5-氮杂脱氧胞苷对肝癌细胞HepG2中抑癌基因FHIT表达的影响

背景与目的：肝癌细胞中由于FHIT基因过度甲基化而导致其表达降低。本实验应用甲基化酶抑制剂5-氮杂脱氧胞苷（5-Aza-2’deoxycytidine,5-Aza—dc）作用肝癌细胞株HepG2。观察用药后肝癌细胞中FHITmRNA和蛋白表达的变化,并观察5-Aza-dC对细胞增殖的影响。方法：以5-Aza—dC作用HepG2细胞．采用甲基化特异性聚合酶链反应（methylation—specific polymerase chain reaction,MSP）检测HepG2细胞中FHIT甲基化变化;采用RT-PCR检测FHITmRNA的表达：采用细胞免疫组织化学染色和Western blot方法检测FHIT蛋白表达,MTT法检测HepG2细胞增殖情况。结果：5-Aza—dC处理前,HepG2细胞FHIT基因呈甲基化状态,mRNA及蛋白表达缺失;经5-Aza—dC作用后,MSP显示HepG2细胞FHIT基因甲基化逆转：经1．0μmol／L、2．0μmol／L及4．0μmol／L的5-Aza—dC作用48h后,FHIT基因mRNA扩增出产物的吸光度值分别为0．80±0．32、1.41±0．54和1．51±0．61。Western blot检测产物积分灰度值分别为0．33±0．20、1．00±0．26和1．12±0．38：当药物浓度达到1．0μmol／L时出现了对HepG2细胞增殖的抑制作用。结论：5-Aza—dC能明显逆转HepG2细胞的FHIT基因异常甲基化,激活因高甲基化所致基因沉默的再转录,诱导该基因的表达;同时抑制细胞增殖。     

淋巴上皮样T细胞淋巴瘤1例

患者男性,66岁。因发热10余天入院。查体:双侧颌下、左颈部、锁骨上淋巴结肿大0.5cm～1.0cm,质中,固定,无压痛。术中见颈部巨大淋巴结,包膜不完整,基底部较深。     

婴幼儿腭裂修复术术中护理配合及体会

目的总结婴幼儿腭裂修复术的手术护理配合体会。方法选取2016年7~12月在本院进行腭裂修复术的80例婴幼儿腭裂患者为研究对象。总结分析婴幼儿腭裂修复术的手术护理配合重点,包括:术前访视,消除对手术的紧张感,做好手术前患者自身准备;术中备好、备全物品,摆放体位,熟悉手术步骤,及时、准确的配合医生操作。结果术前的充分准备、术中准确高效的配合以及术中的精心护理,使腭裂患儿手术顺利完成。结论对腭裂患者实施全面的手术护理和良好的手术配合是确保患儿生命安全和手术成功的关键。     

围生儿死亡108例临床病理分析

目的探讨围生儿的死亡原因及其与胎盘病理改变的关系。方法选择2000年1月～2012年12月北京天坛医院及佑安医院围生期死亡的尸检标本108例作为研究对象,其中包括胎死宫内76例及新生儿死亡32例,分析各器官及胎盘脐带的HE切片,观察胎盘脐带的病理改变。结果先天性宫内缺氧窒息和先天畸形均为胎死宫内及新生儿死亡的主要原因,其中在胎死宫内及新生儿死亡中先天性宫内缺氧窒息分别占63.2%和78.1%,先天畸形分别占36.8%和21.9%。绒毛间质纤维化、细胞滋养细胞明显、干绒毛血管硬化、干绒毛闭塞性动脉内膜炎、绒毛膜羊膜炎及羊膜胎粪污染多见于胎死宫内的胎盘,与新生儿死亡胎盘情况的差异有统计学意义（P〈0.05）;在胎死宫内的胎盘中,绒毛合体细胞结节增多、细胞滋养细胞明显、干绒毛血管硬化及干绒毛闭塞性动脉内膜炎在因宫内缺氧窒息死亡胎盘和因畸形死亡胎盘间,差异有统计学意义（P〈0.05）;绒毛膜羊膜炎多见于因畸形死亡胎盘中,镜下可见到脐血管病变。结论围生儿尸检对于明确死因有重要价值,胎盘脐带的病理检查可为寻找死因提供证据。     

被动吸烟下调大鼠卵巢雌、孕激素及其受体的表达

目的 利用Wistar大鼠烟雾吸入模型,观察被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构的影响,检测生殖激素水平,分析生殖内分泌的变化,为提倡生育期妇女避免被动吸烟提供新的理论依据.方法 建立大鼠烟雾吸入模型.32只健康雌性Wistar大鼠,鼠龄(60±5)d,每只体重200～250 g,随机分为空白对照组和实验组,每组16只.实验组吸烟3个月,对照组正常饲养.3个月后处死两组大鼠.酶联免疫吸附试验方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测雌鼠血清中雌激素(estrogen,E2)、孕激素(progesterone,P4)的水平;常规石蜡切片,免疫组织化学SP法检测各组雌鼠卵巢雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)的表达情况.所得数据采用SPSS软件作统计学处理分析,比较各组间差异程度.结果 ①酶联免疫吸附试验结果:吸烟3个月大鼠血清E2水平比空白对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性;吸烟3个月大鼠血清P4水平比空白对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性.②免疫组织化学结果:ER主要表达在大鼠卵巢组织的各级生长卵泡的颗粒细胞的细胞核内,呈棕黄色颗粒状分布,卵泡膜细胞和间质细胞也有少量表达.吸烟3个月的大鼠卵巢组织中ER的表达显著低于空白对照组.PR主要表达在大鼠卵巢组织卵泡的颗粒细胞的细胞质和细胞核中,呈棕黄色颗粒状分布,吸烟3个月的大鼠卵巢组织中PR的表达显著低于空白对照组.结论 ①成功的建立了大鼠被动吸烟模型.②被动吸烟可使大鼠血清中E2及P4水平明显降低,使大鼠卵巢中ER及PR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的功能,引起生殖内分泌失调.     

5-氮杂脱氧胞苷对非小细胞肺癌细胞A549中抑癌基因FHIT表达的影响

DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式之一,启动子CpG的高甲基化是除突变和缺失外肿瘤中抑癌基因失活的重要机制[1].脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)是第一个将脆性位点和肿瘤联系起来的抑癌基因[2],并且FHIT基因甲基化异常是肿瘤发生和发展过程中的早期事件.去甲基化治疗已成为一种新的抑制细胞增殖和诱导细胞分化的肿瘤治疗方法.5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dC)是一种脱甲基化试剂,实验采用5-Aza-dC处理非小细胞肺癌细胞株A549细胞,观察其FHIT基因甲基化改变及对A549生长的影响.     

乳腺Paget病1例

患者,女,49岁,左侧乳头皲裂4个月。4个月前无意中发现左乳头皲裂,伴有渗出、结痂、局部疼、痒、不适。曾在外院以乳头湿疹治疗,效果不佳。临床检验为:双乳腺对称,皮肤无桔皮样改变,左乳头皲裂。左乳头外上象限近乳晕处可触及约0.8cm×0.8cm×0.8cm大小肿物,质韧、界清,稍活动,轻触痛。同侧腋窝未扪及肿大淋巴结。病理检查:①肉眼观:不规则皮肤组织2cm×1cm×0.5cm,表面细小颗粒状。不规则乳腺组织8cm×6cm×4cm,大部分为脂肪,穿插于灰白色乳腺组织中;②光镜检查:乳头表皮内有散在、成巢或腺样的Paget细胞,该细胞体积大,圆形或椭圆形,境界清…     

MONITOR-J+全自动血沉分析仪与魏氏法测定血沉的比较

目的 评价MONITOR-J 全自动血沉分析仪检测血沉的可靠性.方法 随机抽取门诊患者和健康体检人员共106人,同时用MONITOR-J 全自动血沉分析仪及国际血液学标准委员会(ICSH)推荐的魏氏法测定血沉,对数据进行统计分析及比较.结果 MONITOR-J 全自动血沉分析仪与魏氏法检测血沉的回归方程为Y=0.967 4X 0.688 7,r=0.961,重复性良好.结论 MONITOR-J 全自动血沉分析仪检测ESR与魏氏法比较具有良好的相关性,是一种较好的检测ESR的常规方法.     

干、湿化学法检测血浆乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同功酶的比较

干化学检测心肌酶具有快速、简便的特点,在急诊医学有较好的应用前景.本文分析了干、湿化学法检测心肌酶的差别.