丙型肝炎病毒与荧光素酶融合基因细胞模型的初步建立

Objective　To establish HCV cell culture model which is easy to measure. Methods　Controllable retroviral vector with fusion gene of hepatitis C virus (HCV) cDNA and luciferase (luc) reporter gene was constructed by molecular cloning technique, the transfection of this retroviral vector in a human hepatic carcinoma cell (HHCC) line was performed by lipofectAMINE and then luciferase activity in the cellular lysate was measured by scintillation counter. Results　 ① Fusion gene of the HCV 5′ NCR-C region and luciferase reporter gene identified by restriction endonuclease cleavage have been cloned into pBPSTR1 vector. ② The luciferase activity could maintain up to 20 days at least, and could be increased by puromycin treatment and regulated by tetracycline. Conclusion　A cell model for expression of HCV C-E1 and luciferase genes was established for gene therapy studies against HCV C-E1 sequences.     

用Gateway技术克隆并表达汉滩病毒G1蛋白ITAM样基序

目的:克隆并表达汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白(G1)胞质区尾段ITAM样基序及其突变体.方法:采用RT-PCR方法,扩增HTNV G1蛋白ITAM样基序及其中2个保守酪氨酸残基突变基序编码基因,应用Gateway技术将目的基因克隆至pDESTTM15表达载体,在BL21-AI中经L-阿拉伯糖诱导表达,免疫印迹确证融合蛋白的表达.结果:成功地构建了2个含汉滩病毒G1胞质区尾段ITAM样基序编码序列表达载体pDEST- ITAM-L,pDEST-ITAM和1个含保守酪氨酸残基突变的G1 ITAM样基序编码序列表达载体pDEST-ITAM-YY-FF (Y615F,Y628F),并在大肠埃希杆菌中得到高效表达,免疫印迹证实目的蛋白与GST融合表达.结论:获得了3种与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合的G1 ITAM样基序及其突变基序的重组蛋白, 为进一步探讨HTNV G1蛋白ITAM样基序在HFRS免疫信号传递中的作用奠定了基础.     

环磷酰胺治疗小鼠S180肉瘤的体内31P磁共振波谱研究

目的 观察环磷酰治疗小鼠Ｓ１８０肉瘤的＾３１ＰＭＲＳ参数变化,以及这些参数的变化是否早于常规观察的瘤体积变化。方法 利用表面线圈＾３１ＰＮＭＲ方法,并研究了小鼠皮下接种Ｓ１８０肉瘤的体积。结果：对照组的ＰＣｒ／Ｐｉ和＋β－ＮＴＰ／Ｐｉ比值降低,而环磷酰胺给药组升高,且给药后２４,４８,７２ｈ时显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）,对照组的ＰＭＥ／β－ＮＴＰ比值继续升高,而给药组ＰＭＥ／β－ＮＴＰ比值在给     

生物体内微量氟乙酰胺和氟乙酸钠核磁共振测定技术及其应用的研究

生物体内微量氟乙酰胺和氟乙酸钠核磁共振测定技术及其应用的研究缪振春关福玉刘荫堂李光玉杜泽涵军事医学科学院毒物药物研究所北京１００８５０近些年，氟乙酰胺和氟乙酸钠的中毒事件时有发生。因此研究这些毒物的检测方法具有实际意义。生物体内样品的特点是：毒物的浓...     

介入治疗在急性大咯血中的应用分析

目的 探讨介入治疗在大咯血治疗中的临床应用价值.方法 对34例各种原因引起的大咯血患者行选择性支气管动脉造影和栓塞术,随访6～18个月,并进行疗效分析.结果 34例患者插管栓塞成功,即刻止血27例(79.4%),出血明显减少7例(20.6%),总有效率100%,无严重并发症.结论 支气管动脉栓塞术治疗大咯血是一项具有安全、有效、微创及并发症少等优点的成熟技术,值得临床广泛应用.     

第60～80位氨基酸多肽片段缺失的HCV核蛋白在真核细胞中的表达

目的 : 构建丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)第60-80位氨基酸多肽缺失核蛋白的真核表达载体,并在真核细胞中表达. 方法: 用RT-PCR方法从西安地区丙型肝炎患者血清中扩增HCV C区及部分E1区基因并进行克隆、测序,以此为模板用重叠延伸拼接方法扩增第60-80 位氨基酸多肽基因缺失的核蛋白基因片段(C510),将其定向克隆入哺乳动物高效表达载体pCI-neo中,通过Lipofectamine2000转染入p815细胞,经间接免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜和Western-Blotting方法检测细胞中目的蛋白的表达.结果: 从患者血清中成功克隆出HCV C区基因,序列及系统发生树分析结果显示为1b型;测序结果显示构建的第60-80位氨基酸多肽缺失核蛋白基因的重组真核表达质粒pCI-510基因序列准确;免疫荧光和免疫印迹方法均证实目的蛋白p170可在p815细胞中表达.结论: 重组体pCI-510构建正确,其目的基因在p815细胞中可有效表达,为进一步的研究奠定了基础.     

老年肾综合征出血热患者的营养状况分析

目的 :分析老年肾综合征出血热 (HFRS)患者的营养状况 ,探讨患者的营养状况对其发病、疗效、预后的影响。方法 :回顾性分析 13 1例老年HFRS患者的营养状况和救治效果。检测 13 1例老年HFRS患者的营养指标 ,如BMI、血清总蛋白 (TP)、白蛋白 (ALB)、血红蛋白 (HGB)、总淋巴细胞计数 (TLC)和氮平衡 (BN )。结果 :13 1例老年HFRS患者中 62 4%存在营养失衡 ,经综合治疗和营养支持后 ,营养正常组较营养失衡组的病程短、营养指标恢复明显。结论 :老年HFRS患者多数营养不良 ,除积极有效的综合治疗 ,营养支持治疗是改善体质、缩短病程的重要措施     

超短波治疗小儿迁延性和慢性肺炎30例效果观察

我科从l991年3月至1994年3月应用超短波电疗机治疗小儿迁延性和慢性肺炎30_辫，效果理想，现报告如下。     

血清脯肽酶Ⅰ的测定及其临床意义

作者检测本院１９９４年１月～１９９４年４月肝炎患者６０例、其它疾病患者２７例血清中的脯肽酶Ⅰ（ＰＬＤＩ）的水平与健康献血员血清ＰＬＤＩ进行比较．结果表明各型肝炎患者血清ＰＬＤＩ均明显升高．急（ｎ＝２４）、慢性肝炎（ｎ＝２２），肝硬变（ｎ＝１４）和其它疾病（ｎ＝２７）患者分别为１９５３．６±５７０．７μ／Ｌ，１４４５．７±３２５．８μ／Ｌ，１８３１．１±３７０．９μ／Ｌ，１２５４．４±４４８．３μ／Ｌ，与对照组（９１０．８±２００．３μ／Ｌ）相比，Ｐ均＜０．０１．急性肝炎中，ＰＬＤＩ与丙氨酸转氨酸（ＡＬＴ）均升高，且呈明显正相关（ｒ＝０．６６６，Ｐ＝０．０００７）；慢性肝炎中，ＰＬＤＩ与ＡＬＴ虽均升高，但无相关性；肝硬变中，ＰＬＤＩ明显升高，而ＡＬＴ多正常，提示ＰＬＤＩ比ＡＬＴ能更好地反映肝病的转归，是一项较灵敏的肝病慢性化指标．     

PAP─ELISA法测定乙型肝炎病毒X基因

ＰＡＰ┐ＥＬＩＳＡ法测定乙型肝炎病毒Ｘ基因冯志华周永兴姚志强李光玉焦建中（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３８）关键词乙肝病毒Ｘ抗原ＥＬＩＳＡ辣根过氧化物酶抗体测定中图号Ｒ５１２．６我们用乙型肝炎病毒Ｘ基因抗体（ＨＢｘＡｂ）和辣根过氧化物酶抗体...