变形链球菌基因转化相关DNA片段的初步研究

目的 :研究与变链菌基因转化相关的cslA基因在临床分离株中的检出情况。方法 :实验菌株源自前期工作所获得的不同黏附力及合成IG能力的变链菌临床分离株 ,提取全菌DNA并鉴定浓度和纯度 ,PCR扩增cslA基因 ,10g/L琼脂糖电泳观察结果。结果 :6 6株变链菌临床分离株中有 5 2株扩增出cslA基因 ,检出率为 79%。cslA基因的检出率在不同黏附力及合成IG能力的菌株间无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :cslA基因在变链菌临床分离株中的分布较广泛 ;尚不能认为cslA基因在毒力不同的菌株间的分布不同。     

不同口腔处理后超声波洁治对诊室环境的影响

近年来,随着超声波洁牙机的逐渐普及和使用,其对诊室环境污染的问题也越来越引起人们的重视。众所周知,超声波洁牙时冷却水喷雾可携带细菌喷出口腔,使诊室的环境受到污染,直接危害患者及医护人员的健康。为寻找减少诊室空气污染的方法,作者将需行超声波洁治的患者在洁治前进行不同的口腔处理,然后用平皿收集喷出的气雾,通过细菌培养以观察不同口腔处理后活牙气雾剂对环境污染的影响。1材料与方法l,l研究对象口腔门诊需行龈上洁治术的牙龈炎、牙周炎患者80人,年龄问～69a,平均32a,性别不限。1‘2材料①超声波洁牙机：法国产Supr…     

FlexMaster镍钛器械根管预备效果研究

目的：评价机用FlexMaster镍钛器械根管预备效果。方法：选择因正畸或牙周病拔除的新鲜单根管离体牙60颗,根管弯曲度20°-40°,随机分成3组（FM组、H组、PF组）,分别使用机用FlexMaster、Hero642、ProFile镍钛器械,冠根向技术预备根管,通过数字牙片、扫描电镜和软件分析方法,观察比较根管拉直程度、安全性能、根尖偏移指数、牙本质小管开口数目、根管壁碎屑、玷污层等情况。结果：3组器械均能较好的维持弯曲根管的原有解剖形态,根管拉直程度差异无显著性。各组的根尖偏移指数均小于0.2 mm,视为无偏移发生,差异无显著性。牙本质小管开口数目在根管中1/3段FM组及H组牙多于PF组,在根管尖1/3段FM组多于H组及PF组,差异有显著性（P〈0.05）。根管中1/3段和根管尖1/3段,FM组和H组根管壁碎屑较PF组少,差异有显著性（P〈0.05）。各组根管壁总体较为清洁,绝大多数牙本质小管开放,仅有少量玷污层,玷污层记分差异无显著性。结论：FlexMaster镍钛系统安全、有效,能较好维持根管的初始形态,具有较好的根管成形能力和清理效果,值得临床推广使用。     

三维培养牙髓间充质细胞外泌体微小RNA表达谱分析

目的分析并比较二维(2D)与三维(3D)培养条件下人牙髓间充质细胞(DPSCs)外泌体(Exo)微小RNA (miRNA)的表达谱。方法2D与3D条件下分别培养DPSCs,提取细胞Exo,采用透射电子显微镜、蛋白质免疫印迹及纳米颗粒追踪分析等方法观察并鉴定;通过高通量测序筛选差异表达miRNA,采用Dr.Tom系统及TargetScan网站进行生物信息学分析及组织再生修复相关靶基因预测。结果 3D培养下收集的DPSC-Exo均呈现"茶托样"双层膜结构,CD63和CD9表达阳性,粒径分布符合外泌体特征,与2D培养的DPSC-Exo一致。高通量测序共计检测外泌体来源miRNA 253个,其中3D组表达222个,特有表达99个;与2D组相比,表达显著差异60个[︱log₂(3D/2D)︱≥1,Qvalue≤0.001]。差异miRNA主要参与的生物学过程与分子功能分别为细胞过程和结合;京都基因与基因组数据库(KEGG)通路富集分析显示在代谢通路有显著富集。miR-302的候选靶基因有成纤维细胞生长因子(FGF) 19和表皮生长因子受体等;miR-24-3p可能靶向神经元...     

OSCE在口腔医学硕士专业学位研究生临床能力考核中的应用

临床能力训练是医学专业学位硕士研究生教育的核心要求,是专业学位硕士研究生培养的关键内容,是与科学学位研究生培养的主要区别[1].临床能力考核是评价专业学位研究生临床能力的重要途径,是评估临床能力训练效果的重要指标.建立切实可行、组织严密的考核体系,是规范和强化医学专业学位硕士研究生临床能力培养和提高临床技能的有效措施[2].本校口腔医学硕士专业学位研究生临床能力考核在2011级及以前是通过轮转过程中的出科考核形式进行评价,出科考核由轮转科室自主举行,由考勤、病例完成情况、临床能力测试及理论知识笔试组成.所有轮转科室出科考核合格后,学生方可参加由重庆医科大学组织的理论知识笔试,最终获得答辩资格.     

变异链球菌临床株乳酸脱氢酶mRNA水平的表达研究

目的 分析来自不同龋敏感人群变异链球菌不同基因型乳酸脱氢酶（LDH）的基因表达差异,探讨mRNA水平上基因表达与蛋白生物学功能及细菌致龋性的关系.方法 应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件分析,分别对20株来自不同基因型的LDH进行基因表达水平差异的评价和比较.结果 两种不同基因型LDH的mRNA表达水平不同（P＜0.05）,表现为低酶活性的B基因型1dh表达高;高龋和无龋菌株1dh表达的差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 变异链球菌乳酸脱氢酶基因表达水平具有遗传异质性,产酸因子1dh基因表达高低与龋病活跃性不呈正相关关系.     

五类市售饮料的酸蚀性研究

目的:通过对碳酸类、果汁类、普通牛奶类、高钙奶类和瓶装矿泉水类等五类市售饮料的pH值、缓冲能力、钙、磷、氟离子等相关因素的测定,预测它们对牙齿的酸蚀能力。方法:选取15种市售饮料,采用精密酸度计测定饮料的pH值,用滴定法测定缓冲能力,用比色法测定钙、磷离子浓度,用电极法测定氟离子浓度。结果:果汁类、普通牛奶类、高钙奶类和瓶装矿泉水类的pH值分别是2.51～2.29、3.24～3.37、6.38～6.64、6.55～6.68和6.49～7.12;缓冲能力分别是1.15～3.15mmol/L(pH5.5)和3.85～5.15mmol/L(pH7.0)、2.10～2.45mmol/L(pH5.5)和2.95～3.15mmol/L(pH7.0)、0.45～0.65mmol/L(pH7.0)、0.35～0.60mmol/L(pH7.0)及<0.10mmol/L(pH10);钙离子浓度分别是0.44～1.61mmol/L、0.17～0.37mmol/L、2.49～3.14mmol/L、2.96～3.31mmol/L和0.01～0.35mmol/L;磷离子浓度分别是0.02～0.61mmol/L、0.53～0.84mmol/L、0.90～1.30mmol/L、0.86～1.34mmol/L和0.01～0.38mmol/L;氟离子浓度分别是0.03～0.05mg/L、0.08～0.12mg/L、0.03～0.05mg/L、0.04～0.05mg/L和0.02～0.06mg/L。碳酸类及果汁类饮料的pH值远低于釉质脱矿临界值5.5,缓冲能力较弱,钙、磷、氟离子的浓度较低。牛奶pH值趋近于中性,缓冲能力强,而且其中含有大量的钙、磷、氟离子。矿泉水pH值为中性,含有一定量的矿物质。结论:酸性饮料的酸蚀性最强,矿泉水次之,牛奶的酸蚀性最弱。     

变形链球菌表面蛋白遗传多态性与龋病发生关系的研究Ⅱ表面蛋白V区、P区编码基因序列的测定

目的 :对不同粘附力变形链球菌临床分离株表面蛋白V区、P区编码基因进行序列测定。方法 :实验菌株选自本实验室前期工作所获得的spaP pv经AluI酶切后呈不同基因型的不同粘附力血清c型变形链球菌临床分离株。提取全菌DNA ,经PCR扩增表面蛋白V区、P区编码基因spaP pv( 2 0 60～ 3 15 7bp)后 ,进行序列测定。结果 :不同粘附力变链菌临床株spaP pv经AluI酶切后呈a、b 2种基因型的菌株测出的spaP pv序列均有 7个AluI酶切位点 5′ AG↓CT 3′。 10株a型菌株序列除了几个碱基点突变外均相同 ,9株b型菌株序列亦如此。a型有 2个DNA片段与b型不同 ,经分析 ,这 2个变异片段均位于V区。结论 :变链菌临床株表面蛋白粘附性能的差异可能是编码基因可变区域V区出现变异所致     

变形链球菌临床株质子移位膜ATP酶γ亚基基因uncG遗传多态性及mRNA表达水平的研究

目的研究变形链球菌临床分离株质子移位膜ATP酶（F- ATPase）的γ亚基基因uncG的遗传多态性和mRNA表达水平。方法选取在不同龋敏感人群中分离的18株高耐酸和20株低耐酸变形链球菌为实验株,扩增uncG基因,行限制性内切酶长度多态性（RFLP）分析和测序比较,应用RT- PCR法和凝胶成像系统定量软件对20株不同基因型和不同耐酸力变形链球菌uncG基因的mRNA表达水平进行评价和比较。结果ALuⅠ- RFLP和BsrⅠ-RFLP产生A、B、C、D 4种基因型,但4种基因型在不同耐酸力菌株的分布差异没有统计学意义（P>0.05）。不同基因型及不同耐酸力菌株uncG的mRNA表达水平不同,但其差异也没有统计学意义（P>0.05）。结论变形链球菌F- ATPase γ亚基基因uncG的RFLP基因型和mRNA表达水平具有明显遗传异质性,但对菌株耐酸力没有明显影响。     

视黄酸信号通路调控咽弓神经嵴影响斑马鱼牙齿发育的研究

目的研究视黄酸（RA）信号通路在斑马鱼颅神经嵴迁移至咽弓神经嵴对牙齿发育的影响。方法将野生型斑马鱼胚胎与转基因斑马鱼胚胎各分为3组,分别采用1×10^-7~6×10^-7 mol·L^-1梯度浓度的RA（RA处理组）、1×10^-7 mol·L^-1的4-二乙氨基苯甲醛（DEAB）（DEAB处理组）、与RA处理组相应浓度的二甲基亚砜（DMSO对照组）处理24 hpf胚胎9 h。制备dlx2a、barx1、dlx2b基因的反义探针,运用整胚原位杂交技术检测野生型斑马鱼48~72 hpf胚胎的dlx2a、dlx2b、barx1基因表达,荧光显微镜观察转基因斑马鱼4 dpf胚胎。结果获得3个基因的反义mRNA探针。与DMSO对照组相比,1×10^-7 mol·L^-1RA处理组barx1、dlx2a在咽弓神经嵴的表达明显增强,并有由咽弓神经嵴向后段咽弓牙齿萌出位点迁移的趋势,绿色荧光向周边咽弓扩散;4×10^-7 mol·L^-1 RA处理组胚胎致畸率和死亡率极高,3×10^-7 mol·L^-1 RA处理组1/3胚胎发育迟缓。DEAB处理组神经嵴发育不良,barx1、dlx2a表达降低,dlx2b在牙齿位点的表达有所延迟。结论 RA能够通过调控咽弓神经嵴发育过程,进而调控牙齿发育前体细胞,最终达到调控牙齿发育的过程。