扎鲁司特对急性肺损伤防治作用的实验观察

目的　观察扎鲁司特 (zafirlukast)对急性肺损伤的防治作用 .方法　新西兰大白兔 2 4只 ,随机分为对照组 (n=8) ,致伤组 (n=8) ,扎鲁司特治疗组 (n=8) .致伤组经颈静脉注入内毒素 (L PS,1m L· kg- 1 ) ,对照组经颈静脉注入生理盐水 (1ml· kg- 1 ) ,治疗组经颈静脉注入内毒素 (L PS,1m L· kg- 1 )前 1h及 30 min,胃内注入扎鲁司特 (2 0 mg· kg- 1 ) .测定各组肺动脉压、氧分压、外周血白细胞计数、肺泡灌洗液NO浓度、肺系数 (肺湿质量 /体质量 )及肺湿 /干比 ,并取肺活组织行 HE染色 .结果　治疗组肺动脉压及 NO浓度与致伤组无显著差别 (P >0 .0 5 ) ,氧分压较致伤组明显改善 (P <0 .0 1) ,肺系数和肺湿 /干比显著低于致伤组 (P<0 .0 1) ,外周血白细胞高于致伤组 (P<0 .0 1) .病理检查结果显示 ,治疗组肺损伤减轻 .结论　扎鲁司特对急性肺损伤有一定的防治作用     

甲苯二异氰酸酯对小鼠肺内内皮素-1表达的影响

将 30只小鼠均分为 5组 ,实验组分别吸入甲苯二异氰酸酯 ( TDI)每立方米 4.30± 0 .60 mg 1～ 4周 ,采用免疫组织化学方法检测内皮素 - 1 ( ET- 1 )在肺内的表达。结果 :实验组小鼠肺内炎症细胞增多 ,以巨噬细胞和淋巴细胞为主。吸入 TDI 1～ 4周后 ,气道上皮ET- 1表达渐减少 ,血管平滑肌细胞 ET- 1表达渐增多。提示 :TDI可引起小鼠肺内炎症细胞出游 ,降低气道上皮 ET- 1的表达 ,增加血管平滑肌细胞 ET- 1的表达     

TGF-βRⅡ/Fc融合基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

目的 构建TGF-βRⅡ/FC融合基因的真核表达载体pIg-TRⅡ，使其在中国仓鼠肾细胞（CHO）中呈分泌性表达，为肺间质纤维化基因治疗的研究奠定基础。方法 采用RT-PCR方法从正常人肺组织中扩增出目的基因TGF-βRⅡcDNA的胞膜外部分，再将TGF-βRⅡcDNA片段亚克隆到pIg真核表达载体，该载体在其多克隆位点下游含有人IgG1Fc基因组片段，由此可形成TGF-βRⅡ/FC融合基因；采用脂质体转染技术转染CHO细胞使其瞬时表达融合蛋白；应用细胞免疫荧光技术检测融合蛋白的表达；采用免疫沉淀的方法检测CHO细胞培养上清内融合蛋白的表达。结果 DNA测序结果在Blast上作同源性比较证明插入片段就是TGF-βRⅡcDNA的胞膜外部分，细胞免疫荧光染色呈阳性反应，CHO细胞培养上清内检测到融合蛋白的表达。结论 pIg-TRⅡ真核表达载体构建成功，并能够在CHO细胞中分泌性表达有活性的融合蛋白TGF-βRⅡ/FC。     

姜黄素抗人肺腺癌A549/DDP细胞增殖及诱导凋亡的作用

目的 研究姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定细胞对顺铂的敏感性和姜黄素对细胞增殖的抑制作用;倒置相差显微镜和荧光显微镜下观察细胞形态学的变化;应用原位末端标记(TUNEL)染色及流式细胞仪检测细胞凋亡情况;以Western blot分析凋亡相关蛋白表达变化.结果 实验中所用的A549/DDP细胞对顺铂耐药,耐药指数为10.82.姜黄素对A549及A549/DDP细胞增殖均有抑制作用,并且呈时间、浓度依赖性(P＜0.05),对两细胞株的半数抑制浓度分别为16.28/μmol/L和18.06μmol/L,差异无统计学意义(P＞0.05).姜黄素处理A549/DDP细胞后,细胞变形、缩小、脱落.Hoechst染色显示A549/DDP细胞核缩小、变形,致密浓染,荧光成团块分布.TUNEL法以及流式细胞仪分析结果示细胞凋亡率呈明显剂量依赖关系(P＜0.05).Western blot结果显示,随姜黄素浓度的增加,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8(cysteinyl aspartate-specific protease-8,caspase-8)p10蛋白水平增加.结论 A549/DDP细胞对姜黄素无抗药性,姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖具有抑制作用,并能诱导细胞凋亡.caspase-8的活化是其中的机制之一.     

茶碱对支气管哮喘中炎症细胞的调节作用

支气管哮喘（哮喘）是一种由嗜酸粒细胞、肥大细胞和T细胞等多种炎症细胞参与的气道慢性炎症。茶碱是用于哮喘中支气管平滑肌解痉的传统药物,近年研究发现茶碱除了此活性外,还存在广泛的抗炎和免疫调节活性,对参与哮喘发病的多种细胞组分都有调节作用。     

血栓素A2、肿瘤坏死因子和地塞米松对兔气道平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、地塞米松（Ｄｅｘ）对气管平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增生的影响。方法：［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法及细胞计数检测上述因素作用下体外培养ＡＳＭＣ增生过程。结果：ＴＸＡ２可刺激ＡＳＭＣ增生,ＴＮＦ－α能抑制ＴＸＡ２的促增生作用,Ｄｅｘ又可使ＴＮＦ－α的抑增生作用消失。结论：ＴＸＡ２、ＴＮＦ－α在ＡＳＭＣ增生中起重要作用,Ｄｅｘ在治疗哮喘过程中,有可能加重ＡＳＭＣ的增生。     

恶性胸水167例细胞学分析(摘要)

<正> 我院1976年1月至1985年6月,共收治胸腔积液者1251例,经细胞学检查确诊为恶性肿瘤者242例,占同期胸腔积液患者的19.3%,其中资料完整可供临床分析讨论者167例。167例中男性92例,女性75例,男:女=2.24:1。其中年龄最小为6岁,最大81岁。40岁以上者128例占76.7%,说明癌性胸腔积液具有恶性肿瘤的共同规律,即40岁以上者多     

反义c-myc真核表达载体的构建及其对大鼠气道平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:观察反义c-myc真核表达载体对大鼠气道平滑肌细胞增殖的抑制作用。方法:构建反义和正义c-myc真核表达载体pcDNA3-myc-antisense和pcDNA3-myc-sense,利用lipofectin将正义及反义c-myc真核表达载体导入大鼠气道平滑肌细胞,MTT法观察正义和反义c-myc真核表达载体对大鼠气道平滑肌细胞增殖的作用,流式细胞技术检测细胞周期变化,免疫组织化学染色检测c-Myc蛋白的表达。结果:反义c-myc真核表达载体可抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖,延长细胞S期,反义c-myc真核表达载体可降低气道平滑肌细胞c-Myc蛋白的表达。结论:反义c-myc真核表达载体可抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖。     

核因子NF-κB对气道平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究核因子-κB（NF-κB）对大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖活性的影响。方法：体外培养ASMCs，采用EMSA法直接检测ASMC中NF-κB的活性，MTT法、细胞周期检测及细胞核增殖抗原（PCNA）的免疫细胞化学染色法观察细胞增殖情况。结果：血小板活化因子刺激后ASMC中NF-κB明显活化，各细胞增殖指标均显著增高（P〈0．05），NAC可显著抑制上述效应（P〈0．05）。结论：NF-κB的活化能直接参与ASMC的增殖。