呼吸道病毒和非典型病原体与下呼吸道感染的相关性研究

目的探讨成人下呼吸道感染患者中常见呼吸道病毒和非典型病原体的感染状况。方法采集2006年1月-2009年4月195例下呼吸道感染患者的支气管肺泡灌洗液(BALF),采用多重PCR技术检测常见的7种(11个亚型)呼吸道病毒和肺炎支原体(LP)、肺炎衣原体(CP)、嗜肺军团菌(LP)。其中62例同时采集BALF、鼻咽拭子(NpS)和血清三种标本进行病原体检测。结果 195例BALF 65例阳性,患者阳性率33.3%(65/195),共检出72种(株)病原体,病原体阳性率36.9%(72/195),14种(型)病原体检出9种(型),以流感病毒A型(F luA)和鼻病毒(RhV)检出率为高,副流感病毒2型(PIV2)、副流感病毒4型(PIV4)、人类偏肺病毒(hMPV)、人类博卡病毒(HboV)和嗜肺军团菌(LP)未检出。患者以社区获得性肺炎(CAP)和慢性阻塞性肺病急性发作期(AECOPD)阳性率高。62例同时三种标本检测阳性率NpS为50.0%(31/62)、BALF 38.7%(24/62)、血清32.3%(20/62)。结论深圳地区成人下呼吸道感染中病毒感染具有较高比例,以F luA和RhV为主。BALF和NpS非典型病原体检出率较低,所有标本均未检测出hMPV、HboV和LP。     

呼吸道病毒与成人下呼吸道感染相关性探讨

目的:探讨成人下呼吸道感染患者病毒感染状况.方法:采集健康体检者106例(对照组)和1年期内下呼吸道感染住院患者208例(观察组)鼻咽拭子,采用多重PCR技术检测常见的7种(11个亚型)呼吸道病毒.结果:对照组106例中4例阳性.其中流感病毒A型3例,鼻病毒1例.观察组208例患者中88例检出107株病毒,患者阳性率42.3%.病毒株检出率51.4%.检出病毒以流感病毒A型、鼻病毒、副流感病毒1型为高,三者占检出病毒株的81.3%(87/107),人偏肺病毒和人博卡病毒未见阳性.13例患者同时检出2种以上病毒:1例同时检出5种病毒,3例同时检出3种病毒,9例同时检出2种病毒.病毒感染者中临床诊断社区获得性肺炎占34.8%(39/112),急性支气管炎47.5%(19/40),慢性阻塞性肺病急性加重55.0%(22/40),支气管扩张50.0%(8/16).病毒尤其是流感病毒A型、副流感病毒1型感染时间分布以一季度为高.结论:深圳地区成人下呼吸道感染患者中病毒感染具有较高比例,以流感病毒A型、鼻病毒、副流感病毒1型为主,且具有一定比例的2种以上病毒混合感染率.     

死精症患者精液细菌学分析

目的 了解致精子死亡的原因及死精症惠者的致病菌分布及药敏情况，为死精症息者的治疗提供科学指导。方法 采用细菌分离培养、药敏纸片抑菌实验进行精液细菌学分析与药敏试验。用细菌培养液做抑制精子动力实验，及应用凝胶分子筛层析技术分离抑制精子活性的大分子物质。结果 100例死精症患者精液标本中分离出12种细菌83株，其中G^＋菌6株，占7．2％；G-菌77株占92，8％，以大肠杆菌、嗜水气单胞菌、催产克雷伯氏菌为主要优势菌；对所选6种抗菌素纸片的药敏试验，以环丙沙星、丁胺卡那霉素抑茼非常显著，头孢三嗪和泰能也有较好的抑菌抑菌作用；凝胶分子筛层析分离结果表明，抑制精子的活性物质为细菌分泌的蛋白质。结论 对死精症的诊治过程中，细菌分离培养非常必要，合理应用抗菌素，以有效的治疗死精症。     

成人急性下呼吸道感染患者病毒病原学研究

目的了解成人下呼吸道感染住院患者呼吸道病毒病原学构成。方法深圳福田医院2007年10月至2008年10月临床诊断为社区获得性肺炎(CAP)、急性支气管炎(AB)、慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)的住院患者为观察组,采集鼻咽拭子,采用多重PCR技术检测常见的7种(11个亚型)呼吸道病毒。同时采用间接免疫荧光法检测多种病毒血清特异性IgM抗体。同期健康体检者106例作为对照组。结果对照组106例仅4例阳性。观察组192例患者鼻咽拭子中80例检出99株病毒,患者阳性率41.6%,病毒检出率51.5%。检出病毒以流感病毒A型(FluA)、鼻病毒(RhV)、副流感病毒1型(PIV1)为主,三者占检出病毒株的81.8%(81/99)。血清学检测发现61例73种(型)病毒阳性,患者阳性率31.7%,病毒阳性率38.0%,以FluA、PIV1和呼吸道合胞病毒(RSV)检出为主。两种标本综合结果 192例患者中共91例110株(型)阳性,患者阳性率47.3%,病毒阳性率57.2%。结论成人下呼吸道感染患者中病毒感染具有较高比例,以FluA、RhV、PIV1为主。     

幽门螺杆菌抗体谱检测及对其致消化道疾病诊治的意义

目的了解幽门螺杆菌（H．priori，Hp）的抗原表型特征，并评价Hp抗原表型分型对临床诊治意义。方法以确诊感染Hp的132例胃肠疾病患者和20例无症状体检者作为研究对象。用免疫印迹法检测Hp抗体谱，分析相应的Hp细胞毒素相关蛋白（CagA）、空泡毒素（Vac A）、尿素酶（Urease）、鞭毛蛋白（Flagellin）及外膜蛋白（OMP）表达情况。结果HpⅠ型的感染率PU组（88．89％）、CC组（93．33％）明显高于健康体检组（35％）和CG组（51．85％）（P〈0．005）。小分子量OMP的检出率CC组（100．00％）和CG组（60．49％）明显高于健康体检组（25％）和PU组（33．33％）（P〈0．05）。结论HpⅠ型菌株比Ⅱ型菌株致病力强更有可能增加胃癌发生风险，小分子量OMP可以作为胃癌厦胃癌高发人群筛选的一种标志抗原；免疫印迹法是一种特异、敏感、可靠的确诊Hp感染的方法，值得推广应用。     

MRFQ SYBR Green I-PCR结合融解曲线快速检测产ESBLs菌耐药基因

目的 探讨SYBRGreenⅠ实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析方法快速检测常见超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药基因的可行性。方法选取经测序验证携带有tern、shy、ctx—m-1组、ctx-m-9组耐药基因的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作为阳性菌株,建立细菌耐药基因SYBRGreen1实时荧光定量多重PCR检测体系,这四种耐药基因的扩增产物片段长度和融解温度（Tm值）都不同,可通过结合融解曲线分析加以区别。用此体系检测110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌,根据特异性Tm值的有无和差别判断是否携带有耐药基因及携带耐药基因型别。结果与耐药表型、琼脂糖电泳、测序结果对照。结果经SYBRGreenⅠ实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析,分别有47株（42．7％）大肠埃希菌和34株（36．2％）肺炎克雷伯菌携带有这四种常见的ESBLs耐药基因,与表型确证实验和电泳结果比较达到100％的一致性;根据Tm值的不同,对耐药基因进行鉴别,携带单个耐药基因菌株的检测与电泳结果和测序结果比较达到100％的一致性;对携带多个耐药基因菌株的检测不能达到较好的分辨性。结论SYBRGreenI实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析方法可以快速筛查常见超广谱β-内酰胺酶（EsBI曲耐药基因,对携带单个耐药基因的细菌的基因型能进行准确鉴定。这对指导临床医生合理使用抗生素进行临床治疗和对耐药细菌的流行病学监测具有重要价值。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型分析

目的分析肺炎克雷伯菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)的主要基因型。方法用表型确定的临床分离产ESBL s的肺炎克雷伯菌34株,分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果PCR扩增结果显示TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M 9的阳性率分别为47.06%,85.29%,26.47%,32.35%和52.94%,CTX-M型总阳性率为88.24%,序列分析证实扩增为目的产物。结论34株ESBL s肺炎克雷伯菌的主要基因型是CTX-M型和SHV型,且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的82.35%,需引起临床的高度重视。     

脑钠肽前体及氨基末端脑钠肽前体基因的克隆与表达

目的在大肠杆菌中表达脑钠肽前体(proBNP)及氨基末端前体蛋白(NT-proBNP)。方法采用分子生物学技术构建重组质粒PGEX-20T-proBNP和PGEX-20T-NT-proBNP,分别对其进行PCR、双酶切和测序鉴定,然后将已测序鉴定的包含两种重组质粒的工程菌,转化至大肠杆菌BL21菌中表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,并用Western-blot鉴定纯化的重组蛋白。结果在大肠杆菌中成功的表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,两种蛋白均以可溶性形式表达,更有利于保存其生物学活性。结论两种蛋白的成功表达将有利于后续的单抗制备及检测试剂盒的开发奠定基础。     

迈瑞系列血细胞分析仪检测指标可靠性评价分析

<正>为了解国产迈瑞(MINDRAY)BC-5500和迈瑞(MIND-RAY)BC-3000两种型号血细胞分析仪的主要性能指标和情况,根据1984年国际血液学标准化委员会(international committee for standardization in haematology,ICSH)公布的关于自     

孕妇早产与病原生物感染的相关性

目的分析梅毒螺旋体（TP）、解脲支原体（UU）、沙眼衣原体（CT）及弓形体（Tox）、风疹病毒（RuV）、巨细胞病毒（CMV）、单纯疱疹病毒（HSV）（合称TORCH）系列病原生物感染与早产的相关性. 方法对315例早产妇女和100例正常育龄而无自然流产史妇女,采用酶联免疫法 （ELISA）进行梅毒螺旋体和TORCH系列病原体血清IgM抗体检测,同时采用胶体金快速检测法和培养法进行宫颈分泌物CT抗原检测和UU分离. 结果早产组血清TP、Tox、CMV、RuV、HSV IgM阳性率分别是8.57%、16.19%、23.65%、 20.00%、39.05%、对照组阳性率分别是0、2.00%、7.00%、4.00%、9.00%;宫颈分泌物UU、CT抗原检出率早产组分别为37.78%、13.65%,对照组分别为18%、5%,对照组与早产组差异显著（P＜0.05）. 结论 TP、 UU、CT及TORCH系列病原微生物感染是引起孕妇流产的一个不可忽视的重要原因,孕前及孕期进行相关病原微生物检测,对保证胎儿健康出生具有重要的临床意义.