GENSCREEN~ULTRA HIV抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒的敏感性评价

目的评价BIO-RAD公司开发研制的人类免疫缺陷病毒(HIV1+2)抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒(GENSCREEN~ ULTRA HIVAg-Ab),对不同来源样本检测的敏感性。方法以法国生物梅里埃公司生产的HIV1+2抗原/抗体ELISA检测试剂为参比试剂,分别使用评价试剂和参比试剂检测621例样本,分析两种试剂检测HIV抗原/抗体的敏感性。结果评价试剂和参比试剂检测502份HIV感染者/AIDS患者临床血浆标本均为阳性,符合率为100%,敏感性为100%。评价试剂和参比试剂检测92份HIV分离培养上清液,评价试剂检出89份阳性、参比试剂检出31份阳性,表明评价试剂检测HIV-1p24抗原的敏感性高于参比试剂。另外,又检测了27份HIV抗原系列稀释样本,计算出评价试剂检测HIV抗原的敏感性是参比试剂的4～8倍。结论评价试剂检测HIV抗体的效果与参比试剂相同,检测HIV-1p24抗原的敏感性高于参比试剂。     

5株不同亚型HIV-1毒株gp120序列特征分析及其蛋白的表达

目的 分析我国HIV-1主要亚型毒株的gp120区域的序列特征,并表达出gp120糖基化蛋白,为研究gp120的致病机制和设计疫苗奠定基础.方法 利用巢式PCR从来自于不同省份的5名HIV-1感染者外周血单个核细胞DNA中扩增全长gp120基因并测序,对序列特征进行分析,并将获得的gp120基因克隆入真核表达载体,体外表达获得gp120糖基化蛋白.结果 序列分析显示,此5条gp120序列分属HIV-1 Thai-B、BC重组和AE重组哑型,虽然亚型不同,但这些gp120序列在相同的位置都存在着一些保守的糖基化位点,且都具备相同的Furin蛋白酶第一切割位点,与参考序列比较发现,不同的HIV亚型序列中,除V3序列长度较为保守外,V1、V2、V4、V5各区域都有不同程度的缺失现象,与BC重组和AE重组亚型相比,Thai-B亚型V3的顶端环呈现出多种组合.最终将这5条gpl20序列都克隆人真核表达载体并表达出糖基化的gp120蛋白.结论 在设计疫苗和检测试剂时应考虑到膜区的高变性,gp120糖蛋白的体外表达有利于进一步开展针对我国主要HIV流行毒株膜蛋白致病机制和疫苗学的研究.     

我国部分地区HIV-1流行毒株亚型分布及gag基因变异特征研究

目的：分析我国4个地区的人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）主要流行毒株的亚型分布,以及在宿主免疫压力下的基因变异和抗原表位的变化情况,初步探讨这些地区HIV-1gag基因的分子进化特征。方法：从来自河南、广东、四川、北京的HIV-1感染者血浆样本中提取基因组RNA,经逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增部分gag基因,用扩增产物直接进行测序;使用Genotyping Tool软件进行亚型分析,使用MEGA4.1软件绘制系统进化树;用Distance工具计算各个亚型序列的基因离散率;用SNAP程序分析同义替换率与非同义替换率的比值（Ks/Ka）,并对各亚型中我国人群中较常见的HLA-Ⅰ型限制的CTL抗原表位的突变情况进行分析。结果：这些地区HIV-1主要流行毒株gag基因亚型主要是B′、CRF07_BC、CRF01_AE、B、CRF08_BC和CRF02_AG。各亚型内的基因离散率不同,由大到小排列为CRF01_AE〉B〉CRF08_BC〉CRF07_BC〉B′,Ks/Ka为CRF01_AE〉B〉CRF08_BC〉B′〉CRF07_BC。p17区段的CTL抗原表位变异远大于p24区段。各个亚型共享序列中存在的突变位点由多到少排列为CRFOI_AE〉B〉B＇〉CRF07-BC。结论：我国HIV-1流行毒株的gag基因序列中，CRF01-AE亚型受到的选择压力最大，基因离散率也最大，且CTL抗原表位的变异亦最大，其次是B和B’亚型，CRF07-BC亚型变异最小。各亚型间CTL抗原表位变异的差异明显。     

北京市部分艾滋病患者的耐药性分析及对抗病毒治疗效果的影响

目的了解北京市部分艾滋病患者抗病毒治疗后耐药发生情况及其对抗病毒治疗效果的影响。方法以北京市部分未经抗病毒治疗的艾滋病患者（17人）以及经抗病毒治疗的患者（51人）为研究对象，通过问卷调查了解一般情况、服药方案、服药依从性及抗病毒治疗前后的临床表现等。同时采集10ml EDTA抗凝静脉血，检测CD4／CD8细胞数、病毒载量及基因型耐药性。结果未服药患者耐药性突变位点主要有118位密码子；服药患者耐药性突变位点和突变的频次显著增加，发生率大于10％的突变位点有103位、118位、151位、181位、184位和190位密码子，并发现TAM突变（M41L、K70R）和Q151复合体突变（A62V、V751、F77L、F116Y和Q151M）。病毒耐药谱表现为出现对非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI）类药物（DLV、EFV和NVP）和核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI）类药物（AZT、DDI、IMT、OOC）具有高度耐药性的毒株，及对NRTI和蛋白酶抑制剂（PI）具有中度和低度耐药性的毒株。未服药人群的耐药性毒株的流行率为6．7％，服药患者为45．0％，交叉耐药和多重耐药严重。抗病毒治疗后没有发生耐药患者病毒载量对数的平均值为1．9 log（拷贝／m1），明显低于耐药组病人的3．8 log（拷贝／m1）。结论北京市部分HIV感染者耐药性毒株的流行已经达到较高的水平，并且多重耐药严重。耐药发生后影响治疗效果，规范治疗及提高服药依从性是治疗取得良好效果的重要因素。     

全军艾滋病检测技术培训班在京举行

为了学习贯彻落实对艾滋病检测工作的新要求、提高部队艾滋病检测技术、规范化管理及职业安全防护水平 ,补充部队艾滋病检测技术力量 ,总后卫生部委托全军艾滋病检测中心于 2 0 0 4年 5月 11～13日在北京举办全军艾滋病检测技术培训班。来自各大军区医院检验科、输血科、防疫队艾滋病检测实验室的 72名学员参加了培训。总后卫生部防疫局李鲁滨副局长、马纯钢助理、军事医学科学院科技部王玉民副部长、军事医学科学院微生物与流行病研究所王晴宇副所长等领导参加了开幕式。李鲁滨副局长做了重要讲话 ,介绍了我国目前艾滋病流行的严峻形势和国…     

广西壮族自治区133例艾滋病患者抗病毒治疗效果评价

目的了解广西壮族自治区部分艾滋病感染者抗病毒治疗后免疫功能恢复与病毒抑制效果。方法2004年7月至2005年10月在广西南宁与柳州地区招募接受抗病毒治疗时间＞3个月的艾滋病患者133例,并在同一地区选择感染时间接近、尚未接受抗病毒治疗感染者58例作为对照。通过专业问卷,了解抗病毒治疗患者服药依从性;采集患者的EDTA抗凝静脉血,通过CD4~+ T淋巴细胞计数与病毒载量测定,了解免疫重建与病毒抑制情况;通过基因型耐药性检测分析抗病毒治疗人群与未治疗人群中HIV-1耐药性毒株的发生情况。结果在接受抗病毒治疗人群中,约有70．69%患者的CD4~+ T淋巴细胞明显回升,23．28%患者CD4~+ T细胞未有明显变化,6．03%的患者CD4 T细胞计数明显下降;比较治疗与未治疗人群病毒载量水平,接受治疗人群载量对数均值(1．834±0．853)显著低于未治疗人群(3．621±1．121)(P＜0．05),治疗人群中67．91%的患者病毒载量水平低于检测限;治疗人群中耐药性发生率(11．90%)与未治疗组(11．63%)无明显差异。结论广西地区实施的抗病毒治疗对免疫系统重建、体内病毒的抑制具有明显作用;耐药性流行情况在治疗与未治疗人群中无明显差异。     

综合性医院检出HIV感染者的就诊科室分布及疾病构成分析

目的 了解综合性医院检出HIV感染者的就诊科室分布及主要就诊疾病,为改进HIV检测策略提供依据.方法 用统一的方法在全国137所二级以上综合性医院收集2017年1月1日至2018年6月30日的HIV检测数据,摘录确诊HIV抗体阳性人员的就诊科室、临床表现、疾病诊断等信息,根据"疾病分类与代码(GB/T 14396-20...     

虚拟表型方法在HIV-1耐药检测中的应用

艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)耐药性检测,已成为抗病毒治疗中进行合理用药的重要依据。基因型和表型耐药检测是最常用的HIV耐药检测方法,这两种方法的局限性在于:基因型方法不能直接提供药物耐受信息,表型方法比较耗时。根据上述两种方法之间的良好相关性提出的虚拟表型耐药检测方法,尽管也存在不足,但是提供了另外一种方便的得到耐药信息的方法,从而更好地指导抗病毒治疗。     

河南某农村艾滋病患者劣势耐药毒株的进化及原发耐药研究

目的 了解河南省部分艾滋病患者抗病毒治疗效果及耐药发生情况,分析劣势耐药毒株在该人群本底存在情况.方法 以河南某农村149名初始接受抗病毒治疗的艾滋病患者为研究埘象,采用自建(In-house)基因型耐药检测方法分析抗病毒治疗失败患者HIV-1耐药发生情况,对抗病毒治疗后产生耐药的病例采用等位基因特异性实时定量PCR(allele-specific real-time PCR,ASPCR)方法检测其抗病毒治疗前样本劣势耐药毒株存在情况.结果 抗病毒治疗后患者的HIV-1病毒载量显著下降(t=275,P＝0.0001),但CD4+T淋巴细胞绝对数无明显变化(t＝1.765 168,P=0.0852).抗病毒治疗失败患者中耐药的发生率为4.88%,ASPCR检测发现,在调查基线时,7例耐药患者伞部存在劣势M184V突变,5例存在劣势K103N突变.结论 河南省部分未治疗的艾滋病患者存在HIV-1原发性耐药毒株,劣势耐药突变可能发展为优势耐药毒株并影响抗病毒治疗的效果.

Abstract：

Objective To evaluate the antiretroviral therapy(ART),analyze the prevalence of resistance in rural areas,Henan,and explore the presence of minor resistant variants in pre-ART.Methods One hundred and forty-nine AIDS patients initiating ART were recruited and investigated at intervals of 6 months. Method of In-house developed by our laboratory for genotypjc resistance test was to analyze the occurrence of resistance among the failure of ART,and the allele-specific real.time PCR(ASPCR)was used to detect the minor resistant variants at the baseline samples once the resistance occurred.Results Vimlload significantly decreased among the patients who received ART(t=275,P=0.0001),but the absolute counts of CD4+T lymphocytes had no significant change(t=1.765 168,P=0.0852).Rate of resistance among the patients of treatment failure was 4.88%.The result of ASPCR in the survey of baseline showed that the minor resistant variants of M184V were detected in 7 patients and mutation K103N presented in 5 patients.Conclusion The primary drug-resistant straias in the untreated patients were found in Henan,and they might develop the dominant resistance strains and bring about the failure of ART.     

S/D法对人凝血因子Ⅷ产品中人免疫缺陷病毒灭活效果的研究

目的研究S/D法对人凝血因子Ⅷ中污染的人免疫缺陷病毒灭活效果。方法采用细胞培养法,对S/D处理人凝血因子Ⅷ灭活HIV的效果进行了检测。结果在常温(25℃)条件下,在污染有HIV的人凝血因子Ⅷ种混入体积分数9%S/D灭活剂,作用60 min,HIV灭活对数值为6.83。重复处理3批人凝血因子Ⅷ制品,对HIV均达到完全灭活,经细胞培养盲传三代,均未出现细胞病变。结论 S/D法能够完全灭活人凝血因子Ⅷ产品中污染的人免疫缺陷病毒,灭活效果可靠。