生育酚结合蛋白基因重组腺相关病毒的制备及抗癌作用

目的 制备生育酚结合蛋白(TAP)重组腺相关病毒,并探讨其对前列腺癌生长的作用.方法 构建重组腺相关病毒质粒pSNAV-TAP-EGFP,酶切、聚合酶链反应(PCR)、测序.225 cm2细胞培养瓶中,接种293T细胞,以重组质粒转染.扩增、纯化病毒,并转染DU-145细胞,噻唑蓝(MTT)比色法观察第2、4、6天的细胞增殖.结果 成功构建pSNAV-TAP-EGFP质粒,并制备滴度6.4×1011vg/ml、纯度95%的rAAV2-TAP.该病毒转染DU-145细胞后TAP表达量明显上升.转染后第4天,TAP转染组的细胞吸光度(A值)0.546±0.072,对照组以及空载体转染组的A值分别为0.673±0.015、0.638±0.051,生长明显受到抑制(P＜0.05).至第6天各组细胞生长差异更显著.结论 成功制备高滴度的rAAV-TAP-EGFP病毒,并可抑制前列腺癌细胞的生长.

Abstract：

Objective To produce recombinant rAAV2 virus carrying α-tocopherol associated protein (TAP) and to observe its effect on prostate cancer cells. Methods The pSNAV-TAP-EGFP plasmid was constructed and digested with restriction enzyme. Polymerase chain reaction (PCR), and sequence analysis were performed to identify the correct recombinant clones. The plasmid was transfected into 293T cells to produce virus. The virus was amplified and purified. DU-145 cells were infected by rAAV-TAPEGFP. Cell growth was detected by MTT assay. Results The pSNAV-TAP-EGFP was constructed successfully. The titer of rAAV2-TAP-virus was 6. 4 × 1011 vg/ml and the purity was 95%. The rAAV-TAP-EGFP was infected into the DU-145 cells with high efficiency. The expression of TAP was increased significantly by real-time PCR. MTT assay showed differences at the 4th day. The cellular absorbance value in the TAP transfection group, control group and empty vector transfection group was 0. 546 +0. 072, O. 673 +0. 015,and 0. 638 + 0. 051 (P ＜ 0. 05 ). The differences became more significant after 6 days. Conclusion High tier recombinant adeno-associated virus rAAV2-TAP-EGFP was obtained, which was able to inhibit the proliferation of prostate cancer cells.     

脉冲震荡肺功能检测技术的临床应用

脉冲振荡法肺功能测定(IOS)是在强迫振荡技术基础上发展起来的一种测定呼吸阻抗的新方法。整个过程是完全无创的测量,患者无痛苦、无禁忌证,适合所有患者,尤其是老人、儿童和重症患者,是肺功能检测技术的新进展。     

肠内营养治疗对机械通气患者的影响

目的：研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者机械通气时营养支持治疗对患者营养状况和免疫功能的影响。方法：30例COPD机械通气患者分为肠内营养治疗组（EN组）和肠外营养治疗组（PN组）,治疗10d,观察治疗前后营养指标及血清免疫指标的变化。结果：两组患者治疗后血清白蛋白、前白蛋白、上臂肌围、肱三头肌皮褶厚度、TLC、CD4、CD4/CD8较治疗前升高（P〈0.05）,其中EN组较PN组明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）,而且EN组缩短机械通气时间,降低ICU住院时间,减少治疗费用。结论：肠内营养和肠外营养均能改善COPD机械通气患者的营养状况及免疫功能,肠内营养在临床疗效上优于肠外营养。     

马智教授从肝论治内科杂病经验撷要

马智教授,从医40余年,学验俱丰。他认为当今社会中情志因素逐渐成为各种内科杂病的常见发病原因或诱因,故在内科杂病治疗中强调从肝论治。肝郁为其根本,故疏肝解郁为治肝的通法,并将其独创的具有疏肝理气作用的解郁汤加减应用于各种内科杂病的治疗中。文章列举了马老用解郁汤加减治疗不寐、胸痹、郁证、胃痛4个典型病例,对临床有重要的指导意义。     

足部护理知识与行为对糖尿病足发病的影响

在我国糖尿病患者中发生糖尿病足的概率高达15%~25%[1,2],糖尿病足并发感染是导致下肢截肢的重要因素。因此,采取积极有效的措施来防止或者延缓糖尿病足的发生,对于糖尿病患者及其家庭具有十分重要的意义。2011年以来,我们通过对糖尿病患者的调查问卷方式,发现足部护理知识与行为与糖尿病足的发病有着密切关系,现报道如下,以期为临床护理工作提供参考。1资料与方法     

锐器保护卡在纸塑包装中的应用

<正>随着医疗事业的迅猛发展,各种各样精密且锐利的器械越来越多,在灭菌储存运输及临床科室存放的过程中,精密器械易被损坏,且锐利部分易刺破包装袋,破坏了无菌物品的无菌状态而影响临床使用。为了保证器械物品的完好性     

多排螺旋CT重建技术在急腹症影像诊断中的价值

目的探讨腹部多排螺旋CT重建技术在急腹症（急性腹痛）诊断中的价值。方法 139例患者中平扫83例,增强56例,均应用CT多平面重建技术处理诊断图像。结果 CT检查诊断准确率为89.21%（124/139）,经过病理及临床诊治后确诊的患者124例急腹症中阑尾炎25例（20.16%）,泌尿系结石21例（16.94%）,胆囊炎18例（14.52%）,胰腺炎16例（12.90%）,肠梗阻16例（12.90%）以及其他疾病28例（22.58%）。结论多层螺旋CT检查快速、简便,有较高的特异性和准确性,是急腹症早期诊断最佳的影像检查方法。     

健康人101名呼出一氧化氮正常值调查

背景：呼出一氧化氮测定可直接反映气道炎症,且具有无创、可重复性好、快速、患者依存性好等优点。目的：调查健康正常人呼出一氧化氮正常值。方法：使用瑞典尼尔斯（NIOX）《呼出一氧化氮测定系统》测定101名不同年龄段健康正常人呼出一氧化氮值,并测定肺通气功能及过敏原IgE。结果与结论：101名健康正常人呼出一氧化氮值（5-58）×10-9,均值为18.119×10-9,正常范围为（7.674-28.564）×10-9;女性呼出一氧化氮值较男性低,51名女性均值为14.901×10-9,50名男性均值为21.400×10-9;呼出一氧化氮值与年龄无明显相关性,其中20-29岁及60-80岁两个阶段均值低于18.119×10-9,40-59年龄段均值最高,为21.3×10-9。性别及身高与呼出一氧化氮值存在明显相关性。表明本中心调查的101名健康正常人呼出一氧化氮值稍高于国际参考值,与性别、身高存在明显相关性。     

螺旋CT扫描对胃肠道间质瘤的诊断价值研究

目的：探讨螺旋CT扫描检查对胃肠道间质瘤（GIST）的诊断价值。方法：选择我院拟诊的GIST 21例,均在术前行16排螺旋CT扫描,再对术后病理或免疫组化检查证实的病例进行对照分析。结果：肿瘤发生于胃13例,发生于小肠8例（十二指肠3例,空肠4例,回肠1例）;恶变3例。CT平扫显示紧贴腔壁软组织密度肿块;增强动脉期呈不均匀轻度强化,静脉期呈均匀明显强化。肿块最大者位于回肠,范围广泛,累及多段肠壁。2例中央可见囊变坏死区,未见钙化影。术前CT诊断与术后病理或免疫组化检查符合率为85.7%。结论：16排螺旋CT扫描对GIST的定位及定性诊断具有较高价值。     

16排螺旋CT诊断胰腺实性假乳头状瘤12例

胰腺实性假乳头状瘤（SPTP）是一种极为少见的胰腺肿瘤,占胰腺外分泌肿瘤的1％～2％,由于其临床症状不典型,不易与胰腺其他肿瘤鉴别,术前误诊率较高。2008年以来,我们采用16排螺旋CT诊断胰腺实性假乳头状瘤12例。现分析报告如下。