海南地区1株携带blaNDM-5大肠埃希菌的分离及耐药基因分析

目的分析2014年海南地区临床分离的1株携带bla_(NDM-5)大肠埃希菌的耐药表型及耐药基因。方法收集临床分离耐碳青霉烯类药物大肠埃希菌1株,经Vitek 2 Compact和E-test条进行菌株鉴定及药敏复核试验;改良Hodge试验和EDTA协同试验筛选碳青霉烯酶表型;PCR扩增并测序筛查碳青霉烯酶基因(bla_(NDM)、bla_(KPC)、bla_(GES)、bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(OXA-48)和其他β-内酰胺酶基因(bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(CTX);多位点序列分型(MLST)进行序列分型;接合转移试验、S1酶切脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)、Southern印迹杂交方法分析其携带质粒的特征。结果该菌株对所检测的包括碳青霉烯类的β-内酰胺类药物全部耐药,对阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、利福平、替加环素和多粘菌素B敏感;改良Hodge试验和EDTA协同增效试验阳性;基因扩增及序列比对显示与已报道的bla_(NDM-5)同源性100%,同时检出bla_(TEM-1)和bla_(CTX-M-55)基因;MLST测序分型为ST5131;S1-PFGE、Southern印迹杂交显示bla_(NDM-5)位于大小约50 000 bp的质粒上,并且为接合性质粒。结论海南地区发现携带bla_(NDM-5)的大肠埃希菌,该基因存在于可经接合传递的质粒上;该菌株同时携带bla_(TEM-1)、bla_(CTX-M-55)β-内酰胺酶基因。     

念珠状链杆菌引起鼠咬热1例

目的 通过对一株念珠状链杆菌及其引发的鼠咬热病例的回顾性分析,为临床微生物室和临床医生提供诊治经验。方法 病例回顾性分析：患者因被老鼠咬伤左手拇指引起发热就诊,入院后进行血培养,并用美华Ma120、梅里埃Vitek 2细菌鉴定系统、杭州滨河微量生化管、梅里埃TM质谱仪和16SrRNA基因测序进行细菌鉴定。临床给予阿莫西林氟氯西林联合左氧氟沙星抗感染治疗12 d。结果 血培养分离出革兰阴性呈链状、菌体有念珠状肿胀的L型细菌;该菌用美华Ma120、梅里埃Vitek 2细菌鉴定系统、杭州滨河微量生化管、梅里埃TM质谱仪均无法鉴定;16sRNA基因测序结果显示该菌与念珠状链杆菌的相似度为100%;临床确诊为念珠状链杆菌型鼠咬热,用阿莫西林氟氯西林联合左氧氟沙星治疗有效。结论 念珠状链杆菌能引起人类鼠咬热,该菌用16sRNA基因测序能准确鉴定,常规细菌鉴定仪和质谱仪均难以鉴定。临床医生对于有鼠咬史的患者,血液中检出革兰阴性呈链状、菌体有念珠状肿胀的L型细菌时需考虑念珠状链杆菌引发鼠咬热的可能。     

类鼻疽伯克霍尔德菌跨洲际流行株的同源性分析及历史溯源

目的 比较不同年代分离自澳大利亚、中国海南地区7株ST562型类鼻疽伯克霍尔德菌（类鼻疽伯克菌）的同源性,并分析其传播来源。方法 利用生物信息学方法提取ST562型类鼻疽伯克菌澳大利亚临床株MSHR5858、中国海南历史菌株350105基因组中Spe Ⅰ限制性酶切片段指纹谱、多位点可变数目串联重复序列多态性指纹（MLVA-4）等遗传特征,并与近年分离的5株海南ST562型临床株的脉冲场凝胶电泳（PFGE,Spe Ⅰ酶切）、MLVA-4分子分型结果相比较。同时分析MSHR5858与350105在基因组水平的共线性及同源性。结果 5株海南ST562型临床株的PFGE带型相同（相似度>97%）且与澳大利亚临床株MSHR5858的Spe Ⅰ限制性带型一致;澳洲临床株（MSHR5858）与海南历史菌株（350105）基因组中Spe Ⅰ限制片段数分别为31和34,其中31个片段的长度一致。5株海南ST562临床株的MLVA-4型别各不相同,但HPPH43（MLVA-4指纹谱：10,8,10,8）与MSHR5858（10,8,8,6）在2341 k、1788 k两个位点重复数相同;HK003（11,8,15,7）、HK061（11,8,17,7）与历史菌株350105（11,8,11,8）在此二位点重复数也相同。此外,350105与MSHR5858在基因组水平具有良好共线性,共有基因占绝大部分,提示来源一致。结论 分离的7株ST562型类鼻疽伯克菌（包括中国海南临床分离株、历史菌株及澳大利亚临床分离株）遗传特征一致,且ST562型近年流行株与历史菌株350105可能具有同源关系。     

IL-6与人工关节假体周围骨溶解的相关性

目的：探讨人工关节假体骨溶解模型动物外周血清和关节液中IL-6与骨溶解的相关性。方法：健康成年新西兰兔40只,随机分为实验组三组及对照组,各10只。于动物右股骨髁间窝钻孔,股骨髓腔内置入1枚直径3mm、长15mm的不锈钢圆针。术后6周开始向三个实验组动物右侧膝关节腔内注入聚乙烯悬液0.5mL;对照组注入等量生理盐水作为对照。每2周注射1次,共5次,分别于第16、18、20周处死三组实验动物,第20周处死对照组动物,分别取得标本液。ELISA法检测不同时间段外周血清和关节液中IL-6的含量。结果：在不同时间段,各组外周血清中IL-6含量的差异无显著性,各组关节液中IL-6含量的差异有显著性（P〈0.05）,并随着实验时间的延长而增加。结论：在兔骨溶解动物模型中,动物外周血清IL-6水平在骨溶解过程中没有受到影响,而关节液中的IL-6水平随着骨溶解的进展而升高。     

大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段血管内皮细胞ICAM-1表达的动态变化

Objective To investigate the dynamic changes of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) expression in endothelial cells (EC) during hindlimb allograft acute rejection in rats and the inhibitory effect of cyclospofine A (CsA) on the acute rejection. Methods The rat model of hindlimb allograft was developed. The rats were randomly divided into following groups: control group (Wistar→Wistar), rejection group ( Sprague-Dawley→Wistar) and CsA-treated group (Sprague-Dawley→Wistar). At postoperative day 1, day 4 and day 7samples of the femoral artery from the allograft limb were harvested to observe the pathologic changes. ICAM-1 expression in EC was quantified using immunohistochemical assay. Results Slight swelling and weak ICAM-1expression of EC were observed in the control group. In the rejection groups, obvious EC swelling and massive lymphocyte infiltration were seen. ICAM-1 expression in EC was significantly stronger and elevated. In CsA-group only mild infiltration of lymphocytes was seen and ICAM-I expression in EC was also much weaker.Conclusion During rat hindlimb allograft acute rejection the expression of ICAM-1 in EC was closely related to the occurrence and development of acute rejection. CsA could reduce the expression of ICAM-1 in EC and hence inhibit acute rejection of composite allograft.     

Palbociclib有关物质的分析及合成

为控制palbociclib药品质量,从palbociclib原料药中分离并鉴定了3个有关物质:8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并［2,3-d］嘧啶-7-酮(A)、8-环戊基-5-甲基-6-乙烯基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并［2,3-d］嘧啶-7-酮(B)和4-［6-(6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并［2,3-d］嘧啶-2-基氨基)-吡啶-3-基］-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(C)。分析了这些有关物质产生的原因并进行了设计合成,其结构经质谱、核磁共振氢谱确证。     

锁定钢板内固定治疗5岁以上儿童股骨干骨折的体会

目的探讨锁定钢板内固定治疗5岁以上儿童股骨干骨折的手术方法及疗效。方法回顾性分析2009-01—2013-12本院诊治的17例儿童股骨干骨折,均采用前外侧切口入路,复位,锁定钢板内固定,术后3个月常规拍片,观察骨折及运动功能情况。结果 17例患儿均获随访3~12个月,平均6.5个月。根据X线检测及骨折愈合标准判断骨折均获愈合,平均愈合时间16周,所有患儿无神经、血管损伤,无内固定松动及断裂,伤口感染等并发症发生。结论锁定钢板内固定治疗儿童股骨干骨折固定可靠,可早期行功能锻炼,患肢术后功能恢复良好,无常见的儿童骨折并发症发生。     

海南省类鼻疽流行区分离出泰国伯克霍尔德菌

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大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段血管内皮细胞ICAM-1表达的动态变化

Objective To investigate the dynamic changes of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) expression in endothelial cells (EC) during hindlimb allograft acute rejection in rats and the inhibitory effect of cyclospofine A (CsA) on the acute rejection. Methods The rat model of hindlimb allograft was developed. The rats were randomly divided into following groups: control group (Wistar→Wistar), rejection group ( Sprague-Dawley→Wistar) and CsA-treated group (Sprague-Dawley→Wistar). At postoperative day 1, day 4 and day 7samples of the femoral artery from the allograft limb were harvested to observe the pathologic changes. ICAM-1 expression in EC was quantified using immunohistochemical assay. Results Slight swelling and weak ICAM-1expression of EC were observed in the control group. In the rejection groups, obvious EC swelling and massive lymphocyte infiltration were seen. ICAM-1 expression in EC was significantly stronger and elevated. In CsA-group only mild infiltration of lymphocytes was seen and ICAM-I expression in EC was also much weaker.Conclusion During rat hindlimb allograft acute rejection the expression of ICAM-1 in EC was closely related to the occurrence and development of acute rejection. CsA could reduce the expression of ICAM-1 in EC and hence inhibit acute rejection of composite allograft.     

大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段血管内皮细胞ICAM-1表达的动态变化

目的 研究大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段,移植肢体血管内皮细胞细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)动态变化及环孢素A(cyclosporine A,CsA)抗免疫排斥的作用.方法 建立大鼠肢体移植动物模型,随机分为对照组(Wistar大鼠→Wistar大鼠)、排斥组(SD大鼠→ Wistar大鼠)和CsA治疗组(SD大鼠→Wistar大鼠),术后1、4、7 d获取移植肢体股动脉行病理学观察,采用免疫组化法检测移植肢体血管ICAM-1表达的变化.结果 对照组供体移植肢体股动脉血管内皮细胞仅出现轻微肿胀与ICAM-1表达微弱;排斥组血管内皮细胞肿胀明显,淋巴细胞大量浸润,ICAM-1的表达强度和数量明显增加;CsA治疗组移植肢体血管内皮细胞仅有少量淋巴细胞浸润,ICAM-1表达较弱.结论 大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段,血管内皮细胞ICAM-1表达水平与排斥反应的发生和发展有关,CsA可降低移植肢体血管内皮细胞ICAM-1表达,抑制复合组织移植术后急性排斥反应.