应用酶解-气质联用法测定生物检材中安定的含量

目的　测定生物检材中安定的含量 ,提高安定的提取率。方法　兔肝经糜蛋白酶水解、固相萃取法提取后 ,用气相色谱 质谱联用仪分析安定的含量。结果　酶解后的肝脏中安定的检出量明显增加 ,每克肝酶用量为 10 0 0U时效果最佳。结论　糜蛋白酶的应用提高了生物检材中安定的提取率     

病毒性肝炎并发再生障碍性贫血一例

患者男性、29岁、农民,于1983年12月21日发病,29日在当地医院就诊,检查肝大,SGPT560u,血象正常,诊断急性黄疸型肝炎,给保肝药物治疗。1984年2月12日,发现齿龈渗血,皮肤紫点,次日鼻衄约200毫升,头晕、偶心悸,血色素8.5g,红细胞270万,白细胞4200,血小板9.5万。1984年3月6日以急性黄疸型肝炎和贫血待查入院。患者平素体健,未服过氯霉素和其他特殊服药,无毒物接触史,但有与肝炎患者接触和注射史,否认有肝炎史。体温37℃、血压90/40mm Hg,发育正常、营养中等、急性病容、神志清,皮肤、粘膜苍白、贫血貌,上肢及胸干有散在出血点,不浮肿,全身浅在淋巴     

生物样品组成对氯氮平浓度检测的影响

目的:研究生物样品中盐、酯、蛋白质等成分的变化对固相微萃取-气相色谱质谱法检测氯氮平浓度的影响。方法:用固相微萃取-气相色谱质谱法测定样品中氯氮平(CLP)、洛沙平(内标),通过改变样品基质中氯化钠、醋酸乙酯、血浆的含量,观察盐、酯、蛋白质对CLP检测的影响。结果:随着样品中盐含量升高,CLP、洛沙平峰面积增大,方法灵敏度提高;随着样品中酯类、蛋白质含量升高,CLP、洛沙平峰面积减小,方法灵敏度降低。各组CLP、洛沙平峰面积保持相同的变化趋势,CLP与洛沙平峰面积的比值相对固定。结论:样品中盐、酯、蛋白质等含量的变化对固相微萃取-气相色谱质谱法检测氯氮平的灵敏度有不同程度的影响,但在选取合适内标的情况下并不影响定量分析的准确性。     

建立非均衡竞争叶酸定量测定的化学发光免疫分析法

目的 制备抗人叶酸(FA)抗血清并应用异硫氰酸荧光素(FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立可常规应用的定量检测血清FA的化学发光免疫分析(CLIA)法.方法 FITC-FA类似物、FA抗体-HRP依次加入包被有抗FITC抗体的化学发光板,形成FITC抗体-FITC-FA类似物-FA抗体-HRP的免疫反应复合物;并进行方法学评价,同时与非FITC检测系统及罗氏化学发光免疫分析系统检测结果进行比较.结果 成功制备FA抗血清并建立基于FITC系统的非均衡竞争CLIA;经方法学评价,自研法的线性相关系数绝对值大于0.990 0,灵敏度1.21 nmol/L,线性范围1.21～38.80 nmol/L,批内变异系数小于5％,自研法定量检测性能优于非FITC系统;与罗氏检测系统结果有较好相关性(R=0.908 1).结论 建立的非均衡竞争定量检测血清FA的CLIA法,具有良好的检测灵敏度与特异性,可应用于常规检测.     

固相萃取-气相色谱质谱法测定生物材料中的氯氮平

目的：建立氯氮平的固相萃取．气相色谱质谱(SPE-GC-MS)测定法。方法：血液及肝中的氯氮平用固相萃取柱分离后，以SKF525A为内标，用气相色谱质谱法测定其含量，同时对该法的检测限、线性范围及回收率进行探讨。结果：氯氮平的检测限为0．05ng，线性范围为0．5～100ng，血中平均回收率为90．1％，RSD为8．3％(n=6)。结论：本法检验并测定生物材料中的氯氮平，操作简便，结果准确，重现性好。     

携抗菌肽PR39基因重组腺病毒的构建及抗胞内伤寒菌研究

目的构建抗菌肽PR39基因腺病毒表达载体,观察其在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达及抗菌活性。方法PCR扩增抗菌肽PR39成熟肽基因,插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,经PmeI线性化后与腺病毒骨架(pAdEasy-1)共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组产生重组腺病毒载体(pAd-PR39)。重组腺病毒载体经PacI线性化后转染293细胞,包装出重组腺病毒(Ad-PR39)。利用重组腺病毒感染体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用RT-PCR和免疫细胞化学检测目的基因的表达,并对其抗菌活性进行初步检测。结果先后构建了携抗菌肽PR39基因的穿梭载体和重组病毒载体,包装出重组腺病毒,并成功感染小鼠巨噬细胞RAW264.7。感染重组腺病毒的小鼠巨噬细胞RAW264.7能有效表达抗菌肽PR39。与对照(10.8±2.1CFU/cell)相比,感染重组腺病毒的小鼠巨噬细胞RAW264.7具有更强的杀灭胞内伤寒菌的能力(7.2±1.8CFU/cell)。结论构建的重组腺病毒能够感染小鼠巨噬细胞RAW264.7并发挥抗菌作用,为抗菌肽PR39在胞内菌感染基因治疗中的应用奠定了实验基础。     

Y盒结合蛋白1单克隆抗体的研制、表位测定及其免疫学应用

建立稳定分泌抗人Y盒结合蛋白1单克隆抗体(anti-YB-1 mAb)的杂交瘤细胞株,鉴定其表位与免疫学应用.将重组YB-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合.经ELISA法筛选鉴定、定株后采用腹水诱生法制备anti-YB-1 mAb;Protein G亲和层析法纯化mAb,ELISA法测定mAb效价、亚型及相对亲和力.采用抗原表位预测法鉴定anti-YB-1 mAb识别表位所在区域.Westem blot和免疫组化鉴定mAb识别内源性YB-1的特异性.经筛选鉴定获得2株稳定分泌anti-YB-1 mAb的杂交瘤细胞(1-D9,3-E8);腹水抗体效价均≥1×10-6,亚型均为IgG1;1-D9和3-E8单抗识别表位分别位于(134-160aa)与(266-303aa)肽段.Western blot、免疫组化结果证实anti-YB-1 mAb能特异性识别内源性YB-1.该研究为YB-1免疫学定性、定量检测方法的建立、肿瘤靶向抗体治疗及进一步探讨YB-1的生物学功能奠定了基础.     

排队论模型在军队医院门诊超声科设备配置中的应用

目的探讨排队论模型在军队医院门诊超声科设备配置中的应用效果。方珐运用现场调查法和排队论模型,计算超声科设备工作强度（p）,患者排队等待人数（Lq）,窗口逗留人数（Ls）,平均排队等待时间（Wq）,平均逗留时间（Ws）,设备空闲概率（P0）患者到达必须等待的概率（p）等运行指标,并对应用排队论模型配置设备前后患者及技师进行满意度调查。结果超声科上下午分别配置6台和3台设备较为合理,在应用排队论模型配置设备后,技师和患者的满意度均得到明显提高（P〈0．05）。结论利用排队论的方法可以较好地配置超声科设备,为提高服务效率提供科学参考。．     

生物检材中毒鼠强的检测

目的　研究生物检材中毒鼠强的快速检测方法。方法　气相色谱 /质谱 (GC/MS)联用法选择离子检测 (SIM)。结果　检测生物体内存在的毒鼠强 ,提取回收率为 73 5 % ,RSD为 0 75 %。结论　利用该法可快速检出毒鼠强 ,为临床诊断及刑事案件鉴定提供依据