小鼠成纤维细胞激活蛋白多克隆抗体的制备及应用简

目的：表达和纯化小鼠成纤维细胞激活蛋白α（FAPα）二肽基肽酶催化核心序列（FAPαc）融合蛋白（His-FAPαc）,制备兔抗小鼠FAPα多克隆抗体,并用此抗体检测FAPα在肿瘤细胞和成纤维细胞以及肿瘤间质中的表达情况。方法：将本实验室构建好的原核表达质粒pET28a（＋）-FAPαc转化大肠杆菌BL21,IPTG 诱导表达目的蛋白His-FAPαc;用纯化的目的蛋白免疫新西兰大白兔,获得兔抗小鼠FAPα多克隆抗体;用免疫印迹法和酶联免疫吸附试验检测该多克隆抗体与重组蛋白His-FAPαc 的反应性及检测该多克隆抗体的效价,并用该抗体检测FAPα在肿瘤细胞和成纤维细胞以及肿瘤间质中的表达情况。结果：His-FAPαc融合蛋白可与兔抗小鼠FAPα多克隆抗体特异性结合;该多克隆抗体的效价高,特异性好,并且能检测小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryo fibroblast cells,MEF）及结肠癌和乳腺癌的间质细胞高表达FAPα的全长序列蛋白。结论：制备的兔抗小鼠FAPα多克隆抗体能够有效地识别小鼠胚胎成纤维细胞和肿瘤间质细胞表达的FAPα蛋白,为研究FAPα在肿瘤的发生、发展及转移中的作用和以FAPα为靶点而开展的的抗肿瘤研究奠定基础。     

富含T细胞表位的肿瘤成纤维细胞激活蛋白片段克隆表达及纯化

目的:表达并纯化富含T细胞表位的肿瘤成纤维细胞激活蛋白（fibroblast activation protein,FAP）片段。方法:利用T细胞表位预测软件及酶切位点预测软件分析FAP全长,选取FAP蛋白内富含T细胞表位又缺少酶切位点的多肽AA264^AA449（NP₀32012.1）作为目的表达片段。该多肽所对应的核酸片段为mRNA798¹418（GenBank:BC019190.1）。利用PCR技术从含有FAP基因全长的质粒pCDNA3.1-FAP中扩增目的基因mRNA798¹418,并将该基因与原核表达载体pET-28a（+）连接,在BL21工程菌中实现重组蛋白His6-FAP264-449的表达,并利用His标签进行纯化。结果:成功构建了富含T细胞表位的FAP原核表达质粒pET-28a（+）-FAP798-1418,对该质粒进行BamH1/Xho1双酶切鉴定,鉴定结果与预期完全一致;实现了对该质粒编码的融合蛋白His6-FAP264-449的表达,表达后的融合蛋白主要以包涵体的形式存在;利用His标签纯化了该融合蛋白,纯化后灰度分析其纯度达95%。结论:成功表达并纯化了富含细胞表位的FAP片段,为下一步以FAP为靶标的肿瘤免疫治疗策略提供了实验基础。     

内镜下治疗食管、贲门良恶性狭窄53例临床分析

胃食管吻合口狭窄、贲门失迟缓症和腐蚀性食管炎等引起的食管、贲门良性狭窄及中晚期食管、贲门癌等引起的食管、贲门恶性狭窄患者,由于长期进食困难造成体质下降、贫血、电解质紊乱,或肿瘤向周围生长造成食管-气管瘘、食管纵隔瘘等并发症,常常是引起患者死亡的主要原因.征得家属同意后,内镜下治疗食管、贲门良恶性狭窄是操作简单、见效快的一种治疗措施,但也存在不同程度并发症.我院自2000年11月至2005年3月,共收治食管良恶性狭窄患者53例,现将治疗情况分析如下.     

儿童侧脑室脉络丛囊肿6例手术治疗及临床分析

目的：探讨儿童侧脑室脉络丛囊肿的发病机制、临床表现和治疗手段。方法：回顾性分析我科收治的6例儿童侧脑室脉络丛囊肿临床资料。结果：本组6例,年龄5个月-7岁,病程1个月-5年,均经手术和病理证实。6例均采用开颅显微下手术切除囊壁,同时建立侧脑室交通方法,疗效好,术后随访满意。结论：侧脑室脉络丛囊肿属良性先天性神经上皮性囊肿,临床少见,诊断主要根据临床表现、影像学和病理学检查。脉络丛囊肿在成人如无明显症状可随访观察,但对于儿童,主张一旦发现其具有占位效应或明显增大应尽快手术治疗,以防阻碍脑及其功能的发育。     

主动脉夹层83例的早期诊断与治疗

目的探讨主动脉夹层（AD）的早期诊断和治疗。方法分析总结了2002~2010年83例AD患者的临床表现、心电图、X线胸片、超声心动图、CT、核磁共振（MRI）及主动脉照影检查。83例在给予镇静、止痛、降压、控制心率等治疗的基础上,19例行手术治疗,32例行介入治疗。结果 83例确诊病例,24例放弃治疗,死亡8例,19例行主动脉瓣置换术、主动脉弓置换及象鼻手术,32例行覆膜支架封堵术。结论 1）临床症状、体征能初步诊断AD。2）超声心动图对AD诊断可靠,CT、MRI和主动脉造影对AD有确诊作用。3）镇静、止痛,降压是早期治疗AD的最有效的方法。     

以血浆N一末端脑利尿肽(N-BNP)浓度指导心衰治疗

作者假设通过降低收缩期心衰患者血浆N一末端脑利尿肽(N-BNP)浓度达到治疗目的.患者年龄在35～85岁之间,因为失代偿性心衰住院或在专科门诊诊治.均有左室收缩功能受损(UCG测量:LVEF＜40%),诊断症状性心衰(NYHA:Ⅱ～Ⅳ级),采用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI),袢利尿剂伴或不伴地高辛.全部患者在心脏专科门诊每3个月检查一次进行追踪.在初步评估后,患者被随机分为由血浆N-BNP(NBP组)或标准临床方法指导治疗(临床组).原发临床终点为总心血管事件(心血管死亡加因任何心血管事件住院-心衰、急性冠脉综合症、心脑血管意外/暂时缺血发作、周围血管事件、心律失常、晕厥-加任何需要增加治疗的门诊失代偿心衰).继发终点为血浆N-BNP,左室功能、活动能力和生活质量.采用统计学软件,由ANOVA重复测量(SPSS).p＜0.05有意义.     

以血浆N-末端脑利尿肽(N-BNP)浓度指导心衰治疗

作者假设通过降低收缩期心衰患者血浆 N-末端脑利尿肽(N- BNP)浓度达到治疗目的。患者年龄在 35～ 85岁之间 ,因为失代偿性心衰住院或在专科门诊诊治。均有左室收缩功能受损(UCG测量 :L VEF<40 % ) ,诊断症状性心衰 (NYHA: ～ 级 ) ,采用血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI) ,袢利尿剂伴或不伴地高辛。全部患者在心脏专科门诊每 3个月检查一次进行追踪。在初步评估后 ,患者被随机分为由血浆 N- BNP(NBP组 )或标准临床方法指导治疗 (临床组 )。原发临床终点为总心血管事件 (心血管死亡加因任何心血管事件住院——心衰、急性冠脉综合症…     

基质细胞衍生因子的构效关系研究进展

基质细胞衍生因子1(stromalcell鄄derivedfactor鄄1,SDF鄄1)及其受体CXCR4广泛表达于多种组织、器官、系统,在人和动物的生理和病理过程中起着重要的作用。弄清SDF鄄1的结构与效应的关系是阐明诸多生理和病理过程分子机制的关键,在此基础上进行药物设计和优化并应用于临床。本文就SDF鄄1的一级结构和高级结构与功能的关系、SDF鄄1与多糖的相互作用、SDF鄄1与CXCR4相互作用机制等方面的最新研究进展作一概述。     

静脉输注胺碘酮引致剧烈腹痛1例

1病例报告患者女,70岁。因心悸1个月,伴头晕,乏力,偶有下肢浮肿于2011—07—17 09:15急诊就医。血压130/78mmHg、心率126/min、头颈部正常。双肺呼吸音清,房颤心律,未闻及杂音。腹部软。下肢胫前轻度凹陷性浮肿。心电图示心房纤颤、ST-T轻度缺血性改变。超声心动图:左房40mm、EF52%。给予静脉注射毛花苷C0.2mg加入生理盐水20ml,静脉输注;生理盐水250ml加     

中药治疗输卵管阻塞不孕16例

<正>凡婚后未避孕,有正常性生活,同居2年而未妊娠者为不孕症。我们用中药灌肠液联合杨氏消炎止痛贴外敷治疗输卵管阻塞不孕16例疗效满意,现报道如下。1临床资料16例均排除男方不孕因素,均无盆腔结核病史,皆为盆腔炎症导致输卵管阻塞而致不孕。年龄23～25岁1例,25～30岁12例,30～35岁2例。结婚2年未孕4例,5年未孕10例。曾有过妊娠而后未避