后，生长抑制率上升到52．5％；Ad／GT-TRAIL联合Ad／PGK-GV16再加用顺铂后的生长抑制率为72．7％。顺铂作用3d后的凋亡率为7．41％；Ad／GT-TRAIL联合Ad／PGK-GV16作用3d后的凋亡率为12．95％；Ad／GT-TRAIL联合Ad／PGK-GV16再加用顺铂作用3d后的凋亡率为23．24％，而1640对照组的凋亡率为2．19％。顺铂作用后，细胞的cFLIP mRNA表达下调，与细胞凋亡增加的改变相一致。结论 Ad／GT-TRAIL能有效诱导横纹肌肉瘤细胞的凋亡，从而抑制横纹肌肉瘤细胞的生长，联合应用顺铂后能显著提高疗效。     

创伤性枢椎滑脱的手术治疗

目的探讨创伤性枢椎滑脱的稳定性判断标准、手术适应证、内固定方式选择等.方法对25例来自不同医院具有影像学资料的住院病例临床分析.稳定性判断根据Fransic标准和Coric标准.分类标准参照Levine-Edwards方案.手术方法以前路C2-3椎间植骨融合内固定为主.结果不稳定16例,稳定9例.Ⅰ型4例,Ⅱ型19例(占76%),Ⅱa2例,无Ⅲ型.14例CT检查中,对称性骨折4例;不对称性骨折10例,占71%.保守治疗12例,其中不稳定型8例,稳定型4例.手术治疗13例,Ⅰ型2例,Ⅱ型9例,Ⅱa型2例,其中不稳定型8例,稳定型5例.骨折均在3个月内愈合.结论TSA各家稳定性评判标准未必可靠,仍应结合动力X线片和牵引动态X线片观察结果.大多数病例只需保守治疗,手术指征应严格掌握.对Ⅱ型经保守治疗无效病例应手术.手术前、后入路各有其适应症.     

顺铂联合蛋白酶体抑制剂杀伤骨肉瘤细胞的研究

目的:观察顺铂和蛋白酶体抑制剂对骨肉瘤细胞的杀伤作用.方法:用四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率,电镜观察细胞凋亡形态,流式细胞仪分析凋亡率,逆转录聚合酶链反应检测切除修复基因-1(ERCC-1)的转录水平.结果:骨肉瘤细胞存活率蛋白酶体抑制剂与顺铂联合作用比单独顺铂作用低,细胞显示出更特征性的凋亡形态,凋亡率高从(14.37±2.37)%上升到(50.93±4.84)%(P<0.01).顺铂单独作用能增加ERCC-1的转录水平,顺铂和蛋白酶体抑制剂联合作用后ERCC-1转录水平有所下降.结论:蛋白酶体抑制剂能增强顺铂杀伤骨肉瘤细胞和诱导骨肉瘤细胞的凋亡.这可能与降低ERCC-1转录有关.     

桡骨下端骨巨细胞瘤的手术治疗(附22例报告)

本文报道1957年以来收治的22例桡骨下端巨细胞瘤.属Ⅰ_A、Ⅰ_B期的19例均作肿瘤段切除.15例作腓骨上端半关节移植(其中13例不带血管移植、2例为带血管移植??;自体胫骨近侧骨块移植腕关节融合2例;自体及异体胫骨块移植腕关节成形各1例.属ⅡB者3例作了截肢.本组平均随访15.2年,仅1例有局部复发,均未见肺部转移病灶,腕关节功能优良.作者认为属ⅠA、ⅠB及ⅡA期的桡骨下端巨细胞瘤宜选用肿瘤段大块切除及腓骨半关节移植,这样既可避免肿瘤复发,又可恢复腕关节功能.     

手骨巨细胞修复性肉芽肿一例报告

手骨巨细胞修复性肉芽肿一例报告周方，杨迪生，许存森巨细胞修复性肉芽肿（ｇｉａｎｔｃｅｌｌｒｅｐｅｒａｔｉｖｅｇｒａｎｕ－ｌｏｍａ）又称巨细胞反应，常发生于颌骨，其次是颅面骨，而发生在手、足小骨却很罕见。１９６２年Ａｃｋｅｒｍｅｎ和ｓｐｉｕｔ首次报告２...     

苏拉明联合顺铂杀伤人骨肉瘤细胞MG-63的实验研究

目的探讨苏拉明单独及联合顺铂杀伤人骨肉瘤细胞MG-63的作用。方法采用四甲基偶氮唑盐细胞毒性试验检测苏拉明单独及联合顺铂作用48h后对骨肉瘤细胞MG-63的杀伤作用，并观察苏拉明单独作用48h后细胞形态变化。结果苏拉明单独作用能够抑制骨肉瘤细胞MG-63的增殖并且呈剂量依赖性，其中100、200、400μg/ml苏拉明作用后细胞毒性指数（CI）分别为11．21％、28．95％、30．44％，与对照浓度比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）；100、200μg／ml的苏拉明作用48h后能够使MG-63细胞发生明显的形态学变化，细胞周缘伸出较多细长突起，细胞密度减低。苏拉明与1．25、2．50ttg／ml的顺铂联合作用后存在交互作用（P〈0．05），1．25、2．50μg/ml顺铂作用后CI为13．59％、16．18％，顺铂1．25μg／ml＋苏拉明100μg/ml、顺铂1．25μg／ml＋苏拉明200μg／ml作用后CI为25．90％、34．89％，顺铂2．50μg／ml＋苏拉明100μg／ml、顺铂2．50μg／ml＋苏拉明200μg／ml作用后CI为39．94％、43．65％。结论苏拉明可以单独用于骨肉瘤治疗，且可增强顺铂对骨肉瘤细胞MG-63的杀伤作用。     

腺病毒介导反义c-myc联合咖啡因在骨肉瘤化疗中增效作用的实验研究

目的： 构建重组反义c-myc腺病毒并探讨其与咖啡因对人骨肉瘤MG-63细胞顺铂化疗的影响。方法: 应用基因重组技术，将约750 bp的人c-myc cDNA反向克隆到腺病毒载体，构建表达反义c-myc的重组腺病毒（Ad-Asc-myc），与咖啡因、顺铂单独或联合体外作用于人骨肉瘤MG-63细胞，采用蛋白免疫印迹（Western blotting）、MTT、流式细胞仪（FCM）、透射电镜等检测c-Myc蛋白、bcl-2、bax、E₂F-1等基因表达、瘤细胞体外增殖抑制、凋亡及细胞周期，分析Ad-Asc-Myc、咖啡因对人骨肉瘤MG-63细胞顺铂化疗的影响。结果: 成功构建Ad-Asc-myc，滴度可达2×10¹²pfu/L，体外转染MG-63细胞48 h后，可降低c-Myc蛋白表达，并抑制其体外增殖；Ad-Asc-myc、2.0 mol/L咖啡因分别与浓度为2.0、5.0 mg/L顺铂共同作用后 ，可增加顺铂对MG-63细胞的体外增殖抑制率；Ad-Asc-myc联合2.0 mol/L咖啡因能明显加强顺铂的体外抗肿瘤作用，凋亡相关基因bcl-2基因表达下降，bax表达上升，而E2F-1表达无明显变化；FCM检测显示Ad-Asc-myc的转染可诱导骨肉瘤细胞凋亡，并增加顺铂诱导瘤细胞凋亡作用；单独咖啡因不能诱导瘤细胞凋亡，但能增加顺铂诱导瘤细胞凋亡作用；Ad-Asc-myc联合2.0 mol/L咖啡因能明显加强顺铂诱导瘤细胞凋亡作用。细胞周期分析显示顺铂作用后瘤细胞出现S期阻滞，而咖啡因则能逆转这种阻滞；Ad-Asc-myc转染的骨肉瘤细胞出现G₂/M期阻滞。结论: 腺病毒介导反义c-myc联合咖啡因能明显增强顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞的诱导凋亡及化疗作用。     

二氧化锆梯度复合羟基磷灰石生物陶瓷的制备及其体外免疫相容性

制备二氧化锆（ZrO2）梯度复合羟基磷灰石（HAP）生物陶瓷材料、ZrO2单纯复合HAP陶瓷材料及两种材料浸提液。检测梯度复合材料的截断面特征；在有及无植物血凝素（PHA）的情况下，检测材料浸提液对健康青年人末梢血单个核细胞（PBMC）的活化。结果表明：PHA作用72h，梯度复合组PBMC的增殖作用高于单纯复合组（P〈0．05）；两材料对PBMC的凋亡无差异（P〉0．05）；PHA作用24h，两材料对CD3／CD69表达率上差异均有统计意义（P〈0．01）。ZrO2梯度复合HAP生物陶瓷材料对PBMC的激活程度较轻，梯度复合技术有助于提高ZrO2-HAP生物陶瓷的免疫相容性。     

骨与软组织肿瘤的治疗 (一)外科治疗

一、肉瘤手术治疗进展概况 骨与软组织肉瘤外科手术治疗在过去的三十多年中取得了较大的进展。20世纪70年代，大剂量化疗使保肢手术成为可能，而截肢并非骨肉瘤的必然选择。到了80年代，磁共振技术的发展为骨与软组织肉瘤提供了精确的扫描，为丰富肢体重建的外科技术作出了重大贡献。骨肿瘤最初的重建基于成熟的外科关节置换技术，