菟丝子对人精子顶体和超微结构氧化损伤的干预作用

目的:观察菟丝子对活性氧所致人精子顶体和超微结构过氧化损伤的干预作用,探讨菟丝子治疗男性不育弱精子症的作用机制。方法:采用Percoll梯度离心法选择具有正常生理功能的精子作为正常精子模型,应用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(HX-XO)体系产生活性氧(ROS),在有氧环境下,ROS、不同含量的菟丝子与精子共同孵育后,计算精子顶体完整率,透射电镜观察精子顶体和超微结构,并与已知的抗氧化剂V itC对照。结果:终含量0.125g/mL和0.5g/mL的菟丝子对精子顶体和超微结构的保护作用与维生素C(终含量0.25mg/mL)无明显差别(均P>0.001),终含量0.25g/mL的菟丝子的作用明显优于维生素C(P<0.001)。结论:适宜含量的菟丝子对ROS造成的精子膜、顶体结构和精子线粒体功能损伤具有明显的干预作用。     

RNA干扰对雄激素合成关键酶17α-羟化酶/17，20裂解酶作用

目的：探讨细胞色素P45017α-羟化酶/17，20裂解酶（CYP17）小干扰RNA（siRNA）对CYP17基因表达和多囊卵巢综合征（PCOS）卵泡膜细胞雄激素合成的抑制效果。方法：合成4条靶向CYP17基因的特异性siRNA和非特异性siRNA。将0．4μg携带报告基因增强型绿色荧光蛋白和CYP17基因的质粒和siRNA共转染入HeIJa细胞，荧光显微镜观察及流式细胞术检测绿色荧光蛋白的表达反映对CYP17表达的影响，筛选抑制效果最佳的siRNA。卵泡膜细胞取自PCOS患者和非PCOS妇女各5例，将筛选出的最佳CYP17siRNA以最佳浓度转染人卵泡膜细胞，荧光定量实时逆转录多聚酶链反应检测CYP17mRNA的表达，并且检测培养液中CYP17作用产物雄烯二酮和前体孕酮水平。结果：siRNA1221处理后。HeLa细胞中外源性CYP17的表达显著降低，抑制率达50％,卵泡膜细胞中CYP17mRNA水平和雄烯二酮产生降低．但与对照组比较，统计学上无显著差异。结论：RNA干扰技术可能提供一种PCOS高雄激素基因治疗的新方法。     

反复控制性卵巢刺激对卵巢功能状态的影响

 【目的】评价在辅助生育技术治疗中反复控制性卵巢刺激对卵巢功能的影响。【方法】 回顾性分析1994年3月至2005年5月就诊于本中心接受IVF治疗行控制性卵巢刺激（COH）≥4个治疗周期的127例患者的病历资料（共508个周期），比较多次COH后基础激素水平的变化，以及不同治疗周期患者的取卵数和促性腺激素（Gn）的使用剂量，统计学方法采用t检验和重复测量资料的方差分析，P<0.05被认为有统计学意义。【结果】随着COH治疗周期数的增加，患者的年龄逐渐增加，比较各周期患者月经第3天FSH、LH、PRL、E2 、T的基础值，各激素水平之间并无统计学意义 (P=0.25~0.93)。与首次接受促超排卵周期相比较，促性腺激素（Gn）的使用剂量在第3、4、5、6、7、8治疗周期显著增加(P=0.0001~0.0084)，但是各周期患者取卵数并无统计学意义(P=0.21~0.61),在对年龄分组后比较各周期Gn的使用剂量也无统计学差异(P=0.12~0.94)。本研究还对一直在本院接受COH治疗≥7个周期的12名例患者进行自身对照的比较，发现随着COH周期数的增加，患者的Gn使用剂量也增加，但控制年龄因素的作用后，Gn的使用剂量则无统计学差异（P=0.13）。【结论】反复的COH治疗不会影响卵巢的储备功能, 接受多个周期COH治疗后的患者Gn使用剂量的增加是由于年龄因素所导致的。     

HPLC测定清热祛湿颗粒剂中蒙花苷的含量

目的 建立清热祛湿颗粒剂有效成分蒙花苷的含量测定方法 .方法 采用高效液相色谱法,以Phenomenex ODS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸(25∶75)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为334 nm.结果 蒙花苷在5.024～100.48 μg/ml范围内线性关系良好,r=0.9999,回收率为98.7%,RSD为1.2%.结论 本方法 简单,快速、重现性好,可用于清热祛湿颗粒剂质量控制.     

脑组织特异表达胆囊收缩素转基因小鼠的建立

目的建立在脑内特异表达胆囊收缩素(CCK)转基因小鼠,研究CCK表达在中枢对饮食行为和代谢的影响。方法构建PDGF-CCK表达载体,利用显微注射法将目的片断注射到受精卵的雄原核中,建立CCK转基因小鼠。通过PCR的方法鉴定转基因鼠的基因型。采用Western Blotting方法鉴定CCK在脑内的表达。用试剂盒测定小鼠血脂并进行统计学分析。结果得到了3个CCK转基因品系,其中2个转基因品系脑内CCK表达量比野生鼠明显增加。高表达CCK的转基因小鼠在正常饲养的情况下体重低于阴性鼠,但血脂未发现显著差异。结论脑内高表达CCK可在一定程度上导致小鼠体重减轻。     

吸痰对支气管肺炎患儿血氧饱和度的影响

支气管肺炎是小儿呼吸内科的常见病和多发病,由于患儿年龄偏小,不能有效咳嗽、清理呼吸道分泌物,导致通、换气功能受影响;而吸痰是清理呼吸道分泌物最有效的方法,可以改善组织缺氧;但该操作刺激性大,为了解吸痰对患儿血氧饱和度的影响,我们对120例患儿进行了临床实验观察,现报道如下.     

胃镜引导下小肠钡灌肠对小肠出血性疾病的诊断

目的 为了缩短小肠钡灌肠术导管置入到住的时间，使之满足于小肠出血部位诊断的临床要求。方法 应用电子胃镜引导插管术，导丝引导导管置入到住；小肠稀钡匀速灌注并摄片。结果 将导管送达十二指肠的时间平均6min。整个造影过程平均耗时仅28min。小肠出血稀钡造影阳性发理率为85．7％(36／42)。结论 小肠钡灌造影对小肠出血部位的诊断率高，在胃镜引导下，使导管置入快速而准确，可在基层医院推广。     

竹隔盐灸联合盆底肌训练在中风后尿失禁中的应用效果

尿失禁是中风患者多发且较为严重的一种并发症,中风恢复早期约38%~60%患者伴有尿失禁,3个月后尿失禁发生率约为25.6%,且男性患者居多[1]。中风后尿失禁患者需接受长期治疗,且易并发尿路感染、肾积水等并发症,对患者生活质量产生严重影响[2]。目前西医治疗效果欠佳,若患者失去劳动能力,不仅会加重患者负性情绪,还会对家庭、社会造成一定的负担。盆底肌训练简单易操作,但见效缓慢,患者易中断或放弃治疗,对疗效产生影响[3]。     

小鼠SIK2重组腺病毒载体在3T3-L1脂肪细胞中的表达

目的利用小鼠盐诱导基因(Salt induced kinase2,SIK2)的重组腺病毒载体,研究脂肪细胞中SIK2的表达。方法重组小鼠SIK2基因腺病毒载体经脂质体转染293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3-L1脂肪细胞,通过real-time PCR及免疫印迹法检测鼠SIK2在3T3-L1脂肪细胞中的表达。结果纯化后的病毒滴度达0.5×1012病毒颗粒/ml。重组腺病毒载体能在成熟3T3-L1脂肪细胞中高表达鼠SIK2 mRNA和SIK2蛋白。结论重组腺病毒载体可介导外源小鼠SIK2基因在脂肪细胞的表达,建立了小鼠SIK2高表达脂肪细胞模型,为进一步研究SIK2的脂代谢功能奠定了基础。     

吸痰和雾化吸入对毛细支气管炎患儿潮气呼吸功能的影响

毛细支气管炎是近年来北方冬季婴幼儿最常见的下呼吸道感染,多发于2岁以下婴儿,80％以上病例在1岁以内^[1],流行面广,发病率高。其临床症状如肺炎,但喘憋更为突出。除常规治疗外,止喘雾化吸入对缓解喘憋症状及预防哮喘发生有效。本文通过测定毛细支气管炎患儿潮气呼吸功能来分析通气功能状况的改变以了解吸痰和雾化吸入后的效果。