Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎发病过程中SSAO的活性变化

目的 探讨SSAO酶活性在类风湿性关节炎发病过程中的变化。方法 取25只大鼠,尾根部多点注射Ⅱ型胶原制作类风湿性关节炎大鼠模型,以造模当天为0天,在造模第3天、7天、14天和21天,分别处死5只大鼠,取血浆和踝关节组织,分别检测SSAO活性、TNF-α和ICAM-1水平。另取5只大鼠作为空白对照组。结果 造模后第12天大鼠开始发病;关节组织SSAO活性于造模第3天开始升高,第7天升高到最高,之后开始降低;血浆SSAO活性变化不明显。血浆和组织中TNF-α及ICAM-1水平均随关节炎发病过程出现显著变化。结论 Ⅱ型胶原大鼠关节炎发病过程中伴随有SSAO活性的变化。     

中药蜈蚣多糖的分离纯化及性质研究

目的:从中药蜈蚣体内提取多糖组分,并对其部分性质进行分析.方法:从中药蜈蚣体内提取粗多糖,经DEAE-52离子交换柱层析分离获得3个糖组分;凝胶过滤法测组分Ⅰ的分子量;MTT法检测多糖组分Ⅰ对两种肿瘤细胞的抑制作用.结果:组分Ⅰ的分子量为33.1 kD;该多糖组分对Hela细胞的抑制作用明显,当糖浓度为3.13 μg/mL时,抑制率达60.8%,但对Eca 109细胞无明显抑制作用.结论:蜈蚣多糖组分Ⅰ对不同的肿瘤细胞具有特异性.     

土鳖虫多肽对正常和免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 研究土鳖虫多肽对小鼠免疫功能的影响.方法 土鳖虫多肽灌胃给予小鼠10 d,于最后3d腹腔注射环磷酰胺( 50 mg/kg)制备免疫抑制小鼠.观察胸腺、脾脏指数,碳粒廓清指数和血清白介素-2(IL-2)水平.结果 土鳖虫多肽具有促进胸腺和脾脏发育及保护胸腺和脾脏的作用;土鳖虫多肽可显著提高免疫抑制小鼠单核/巨噬细胞的吞噬功能;提高正常和免疫抑制小鼠血清IL-2含量.结论 土鳖虫多肽可提高正常和免疫抑制小鼠的免疫能力.     

Wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞的促分化作用

目的观察wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠成肌细胞向成熟肌细胞分化作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用含不同浓度胰岛素的DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法和Western blot法检测生肌素(myogenin)表达。用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂wortmannin和MEK特异性抑制剂U0126干预后,观察胰岛素对骨骼肌成肌细胞分化的影响。结果胰岛素能明显促进骨骼肌成肌细胞形成肌小管,诱导2 d开始有肌管形成并逐渐增多到7 d达到高峰;胰岛素促进骨骼肌成肌细胞的生肌素阳性细胞核和生肌素蛋白表达增多,而wortmannin和U0126能下调胰岛素的这种作用。结论 Wortmannin和U0126可阻断胰岛素促进骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化,使肌管生成减少,生肌素表达下调。     

母子分离应激对Cplx2基因缺陷小鼠中枢神经递质多巴胺分泌的影响

目的本文旨在探讨母子分离应激对complexinⅡ(Cplx2)基因小鼠中枢神经递质多巴胺分泌的影响。方法实验分4组:应激Cplx2-/-组、应激Cplx2+/+组、无应激Cplx2-/-组和无应激Cplx2+/+组。无应激组小鼠正常饲养,应激组小鼠从出生后第2日至第21日每天施加母子分离应激。小鼠生长到第4周时,利用聚合酶链反应技术检测其基因型。4组小鼠腹腔注射激动剂去氧麻黄碱或生理盐水后,采用高效液相加电化学检测器测定纹状体多巴胺含量。结果应激Cplx2-/-组、应激Cplx2+/+组、无应激Cplx2-/-组和无应激Cplx2+/+组注射去氧麻黄碱后,与生理盐水对照组相比,纹状体多巴胺水平显著升高(P<0.05),以应激Cplx2-/-组纹状体多巴胺分泌增多最为明显。与无应激Cplx2+/+组相比较,应激Cplx2+/+组注射去氧麻黄碱后纹状体多巴胺分泌增多(P<0.05);与无应激Cplx2-/-组相比较,应激Cplx2-/-组注射去氧麻黄碱后纹状体多巴胺分泌增多(P<0.05);与应激Cplx2+/+组相比,应激Cplx2-/-组注射去氧麻黄碱后纹状体多巴胺分泌增多(P<0.05)。与无应激Cplx2+/+组相比,无应激Cplx2-/-组注射去氧麻黄碱后纹状体多巴胺分泌增多(P<0.05)。结论本实验证实小鼠中枢神经递质多巴胺分泌可能受去母子分离应激和Cplx2等因素的多重影响。     

miRNA-140-5p在人骨髓间充质干细胞成脂分化中的表达及其靶基因的预测

目的 筛选出人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成脂分化中具有潜在价值的miRNA及其靶基因,为人类成骨细胞与脂肪细胞分化平衡调控机制的深入研究提供有力实验依据.方法 收集hMSCs成脂分化过程中的0、7、14、21 d的细胞样品,应用miRNA芯片和转录组测序(mRNA-seq)技术,分析4个点细胞中miRNA和mRNA的表达水平,并将miRNA与mRNA的表达趋势进行关联分析,聚焦具有研究价值的miRNA与mRNA相互调控关系,同时,采用TargetScan、PicTar和miRanda等数据库进行靶基因的预测.结果 发现miR-140-5p在成脂分化中表达量呈逐渐下降的趋势,而白血病抑制因子受体(LIFR)表达量呈逐渐升高趋势,二者呈现负调控的对应关系.同时经3个靶基因数据库预测,LIFR为miR-140-5p共有的靶基因.结论 miRNA-140-5p可能与人骨髓间充质干细胞的成脂分化密切相关,且通过调控其靶基因LIFR的表达而参与成脂分化.     

土鳖虫纤溶酶编码区序列的克隆与表达

目的:获得土鳖虫纤溶酶编码区序列,并进行原核和真核表达。方法:根据已报道的多种动物纤溶酶基因cDNA序列设计引物,用RT-PCR和3′RACE法克隆得到土鳖虫纤溶酶编码区序列;将该序列克隆进入大肠杆菌和毕赤酵母进行表达。结果:序列分析表明,所克隆的纤溶酶编码区序列长672bp,共编码224个氨基酸残基,起始氨基酸序列为IVGG,与多种动物纤溶酶一致。将此cDNA序列在大肠杆菌和毕赤酵母中进行表达,前者获得没有活性的表达蛋白,后者获得具有纤溶活性的重组表达蛋白。结论:首次报道了土鳖虫纤溶酶编码区序列,并进行了初步表达,为进一步研究其功能奠定了基础。     

地鳖虫纤溶活性蛋白组分抑制肿瘤作用研究

目的 地鳖虫纤溶活性蛋白组分对体内外肿瘤的抑制作用.方法 用MTT法、流式细胞术和AnnexinV-FITC/PI双荧光染色分别检测地鳖虫纤溶活性蛋白组分对体外培养的Hela细胞增殖、细胞周期及凋亡情况的影响;用S<,180>荷瘤小鼠检测地鳖虫纤溶活性蛋白组分的体内抑瘤作用.结果 地鳖虫纤溶活性蛋白组分对体外培养的Hela细胞具有抑制细胞增殖、改变细胞周期并能诱导细胞凋亡的作用,对S<,180>荷瘤小鼠具有抑瘤作用.结论 地鳖虫纤溶活性蛋白组分具有一定的抑制肿瘤作用.     

土鳖虫水提物联合环磷酰胺抗肿瘤增效减毒作用研究

目的:探讨土鳖虫水提物对化疗药物环磷酰胺抗H22肿瘤的增效减毒作用。方法:将接种H22肿瘤的小鼠分为模型对照组、CTX组、土鳖虫水提物组和土鳖虫水提物+CTX组。给药10天,检测各组小鼠的抑瘤率、脾脏指数和胸腺指数,分析土鳖虫水提物对CTX的减毒增效作用。结果:土鳖虫水提物可抑制H22肿瘤的生长,抑瘤率为38.76%。单用CTX组抑瘤率为36.95%,联用土鳖虫水提物组抑瘤率为47.28%,与单用CTX组比较差异显著(P0.01)。与模型组比较CTX组胸腺指数和脾脏指数显著降低,但联合土鳖虫水提物组的胸腺指数和脾脏指数与CTX相比显著升高(P0.05)。结论:土鳖虫水提物对H22肿瘤具有抑制作用,对化疗药物CTX具有增效减毒作用。     

留学生生理学实验课的教学探讨

生理学是基础医学与临床医学的桥梁课程,是医学留学生的必修课程[1-2],而且是一门实践性很强的学科。生理学实验课不仅有助于学生对课堂理论知识的进一步理解和巩固,还有利于学生培养完善的医学思维模式、科学研究方面的动手能力、严谨的操作习惯。笔者对如何进一步提高留学生人体生理学实验教学质量谈一些体会。