GM-CSF膜修饰B16.F10黑素瘤细胞疫苗对小鼠种植肿瘤的抑制作用

目的: 研究粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granulocytemacrophage colony stimulating factor, GMCSF)膜修饰小鼠黑素瘤B16.F10细胞制备的疫苗对小鼠种植肿瘤的抑制作用。方法：采用生物素链亲合素GMCSF融合蛋白技术制备GMCSF膜修饰B16.F10黑素瘤细胞疫苗,将BALB/c小鼠随机分为GMCSF膜修饰B16.F10细胞疫苗组、GMCSF与B16.F10细胞混合疫苗组、B16.F10细胞疫苗组、GMCSF组、生理盐水组。各组于第1天和第7天分别进行免疫接种,第14天皮下注射0.2 ml B16.F10细胞（1×106个细胞）进行攻击,观察各组小鼠无瘤率和生存期;攻击后24 d 用ELISA法检测小鼠脾细胞INFγ分泌水平。结果：接受B16.F10细胞攻击后第60天和第90天,GMCSF膜修饰B16.F10细胞疫苗组小鼠均未成瘤,存活率为100%;GMCSF与 B16.F10细胞混合组无瘤率分别50%和40%,存活率分别为70%和40%;B16.F10细胞疫苗组无瘤率均为20%,存活率分别为80%和20%;GMCSF组和生理盐水组无瘤率为0,无小鼠存活。GMCSF膜修饰B16.F10细胞疫苗组的IFNγ分泌量比其他组明显升高（P<0.01）。结论：GMCSF膜修饰B16.F10肿瘤细胞疫苗可以激发BALB/c小鼠特异性抗肿瘤免疫反应,有效防止B16.F10肿瘤细胞的攻击。     

老年大鼠不完全性脑缺血小鼠iNOS,nNOS的表达

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（induced nitric oxide synthase,iNOS),神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase,nNOS)对老年大鼠不完全性脑缺血小鼠的影响。方法：建立老年大鼠不完全性脑缺血动物模型,应用免疫组织化学染色方法检测iNOS,nNOS在小脑的表达,用透射电镜观察小脑的超微结构变化。结果：缺血30min后再灌注6,12,24,48h组浦肯野细胞nNOS活性显著升高（P＜0．001）,假手术组,缺血30min立刻取材、缺血30min后灌注1h和96h组nNOS微量表达;而iNOS在小脑皮质不表达,髓质中有少量神经细胞中度表达。电镜下48h和96h组浦肯野细胞损伤较重。结论：由nNOS诱导的一氧化氮（nitric oxide,NO)是脑缺血后神经元迟发性损伤的重要因素之一。     

横纹肌肉瘤和梭形细胞肉瘤的超微结构研究

观察了经电镜和免疫组化证实的１３例横纹肌肉瘤。在电镜下可见４种肿瘤细胞：原始间叶细胞、低分化肌母细胞、中分化肌母细胞和高分化肌母细胞，另外，观察了２８例梭形细胞肉瘤的超微结构，提出了横纹肌肉瘤的超微结构诊断标准。     

丹皮酚明胶微球的制备及质量评价

目的 制备丹皮酚明胶微球并进行药剂学性质考察.方法 以丹皮酚为芯材,明胶为载体,采用交联固化法制备丹皮酚明胶微球;采用正交试验优选制备工艺,并对制得的明胶微球进行体外释药性能考察.结果 影响明胶微球包封率的主要因素为明胶浓度和搅拌速度.制得的明胶微球平均粒径100 μm,载药量和包封率分别为8.49%和86.4%,体外释药试验表明所得微球具有明显的缓释作用.结论 所选工艺可用于制备丹皮酚明胶微球,可为缓释药物传递系统提供参考.     

胶质瘤与锥体束交界区脑白质超微结构定点观察

目的观察胶质瘤瘤周脑白质神经纤维的超微结构，为研究神经纤维束功能保护提供组织学依据。方法对8例功能区胶质瘤，术前行扩散张量成像（DTI），标记锥体束与肿瘤交界区的神经影像兴趣区，利用神经导航系统中扩散张量成像一纤维束示踪（DTI-FT）图像、脑穿刺留置着色明胶海绵矫正脑漂移技术、直接电刺激技术等，定点采集影像兴趣区标本，进行常规透射电镜观察。结果成功定点采集标本13块，术后患者运动功能均保持术前状态或改善。胶质瘤周边脑白质内有髓神经纤维存在三类超微结构改变：单纯髓鞘病理改变、单纯轴索病理改变及髓鞘．轴索共同病变。结论针对术前神经影像兴趣区，定点留取大脑半球内手术病理标本的方法，为研究神经影像信号与手术神经病理间关系提供了重要方法。轴索变性、坏死是肿瘤周边脑白质功能障碍的重要原因，而仅有髓鞘病变的有髓神经纤维是术后神经功能改善的基础。     

青霉素脑皮质局部浸润制作癫大鼠模型的研究

目的研究采用脑皮质局部应用青霉素浸润方法制作癫大鼠模型的可行性。方法取49只大鼠,氯胺酮腹腔注射麻醉后,双侧钻孔暴露顶叶脑皮质;制作青霉素G钠盐生理盐水(青霉素浓度40MU/L),再将棉片浸泡后贴敷在暴露的脑表面。同时在左右两侧钻开的颅骨里放置银制电极,记录皮质脑电图;在大鼠左后肢股四头肌插入肌电记录电极,记录肢体抽搐引起的肌电活动。结果模型制作成功44只(成功率89.7%),脑电图记录到逐渐增多的高波幅慢波,以及阵发性肌电活动的肌电图。结论应用青霉素局部浸润顶叶皮质的方法,可以成功制作癫大鼠模型。     

苯中毒动物模型的建立

目的建立大鼠苯中毒模型。方法苯溶液多点皮下注射。结果模型鼠血液学变化符合人苯中毒国家诊断标准变化趋势。结论该方法建立的大鼠苯中毒模型可用于苯中毒疾病研究。     

肝纤维化形成过程中Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体表达的研究

目的 :探讨Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体 (AngiotensinⅡType1Receptor,AT1R)在人肝脏组织中的表达情况。方法 :运用免疫组织化学SABC法和间接免疫荧光标记法 ,对 12例正常肝组织及 18例纤维化肝组织进行检测。结果 :AT1R阳性表达主要分布在肝小叶周边及肝窦区星形细胞 (HepaticStellateCell,HSC)的胞浆内。 12例正常肝组织中 8例呈阳性表达 ,18例纤维化肝组织均表达AT1R ,且纤维化组阳性细胞数明显多于正常组 (P <0 0 0 1)。结论 :AT1R在肝星形细胞胞浆中的表达随肝纤维化的发展明显增强 ,并且可能在肝纤维化的发生发展中发挥着一定作用。     

血管内皮生长因子受体KDR的靶向制剂的制备

目的：研究从噬菌体肽库中筛选到的与血管内皮生长因子受体Ⅱ(KDR)有特异结合活性的小肽，做为KDR靶向药物的先导物质的应用。方法：从噬菌体肽库中筛选能特异结合KDR的噬菌体克隆，挑选结合力最强的克隆测序并化学合成小肽P5，梯度ELISA、阻断实验和竞争结合实验测定小肽在体外与KDR的结合活性。将P5与生物素(NHS-d-Biotin)、BSA化学偶联，ELISA法和细胞免疫组化实验检测偶联物与KDR的结合活性。结果：化学合成的小肽P5在体外能特异结合KDR，Kd=168．6nmol／L，约是KDR与配体血管内皮生长因子(VEGF165)亲和力的1／30，P5能阻断VEGF165与KDR的结合活性，但不能竞争VEGF165与KDR的结合活性。将P5作为导向物质化学合成的P5-BSA-Biotin，在体外同样具有与KDR和细胞表面KDR分子结合的特性。结论：化学合成的小肽P5有望作为先导分子，在以KDR为靶点的肿瘤靶向治疗中得到应用。