鼻咽癌组织与正常鼻咽上皮组织的差异磷酸化蛋白质组分析

目的：比较鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)组织与正常鼻咽上皮组织磷酸化蛋白质组差异,筛选差异磷酸化蛋白质,为揭示NPC的发病机制提供依据。方法：采用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离NPC组织与正常鼻咽上皮组织的总蛋白质,蛋白质转膜后与抗酪氨酸磷酸化抗体进行Western印迹分析,图像分析识别差异磷酸化蛋白质点,电喷雾-四极杆-串联质谱（ESI-Q-TOF MS/MS）鉴定差异的酪氨酸磷酸化蛋白质,采用NetPhos软件预测蛋白质的酪氨酸磷酸化位点,并采用生物信息学方法对差异磷酸化蛋白质的功能和亚细胞定位进行分析。采用Western印迹检测差异蛋白质（phosphatidylethanolamine- binding protein 1）在正常鼻咽黏膜组织和鼻咽癌组织的总蛋白质中的磷酸化水平。结果：建立了NPC组织与正常鼻咽上皮组织的酪氨酸磷酸化蛋白质表达谱,识别了25个差异酪氨酸磷酸化蛋白质,共鉴定了13个差异酪氨酸磷酸化蛋白质,其中7个蛋白质的酪氨酸磷酸化水平在NPC组织中增强,而6个蛋白质的酪氨酸磷酸化水平降低。NetPhos软件预测和生物信息学分析结果显示,13个差异蛋白质均存在酪氨酸磷酸化位点,其功能涉及物质代谢、细胞结构、细胞防御以及信号转导。与正常鼻咽黏膜组织相比较,差异蛋白phosphatidylethanolamine-binding protein 1在鼻咽癌组织中磷酸化表达水平下调。结论： 鉴定了13个可能与NPC发病相关的酪氨酸磷酸化蛋白质,为揭示NPC发病机制提供了科学论依据。     

应用激光捕获显微切割和蛋白质组学技术筛选鼻咽癌的差异表达蛋白质

目的:筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的差异表达蛋白质,为寻找NPC的分子标志物提供科学依据. 方法:采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngeal epithelial tissue,NNET)中纯化NPC细胞和正常鼻咽上皮细胞(normal nasopharyngeal epithelial cells,NNEC),应用二维凝胶电泳(2-DE)分离LCM 纯化细胞的蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾电离串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点,Western 印迹和组织芯片(tissue microarray,TMA)免疫组织化学验证差异蛋白鳞状细胞癌抗原1(SCCA1)在两种组织中的表达水平.结果:建立了LCM 纯化的NPC细胞和NNEC的2-DE图谱,质谱鉴定了36个差异蛋白质,其中20个蛋白只在NPC表达或表达上调,16个蛋白在NPC中表达下调或缺失. Western 印迹和组织芯片免疫组织化学结果显示:SCCA1在NPC中的表达水平较NNET明显下调,与比较蛋白质组学结果一致.结论:36个差异蛋白可能与NPC的发病有关,为筛选NPC分子标志物奠定了基础.     

急性肾功能衰竭家兔肾皮质局部血流量与球结膜微循环变化的研究

目的探讨急性肾功能衰竭(ARF)兔球结膜微循环(BCM)与肾皮质局部血流量(rRBF)变化的关系.方法用50%的甘油10ml/kg行兔后肢肌肉加压注射,建立ARF模型,观察不同时相BCM、rRBF、肾功能(血Cr、BUN)以及肾组织形态学的改变.结果ARF组肾组织出现严重损害,肾功能明显下降,BCM功能障碍,rRBF明显下降.BCM总积分与rRBF呈明显负相关(P均<0.05）。结论1、甘油所致ARF家兔BCM形态、流态、管周状态积分及总积分明显升高；rRBF降低；肾组织出现严重损害。2、肾局部微循环障碍可能是造成rRBF下降和肾组织形态学损害的直接原因之一。     

大面积烧伤合并吸入性损伤82例治疗体会

目的探讨大面积烧伤合并吸入性损伤的治疗经验与失败教训。方法统计我院1993年至2003年收治的82例大面积烧伤合并吸人性损伤病例，并进行分类，对其死因及治疗效果进行分析。结果本组82例中，治愈53例，治愈率64．6％；死亡14例，病死率17．1％；自动出院15例，占18．3％。结论小儿吸入性损伤病死率不高于成人。由于发育小儿呼吸功能较成人差、气管、支气管较成人狭窄，尤其吸入性损伤早期局部渗出、水肿，很容易造成呼吸道梗阻死亡。特别注意的是，对严重吸人性损伤患者，即使气管切开通气，在脱落和修复期仍容易发生呼吸道梗阻。抓好预防措施，可提高此类病人治愈率。     

两种不同方法矫治内眦赘皮患者疗效比较

目的：分析比较L形水平移位内眦赘皮矫正术与V-Y内眦赘皮矫正术对内眦赘皮患者的疗效。方法：选取2020年1月-2021年6月于笔者医院接受治疗的105例内眦赘皮患者，依据数字表法随机分为对照组50例、研究组55例，对照组行V-Y内眦赘皮矫正术，研究组行L形水平移位内眦赘皮矫正术。对比两组眼外形变化及美观效果情况，选用瘢痕评价量表（Scar evaluation scale,PSAS）及观测者瘢痕评价量表（Observer scar evaluation scale,OSAS）测定瘢痕评分，观察并记录患者临床疗效、满意度、并发症发生情况。结果：与对照组相比，研究组睑裂水平长度、睑裂垂直高度、睫毛暴露长度、睫毛上翘度均较高，睑裂长度（Layer fracture length,HLFL）水平升高，内眦间距（Inner canthic diameter,ICD）、HLFL/ICD水平均降低，PSAS、OSAS评分均降低，差异有统计学意义（P<0.05）。研究组总有效率（94.55%）高于对照组（80.00%），差异有统计学意义（P<0.05）。对照组并发症总发生率（20.00%）...     

筛选喉癌相关基因LCRG1的有效沉寂序列

目的:拟采用RNA干扰技术筛选有效的针对LCRG1基因的打靶序列.方法:首先采用PCR定点突变技术改造pSuper载体,而后利用该改造后的载体构建针对LCRG1基因的5对打靶序列的真核表达载体.将构建的重组pSuper 362,398,432,789,903表达载体和pSuper空白载体分别转染Hela细胞,经抗性药物筛选获得抗性细胞克隆和池克隆;通过RT-PCR及荧光定量PCR鉴定阳性克隆,进行平板克隆集落形成试验,以检测打靶序列沉寂LCRG1基因mRNA表达水平的效果.结果:应用PCR定点突变技术改造的pSuper载体,可被BglⅡ酶切;利用RT-PCR和荧光定量PCR检测各重组载体转染细胞池克隆LCRG1 mRNA的表达发现,362组,398组,432组的基因均能封闭内源性LCRG1基因表达,尤以362组为显著;鉴定362组筛选的各个抗性克隆,发现A2和A5克隆的LCRG1 mRNA表达水平明显降低.平板克隆实验结果提示362组的A2,A5和池克隆的细胞增殖能力明显强于载体和空白对照组(P<0.05).结论:成功改建了pSuper真核表达载体;362 siRNA相对其他siRNA具有较好的打靶效果,这对于应用RNAi方法研究LCRG1基因的功能和其作用分子机制具有重要的指导意义.     

层级全责护理模式在乳腺癌术后的应用研究

[目的]探讨层级全责护理模式在乳腺癌病人术后护理中的应用效果.[方法]选择 142例乳腺癌病人术后采用层级全责护理模式(观察组)进行护理;142例乳腺癌病人术后采用常规护模式(对照组)进行护理,比较两组病人住院时间、并发症发生率、护理差错发生率、病人满意度.[结果]观察组住院时间、并发症发生率、护理差错发生率明显低于对照组,病人满意度明显高于对照组,比较差异具有统计学意义(P＜0.05).[结论]应用层级全责护理模式对乳腺癌手术病人实施护理,可有效提高病人术后的护理效率和护理质量.     

Raf激酶抑制蛋白对鼻咽癌细胞增殖的影响

目的：探讨Raf激酶抑制蛋白（RKIP）对鼻咽癌细胞增殖的影响。 方法：采用脂质体转染方法将反义RKIP核酸表达质粒pcDNA3.1(-)-asRKIP及空白载体pcDNA3.1(-)分别转染鼻咽癌细胞系6-10B细胞,用Western 印迹检测RKIP表达,建立RKIP表达下调的稳定转染细胞和对照细胞系。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、流式细胞术和软琼脂集落形成实验检测RKIP表达下调对鼻咽癌细胞增殖、细胞周期分布和停泊非依赖性生长的影响。结果：建立了RKIP表达下调的6-10B鼻咽癌细胞系;RKIP表达下调促进6-10B细胞增殖和停泊非依赖性生长,并加速其越过G0/G1期。结论：RKIP具有抑制鼻咽癌细胞增殖和停泊非依赖性生长的作用,可能在鼻咽癌发病中具有重要作用。