乙型肝炎病毒对拉米夫啶耐药基因突变的研究

占世界人口5％约3．5亿人为乙型肝炎病毒（HBV）的慢性感染，在东南亚、中国和非洲流行率高达10％。HBV感染会导致严重的肝炎，最终有可能发展为肝硬化和肝癌（PHC）。近年来，乙肝预防和治疗取得了很大进展，目前主要方法：（1）α-干扰素；（2）抗病毒剂（核苷类似物）；（3）免疫调节疗法（包括非HBV特异性的胸腺素、白细胞介素-2、白细胞介素-12、左旋眯唑和HBV特异性的Pres或S多肽疫苗、DNA疫苗、细胞毒性淋巴细胞、抗原决定部位疫苗）。[第一段]     

寡核苷酸芯片技术检测乙肝病毒拉米夫定耐药株的应用研究

目的建立乙肝病毒拉米夫定耐药检测寡核苷酸芯片技术,并对乙肝病毒拉米夫定耐药检测寡核苷酸芯片的临床应用进行了评价。方法通过对388份服用拉米夫定、559份未服用拉米夫定的HBV DNA阳性血清以及359份HBV DNA阴性血清进行耐药突变检测,同时对照进行荧光定量PCR检测和DNA序列测定,对芯片法检测的准确度、实用性进行考评。结果对388份乙型肝炎病毒DNA多聚酶突变标本均能检测到突变;528、552、555位密码子突变检测芯片法与测序法的符合率分别为96.6%,98.5%,100%。559例荧光PCR检测HBV DNA阳性的样品,除3份弱阳性标本外,均为阳性,且能进行乙型肝炎病毒DNA多聚酶拉米夫定耐药相关位点的检测,两者的符合率为99.7%。359份HBsAg阴性标本经芯片法检测,结果为HBV DNA全部阴性。结论乙肝病毒拉米夫定耐药检测寡核苷酸芯片可用于临床检测病人血清中的野生型和拉米夫定耐药突变型病毒株,指导临床用药。     

利用寡核苷酸芯片鉴定多种肠道致病菌方法的建立与初步应用

目前,临床上对腹泻样本的检测主要依靠传统的细菌学培养及生化鉴定,操作方法繁琐,检测周期较长,而利用分子生物学方法如PCR、探针杂交等及免疫学方法也存在特异性差和灵敏度低等问题[1].     

利用寡核苷酸芯片鉴定多种肠道致病菌方法的建立与初步应用

目前,临床上对腹泻样本的检测主要依靠传统的细菌学培养及生化鉴定,操作方法繁琐,检测周期较长,而利用分子生物学方法如PCR、探针杂交等及免疫学方法也存在特异性差和灵敏度低等问题[1].     

利用寡核苷酸芯片鉴定多种肠道致病菌方法的建立与初步应用

目前,临床上对腹泻样本的检测主要依靠传统的细菌学培养及生化鉴定,操作方法繁琐,检测周期较长,而利用分子生物学方法如PCR、探针杂交等及免疫学方法也存在特异性差和灵敏度低等问题[1].     

压力蒸汽灭菌效果检测专用培养基的研究

目的研究压力蒸汽灭菌效果检测专用培养基,并进行质量观察。方法应用热力灭菌专用生物指示剂直接培养法,对所研制的培养基质量进行了观察和分析。结果 1号批次的培养基的质量分值为18.58≥17.995,为合格培养基。而2号和3号批次的培养基的质量分值分别为16.94和17.89,均<17.995,为不合格培养基。结论第1批次压力蒸汽灭菌效果检测专用培养基用于嗜热脂肪杆菌芽孢生物指示剂灭菌后恢复培养质量较好,不同批次培养基培养质量存在差异,可通过计算分值方法进行质量鉴定后再使用。     

复合探针实时荧光PCR检测大肠杆菌O157:H7

目的建立一种快速、准确、特异的肠出血性大肠杆菌O157:H7的定量检测方法。方法以rfbE基因作为待检靶基因,根据复合探针荧光定量分析原理设计检测引物和探针,建立检测大肠杆菌O157:H7的实时荧光定量PCR方法。并对本方法检测的特异性、灵敏度、重复性等进行评价。结果所有O157:H7的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性;该方法检测的灵敏度可达10 cfu.mL-1,定量检测的批间和批内差异均小于5%。在模拟污染牛奶中,可检出1×101cfu.μL-1的细菌。结论本文建立的复合探针实时荧光定量PCR技术能快速准确、特异、敏感地对大肠杆菌O157:H7进行定量分析,为大肠杆菌O157:H7的检测提供了新的方法。