重组人肝再生增强因子的克隆、表达及纯化

目的通过构建原核表达系统，在大肠埃希菌中表达重组人肝再生增强因子（hALR）蛋白，为各种急慢性肝损伤及肝衰竭的治疗提供新的治疗方法奠定基础。方法利用正常人肝组织提取总RNA，经一步法逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）获取hALR cDNA全序列，构建原核表达载体hALR—pET28a（＋）转化大肠埃希菌（BL21），诱导表达重组hALR蛋白，以组氨酸为标签进行蛋白纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western Blot鉴定重组蛋白。结果经双酶切和DNA测序证实hALR cDNA正确插入表达载体pET28a（＋），成功表达并纯化得相对分子质量为23000的重组蛋白，低温诱导表达使可溶蛋白明显增加，与预期结果相符。结论成功表达和纯化获重组hALR蛋白。     

Graves病患者IL-4和IL-2水平及其糖皮质激素治疗后的变化

本研究通过观察Graves病（GD）甲状腺功能亢进症（甲亢）患者治疗前后血清IL-4和IL-2水平的变化，探讨GD甲亢免疫动态的改变及糖皮质激素对GD甲亢时Th1／Th2平衡的影响。     

肺气虚与气道反应性关系的探讨

肺气虚与气道反应性关系的探讨浙江省中医药研究院（３１０００７）徐锡鸿，孔繁智，石玲，李君金华市人民医院郭安，陈融华，李素花宁海县人民医院华素彩温岭市中医院陆维安“证”的研究是中医基础理论研究的一个重要部分，肺气虚“证”本质的研究就是目前国内医学研究较...     

利尿剂加β受体阻滞剂治疗风心病二尖瓣狭窄并心力衰竭60例

风湿性心脏病二尖瓣狭窄是内科的常见疾病。寻找有效的方法治疗风心病二尖瓣狭窄所致的重度心衰，是内科医生探索的目标。2000-01／2003-01我们采用利尿剂加G受体阻滞剂治疗风心病二尖瓣狭窄重度心衰60例，取得满意的效果，现总结报告如下。     

心房颤动数据元标准化研究

目的 编制标准化的心房颤动病例数据元、数据集,使心房颤动的数据资源能够被其他各类卫生信息系统共享.方法 通过研究分析心房颤动临床与科研业务需求,结合专家研讨,制定心房颤动病例报告表和构建信息模型,并从信息模型中提取数据元.遵循卫生信息标准,规范数据元及其属性.结果 制定出心房颤动病例报告表3个、标准化数据元647个、标准数据集39个.结论 心房颤动疾病标准化数据元从根本解决了数据名称、类型、值域不统一的问题,为不同信息系统提供了一个共同遵守的数据交换规范.     

CDK2 RNA干扰后HepG2细胞蛋白表达的变化

目的 探讨稳定转染CDK2干扰RNA对人肝癌细胞株HepG2细胞生物活性及细胞核蛋白质的改变.方法 构建稳定转染pGenesil-1-CDK2的HepG2细胞系,MTT法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞周期的改变.通过RT-PCR和双向凝胶电泳-质谱技术-数据库搜索,比较转染前后CDK2 mRNA的表达和细胞核蛋白质的变化.并通过Western blot法对显著差异蛋白进行验证.结果 与空质粒组PHK-siRNA-HepG2细胞和未转染组HepG2细胞相比,pCDK2-siRNA-HepG2组细胞的生长速度减慢(P＜0.01),稳定转染CDK2 RNAi组细胞的CDK2 mRNA表达水平显著下降.通过双向电泳-质谱技术得到4个稳定转染CDK2 siRNA的HepG2细胞不表达的蛋白质,Westem blot法证实双向电泳结果的可信性.结论 CDK2干扰RNA可明显降低HepG2细胞CDK2 mRNA的表达,抑制HepG2细胞的增殖,干扰后的HepG2细胞不表达的蛋白质分别是类核糖体蛋白S12、β-肌动蛋白、锌指蛋白276和伴侣蛋白10相关蛋白.     

纳洛酮对蛛网膜下腔出血大鼠海马区神经细胞自噬的影响

目的探讨纳洛酮对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马区神经细胞自噬的影响。方法将 108只健康雄性清洁级 SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、 SAH组、纳洛酮组,每组 36只。假手术组只进行造模手术不刺破血管, SAH组利用颈内动脉穿刺法制成大鼠 SAH动物模型,纳洛酮组在造模成功后立即给予纳洛酮(1 mg∕kg体质量)腹腔注射,每 12小时注射 1次,用药至处死的各时相点。假手术组和 SAH组采用同样方法注射同等体积的 0.9%氯化钠溶液。每组又按 6h、24 h、72 h时间点分为 3个亚组(每个亚组 12只 SD大鼠)。穿梭箱实验观察三组大鼠的行为学变化;苏木素 ?伊红(HE)染色观察海马区神经细胞形态变化;免疫组织化学检测自噬特异性标志物 Beclin?1和微管相关蛋白 1轻链 3(LC3?Ⅱ)在大鼠海马区神经细胞的表达。结果与假手术组相比, SAH组 6h、24 h、72 h各时间点逃避反应次数减少［(24.83±3.24)次比(14.41±1.98)次,(25.33±2.64)次比(16.25±2.18)次,(25.16±2.82)次比(18.33±2.57)次］(P＜0.05),逃避反应时间增加［(3.54±0.99)s比(9.09±1.38)s,(3.55±0.84)s比(8.73±1.13)s,(3.54±0.83)s比(8.00±1.04)s］(P＜0.05)海马区正常神经细胞数量减少［(122.67±5.55)个比(84.25±12.63)个,(122.25±5.50)个比(75.58±11.11)个,(121.58±5.68)个7.75±10.55)个］(P＜0.05)表达 Beclin?1和 LC3?Ⅱ蛋白的阳性细胞数量增高［(20.50±3.45)个比(31.41±4.96)个,(20.33±2.77)个比(47.67±7.35)个,(200±3.59)个比(43.17±6.46)个;(17.08±比(6,.5,3.00)个比(27.42±3.40)个,(17.50±2.31)个比(39.83±4.67)个,(17.41±2.57)个比(31.50±4.06)个］(P＜0.05)。与 SAH组比较,纳洛酮组各时间点逃避反应次数增多［(14.41±1.98)次比(16.50±1.93)次,(16.25±2.18)次比(19.25±2.30)次,(18.33±2.57)次比(22.50±2.20)次］(P＜0.05),逃避反应时间减少［(9.09±1.38)s比(8.05±1.24)s,(8.73±1.13)s比(6.56±1.09)s,(8.00±1.04)s比(5.36±0.97)s］(P＜0.05)海马区正常神经细胞数量增多［(84.25±12.63)个比(94.75±11.06)个,(75.58±11.11)个比(84.50±9.21)个,(67.75±10.55)个比.33±9.88)个］(P＜0.05)表达 Beclin?1和 LC3?Ⅱ蛋白的阳性细胞数量增高［(31.41±4.96)个比(77,(36.17±4.06)个,(47.67±7.35)个比(57.58±6.68)43.17±6.46)个比(52.75±7.35)个;(27.42±3.40)个比(30.92±4.19)个,个,(,(39.83±4.67)个比(48.33±5.66)个,(31.50±4.06)个比(38.58±5.40)个］(P＜0.05)。结论纳洛酮的干预可适度激活 SAH大鼠海马区神经细胞自噬的表达,并具有脑保护作用。     

产前超声检查的临床价值分析

目的超声诊断胎儿先天结构畸形的临床应用价值。方法分析我院2013年7月至2014年1月就诊的710例孕妇进行产前超声检查,对发现胎儿结构畸形的资料进行保存、统计及系统分析,并进行超声检查结果与分娩、引产及尸解结果对照分析。结果产前超声检查共发现胎儿结构畸形阳性诊断40例,累计30项畸形,其中多发畸形16例,检出率5.63%,诊断符合率95.0%,误、漏诊率5.0%;其中神经系统畸形8例,心脏畸形7例,胸腔畸形1例,泌尿系统畸形2例,消化系统畸形3例,骨骼肌肉系统畸形3例,前腹壁异常2例,多胎异常2例,胎盘、脐带先天发育异常7例,颈部肿瘤4例,颜面部畸形1例。结论产前超声检查在恰当的孕周,应用标准化切面探查,可减少误、漏诊率,对提高胎儿结构畸形诊断具有不可忽视的临床价值。     

峰值氧耗量对非射血分数减低的心力衰竭患者预后评估的价值

目的:探讨心肺运动试验重要参数对非射血分数减低心力衰竭(HFr EF)预后评价的价值。方法:前瞻性入组2014年1月到2018年6月,我院诊断为非HFr EF患者,记录患者再入院及死亡事件,最后进行生存分析。结果:入选124例患者,平均随访(24±5)个月,10例患者死亡,32例患者因心力衰竭再住院治疗。心力衰竭组患者峰值氧耗量劣于正常健康对照组[(17.4±2.7)vs.(31.5±3.2)m L·kg^-1·min^-1,P<0.05]。事件组峰值氧耗量低于无事件组[(13.9±2.1)vs.(19.2±3.5)m L·kg^-1·min^-1,P<0.05]。多因素分析表明:峰值氧耗量是预测非HFr EF患者预后的指标(HR=0.81,95%CI:0.76~0.92,P<0.002)。结论:峰值氧耗量可以很好预测非HFr EF患者预后。     

小骨窗开颅清除急性硬膜外血肿

目的比较两种微创技术对急性硬膜外血肿的疗效。方法将128例需手术而不必去骨瓣减压的急性硬膜外血肿患者分为两组：A组55例,采用直切口小骨窗开颅清除血肿;B组73例,采用“∩”皮瓣骨窗常规开颅清除血肿。对两组患者手术时间、术中出血量、术中输血量、术后血肿残留量及术后6个月GOS进行比较。结果A组手术时间[（72±6）min]较B组[（114±42）min]显著缩短（P〈0．01）;A组术中出血量[（189±32）ml]较B组[（344±52）ml]明显减少（P〈0．01）;A组术中输血量[（70±40）ml]较B组[（180±60）ml]亦显著减少（P〈0．01）;A组术后血肿残留量[（8±2）ml]较B组[（5±2）ml]明显多（P〈0．05）;伤后6个月GOS评分A、B组分别为（4．95±0．23）分和（4．93±0．25）分,两组相较无明显差异（P〉0．05）。结论直切口小骨窗清除硬膜外血肿,能达到常规手术清除血肿的预后效果,但其手术时间、术中出血量、输血量却显著下降。