香港海鸥形菌分型方法建立与病原学分布调查

目的通过对深圳市感染性腹泻患者标本与外环境水产品标本的检测,掌握深圳市香港海鸥形菌病原学特征及分子分型。方法用传统方法和荧光PCR法同时检测香港海鸥形菌,阳性菌株用K-B法做药敏试验和PFGE分子分型。结果在329份淡水鱼中共检出7份阳性标本,579份腹泻病人标本未检出。该菌对临床常用的24种抗生素耐药性检测结果显示,对氨苄西林、头孢他啶、头孢噻吩、头孢噻腭、头孢哌酮、头孢曲松耐药,头孢西丁为中介,其余均为敏感。7株香港海鸥形菌生化反应阳性的,荧光PCR结果均为阳性。PFGE分子分型表明7株菌不具有同源性。结论本文建立一套完整的对该菌的分离鉴定、基因诊断和PFGE分子分型方法;了解深圳地区主要流行菌型,预测深圳地区该菌的流行趋势,为应对食源性疾病突发事件和水产品安全问题做好技术储备。     

深圳市感染性腹泻监测信息管理系统评估

目的评估深圳市感染性腹泻监测信息管理系统运行状况,以提高监测工作质量。方法参照国际疾病监测系统评估方法,依据深圳市感染性腹泻病原谱哨点监测工作方案要求,通过现场考察、问卷调查等方法,对该市11家哨点医院、6个区疾病预防控制中心和市疾病预防控制中心工作情况及该系统使用情况开展调查。结果本次评估共调查该信息管理系统相关操作人员40人,男性14人（35％）,女性26人（65％）,其中疾病预防控制机构22人,医疗机构18人,被调查人群在性别、年龄、学历上差异均无统计学意义;在可操作性方面,大部分人认为系统容易使用,界面美观舒适,用语浅显易懂,能很快学会;47．5％的人认为登录速度还不够理想。在简便性方面,大部分人认为该系统对日常工作影响较小,病例定义容易判断、细菌和病毒纳入标准较容易判断,病例排除标准容易判断;41．0％的人认为系统要求的样本数量难以达到。在及时性方面,对患者样本的采集和检测基本能在患者发病3d内完成,但对患者信息的录入时间不一致;在数据可靠性方面,大部分人认为录入数据真实可信,结果真实可信,愿意使用该系统进行统计分析,统计功能能够达到需求,有32．5％的人认为不能很好地了解本监测点的情况。在目的可达性方面,大部分人认为能够了解感染性腹泻的病原谱构成,对暴发疫情起到早期预警的作用,能够引导对重点地区和人群的主动监测,能为微生物风险评估提供疾病监测的本底数据。结论深圳市感染性腹泻监测信息管理系统运转良好,但仍存在部分问题,个别监测目标目前仍难以实现,有待进一步完善。     

伤寒沙门菌PFGE分子分型及耐药性研究

目的对深圳市2004-2011年伤寒沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型及耐药性分析,为临床用药和追踪传染源提供依据。方法采用K-B法对42株伤寒沙门菌进行20种抗菌药物敏感性测试,并用PFGE对其进行分子分型。结果 42株伤寒沙门菌株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、甲氧苄啶、氯霉素和四环素17种药物的敏感率均超过90%,对萘啶酸耐药率最高达61.5%。42株伤寒沙门菌株可分为SZ0001-SZ0028共28个PFGE型别,其中流行优势型为SZ0023型别。结论结合药物敏感试验结果和PFGE分子分型结果可以判断伤寒疫情的优势株型。     

新生儿重症监护病房医院感染肺炎克雷伯菌耐药性与同源性分析

目的：对新生儿重症监护病房（NICU）医院感染病例的临床及环境采样标本进行病原学分离培养和鉴定,测定菌株对常用抗菌药物的耐药性及其同源性,为控制肺炎克雷伯菌院内感染暴发流行提供科学依据。方法：临床及环境采集标本中分离的7株肺炎克雷伯菌,采用VITEK2COMPACT全自动微生物分析系统进行耐药性测定,并进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）基因分型,明确其同源性。结果：除7号菌株外,另6株肺炎克雷伯菌均为多重耐药菌,且PFGE分析具有同源性。结论：NICU病房临床分离的7株肺炎克雷伯菌中有6株具有同源性,证实是一次院内感染暴发流行,环境污染和接触传播是造成此次感染的主要途径。因此采取及时有效的消毒隔离措施,对控制医院感染暴发流行具有重要意义。     

1例罕见的新生儿B群流脑死亡病例的实验室结果分析

目的 明确诊断并分析l例新生儿疑似流行性脑膜炎死亡病例可能的传染来源和传播途径.方法 收集死亡病例的血液标本及其密切接触者的咽试子标本并进行菌株的分离培养和分型及药敏试验.结果 死亡病例的血标本及其密切接触者患儿父亲咽试子标本均分离到B群脑膜炎奈瑟菌菌株,2株菌株对氨苄西林、环丙沙星、利福平、氯霉素、头孢噻吩、红霉素及四环素均敏感,对磺胺类药耐药.结论 根据该病例的特点和实验室检测结果,判断该病例为B群脑膜炎奈瑟菌引起的死亡病例.     

深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型

目的分析深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的主要基因型。方法对50株产ESBLs大肠埃希菌分别用TEM、SHV、CTX-M和OXA-1群基因引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果 92%菌株检出CTX-M型ESBLs,测序结果显示,以CTX-M-14型ESBLs为主,其次为CTX-M-55型。结论 CTX-M-14型和CTX-M-55型是深圳地区大肠埃希菌ESBLs的主要基因型。     

深圳市7家医院常见病原菌耐药性分析

目的了解深圳市区级、街道人民医院常见病原菌的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对深圳市7家区级、街道二级甲等医院2009年1～9月分离的1765株病原菌进行药敏试验,用WHONET5.5软件对数据进行统计分析。结果大肠埃希菌对广谱青霉素、头孢呋辛、复方新诺明的耐药率均〉60%,肺炎克雷伯菌对广谱青霉素、第一和第二代头孢菌素的耐药率〉40%,两种菌对碳青酶烯类的敏感率为95%～100%,对氨基糖苷类阿米卡星敏感率达90%～95%,产ESBLs率分别为44.6%和29.0%。铜绿假单胞菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、第一和第二代头孢菌素的耐药率〉90%,对氨基糖苷类阿米卡星的敏感率为91.4%,对碳青酶烯类和氟喹诺酮类药物敏感率为70%～80%。未发现耐万古霉素的葡萄球菌。结论深圳市区级、街道人民医院常见病原菌对抗菌药物的耐药性普遍存在,应长期开展对病原菌的耐药性监测。     

一起蜡样芽孢杆菌10型引起食物中毒的快速诊断与分子分型研究

目的对引起一起食物中毒的蜡样芽孢杆菌进行快速诊断和分子分型。方法对中毒人员的呕吐物、肛拭子、可疑食品等样品用国标方法进行实验室检测,同时采用自主建立的荧光PCR方法进行快速检测。所分离的菌株PCR扩增vrrA基因多态性位点,产物进行基因双向测序和比较分析。结果在10份呕吐物、肛拭子、可疑食品中用传统方法和荧光PCR方法同时检出8份蜡样芽孢杆菌阳性,生物分型为10型。PCR测序结果显示它们有99%的同源性。结论这是一起食用了由蜡样芽孢杆菌10型污染的食品引起的呕吐型食物中毒,用蜡样芽孢杆菌呕吐毒素基因cesB为检测靶标的荧光PCR方法可以快速灵敏地对此类食物中毒进行初步诊断。以vrrA基因为多态性位点的PCR基因测序方法可用于蜡样芽孢杆菌的分子分型和食品污染源的准确追踪。     

深圳市部分医院洁净手术室综合性能监测及管理对策

目的 为了解深圳市部分医院洁净手术室的洁净效果,以便强化管理和保障洁净效率.方法 采用现场检测方法,对6所综合医院新建和改建的45间洁净手术室及其23间辅助用房洁净效果进行了调查.结果 所检测的洁净手术室主要控制参数沉降菌浓度、尘埃粒子数合格率分别为100%,97.8%,静压差和相对湿度合格率偏低,仅为68.9%和66.7%;洁净辅助用房的主要控制参数沉降菌浓度、尘埃粒子数合格率为100%,但静压差和相对湿度合格率也偏低,仅为69.6%和78.3%.结论 深圳市部分新建、改建的洁净手术室主要控制参数沉降菌浓度、尘埃粒子数合格率高,但静压差、相对湿度合格率较低,洁净手术室的硬件建设和管理仍需改进.     

非结核分枝杆菌耐药性特征及聚合酶链式反应检测方法的建立

目的建立一种快速鉴别非结核分枝杆菌的聚合酶链式反应方法,并与直接测序法比较,探讨该方法的可行性。方法根据分枝杆菌16~23srDNA间隔区序列设计引物,建立检测分枝杆菌的PCR分型方法,并利用该技术对5例临床分离株进行PCR扩增,借助凝胶电泳分析和直接测序分析进行临床分离株的分子分型。结果 5例分离株均耐利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、丁胺卡那、环丙沙星、左氧氟沙星、硫异烟胺、力克肺座和比嗪酰胺,为多重耐药菌株。PCR扩增结果和直接测序结果相吻合,均为脓肿分枝杆菌。结论分枝杆菌高度保守的16~23srDNA间隔区序列可做为分枝杆菌鉴定的靶基因,建立快速、特异、敏感的PCR扩增体系,且从基因水平上可对分枝杆菌进行分子分型,为临床治疗提供快速、准确的实验数据。