耐TAM大鼠乳腺癌细胞移植的免疫组化研究

内分泌治疗已作为一种辅助措施广泛应用于乳腺癌的临床治疗,并取得满意疗效,其中三苯氧胺(ｔａｍｏｘｉｆｅｎ,ＴＡＭ)为研究最多、应用最广的药物,它不仅有效地用于乳腺癌的治疗,而且已用于乳腺癌高危人群的预防,并认为这是最好的预防药物〔1〕。但是,随着ＴＡＭ的广泛应用,耐药问题也显突出。为进一步观察耐ＴＡＭ大鼠乳腺癌细胞在活体内的形态学特性,我们应用ＳＤ大鼠进行动物实验,复制成耐ＴＡＭ乳腺癌动物模型,并观察移植瘤ＰＣＮＡ、ＥＲ、ＰＲ等在乳腺癌中表达特征。1　材料与方法1.1　乳腺癌细胞系与细胞培养　实验所用的乳腺癌细胞…     

肝硬化所致乳糜性胸水的临床分析——附4例报告

目的 探讨肝硬化所致乳糜性胸水的临床特点及诊断方法.方法 回顾分析我院2003年1月至2009年12月诊断4例肝硬化所致乳糜胸水的临床病例资料,分析其临床特点、诊断和治疗效果.结果 4例患者均携带有乙型肝炎病毒.胸水检查:外观为黄白色或白色乳糜状,实验室检查确诊为真性乳糜胸水(乳糜试验及苏丹Ⅲ染色均阳性).在综合治疗...     

表达幽门螺杆菌NAP蛋白的减毒沙门疫苗菌株预防幽门螺杆菌感染

目的建立表达幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)中性粒细胞活化蛋白(Hp-NAP)的减毒沙门疫苗菌,并利用人类幽门螺杆菌感染的小鼠模型研究疫苗菌对Hp感染的免疫保护作用。方法利用分子克隆技术构建携带Hp-NAP基因的重组原核表达质粒pTrc99A-NAP,经PCR及酶切鉴定后测定其基因序列,并与美国国立医学图书馆基因文库中相关序列的同源性进行比较。重组质粒pTrc99A-NAP转化减毒伤寒沙门菌SL3261,培养后筛选阳性菌落,抽提质粒进行PCR及酶切鉴定。表达的Hp-NAP蛋白用SDS-PAGE和West-blotting进行鉴定,用薄层扫描分析蛋白含量。C57BL/6小鼠随机分成4组,分别灌胃给予生理盐水(A组)、减毒鼠伤寒沙门菌SL3261(B组)、携带pTrc99A的SL326组(C组)、携带pTrc99A-NAP的SL326组重(D组)。免疫后4周,予Hp攻击,攻击菌量107CFU/只,灌胃2次,每日1次。攻击4周后处死动物,取胃组织分别行改良Giemsa染色及定量细菌培养,观察Hp定植情况。结果核苷酸序列测定及同源性分析证实,克隆的Hp-NAP基因与GenBank中相关序列的同源性为98%(397/402),氨基酸序列的同源性为98%(131/133)。pTrc99A-NAP转化的减毒沙门菌,可表达Mr约15000的Hp-NAP蛋白,表达量约占菌体蛋白量的37·5%;表达的新生蛋白能与小鼠抗Hp血清特异性反应,具有良好的免疫原性。同空白对照组、SL3261组和SL3261(pTrc99A)组相比,表达Hp-NAP的疫苗株组实验动物的胃组织Hp定植密度明显下降(P<0·05)。结论成功构建表达Hp-NAP的减毒沙门疫苗菌;重组疫苗菌对小鼠Hp感染具有一定免疫预防作用,可作为未来多组分重组减毒沙门疫苗菌的侯选菌株之一。     

幽门螺杆菌尿素酶A、过氧化氢酶的表达及纯化

目的：探讨重组尿素酶A亚单位（UreA）、过氧化氢酶（KatA）疫苗在防治婴门螺杆菌（HP）感染中的作用。方法：构建表达UreA、KatA的重组质粒,用IPTG诱导表达融合蛋白,并进行SDS－PAGE凝胶电泳及Western blot分析,Bulk GST Purification Module试剂盒纯化UreA和KatA。结果：构建的重组质粒能表达GST－UreA和GST－KatA合蛋白,表达量占细胞总蛋白量的35％和19％,并能与抗GST 发生特异性反应。纯化的UreA、KatA的纯度达95％以上。结论：该工作为进一步的动物免疫实验奠定了基础,该重组疫苗有望在HP感染及其相关疾病的防治中发挥积极作用。     

大肠息肉临床与病理相关性研究

目的探讨大肠息肉患者的年龄、息肉发生部位、大小和息肉病理类型及癌变的相关规律。方法分析我院2005年1月-2010年12月电子肠镜检查中检出的大肠息肉患者的临床表现、内镜特点及病理资料。结果在4 630例肠镜检查患者中,发现大肠息肉824例,检出率为18%,其中,腺瘤性息肉495例,占60.1%;炎症性息肉193例,占23.4%;增生性息肉125例,占15.2%;幼年性息肉11例,占1.3%。不同病理分型的息肉分布部位比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。混合性腺瘤平均直径明显大于绒毛状腺瘤和管状腺瘤。本组共有25例息肉发生癌变,癌变率为3.03%。癌变患者息肉病理组织学均为腺瘤型,直径≥1.1 cm者21例,占84%。结论中老年人大肠息肉发病率较高;病理类型以腺瘤性息肉、炎症性息肉较常见;息肉直径≥1.1 cm或混合性腺瘤容易癌变;建议要重视36岁以后人群的肠镜检查。     

原发性胆汁性肝硬化患者肝脏和外周血自然杀伤细胞及其相关细胞因子的研究

原发性胆汁性肝硬化(primary billiary cirrhosis,PBC)是一种自身免疫性疾病[1],肝内胆管是PBC时自身免疫攻击的靶目标,其发病机制尚不清楚.     

肠易激综合征的诊断

西方国家许多初级保健医师对IBS不诊断,从主诉直接到治疗,而一些专家认为IBS依靠“排除诊断”,并进行回顾性研究。迄今IBS的诊断仍无最佳方法。医师希望作出经济、准确的阳性诊断,将IBS同器质性疾病和其他胃肠功能障碍(如腹泻、消化不良和便秘)相鉴别,这些胃肠功能障碍需要不同的诊断和治疗措施。作出IBS的诊断也对患者的症状作出了“解释”,对患者自信心的培养和安慰是必需的。再者,不准确的诊断会导致不恰当的就诊、不必要的外科手术和无效甚至是有害的药物治疗。需要准确识别那些可能的获益者,从而获得新药减轻IBS某些主导症状的依据。     

原发性胆汁性肝硬化患者肝脏和外周血淋巴细胞活化状态与γ干扰素、白介素2表达的研究

目的了解肝内淋巴细胞活化状态及其影响因素,为阐明PBC的发病机制、寻找治疗新措施提供理论基础.方法流式细胞法检测PBC患者外周血和肝内CD3、CD4,CD8,CD4/CD8,HLADR＋CD3^＋,HLADR＋CD8^＋,γ干扰素（IFN-γ）、白介素2（IL-2）,并与NASH患者比较.结果 PBC患者外周血T淋巴细胞以CD4＋T淋巴细胞占明显优势,肝内浸润T淋巴细胞以CD8^＋T淋巴细胞和CD4^＋T淋巴细胞为主;肝内CD4^＋T淋巴细胞较外周血中明显减少,CD4/CD8比例明显降低,但较NASH患者高.PBC患者外周血T淋巴细胞亚群组成比例及HLADR＋CD3^＋、HLDR＋CD8^＋并无显著性差异,外周血中IFN-γ、IL-2无显著性差异;但PBC患者肝内CD4^＋T细胞增多;CD4/CD8上升,HLADR＋CD3^＋、HLDR＋CD8^＋均增高,IFN-γ、IL-2均高于NASH患者.结论 PBC时外周血淋巴细胞及其活化状态可部分反应肝内免疫状况,肝内CD4^＋T淋巴细胞的活化和增殖是PBC发生和发展的关键环节;肝脏中HLADR＋CD3^＋、HLDR＋CD8^＋异常活化的同时肝组织内IL-2和INFγ增高,提示Th1细胞因子在PBC的发生和发展中起到重要作用.     

大学生创业教育研究

开展大学生创业教育是知识经济时代的迫切要求,本文分析了对大学生进行创业教育的现实意义和创业教育的现状,借鉴国际经验,从创业教育的内涵和特点出发,提出转变教育观念、改变人才培养模式;明确创业教育的定位;营造创业教育氛围;丰富创业教育实践活动等认识。     

表达幽门螺杆菌UreA和KatA双价抗原的鼠伤寒菌疫苗株的初步构建

目的　构建表达幽门螺杆菌 (Hp)尿素酶A亚单位 (UreA)和过氧化氢酶 (KatA)的减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株 ,对研制抗Hp感染重组疫苗的可行性进行探讨。方法　PCR方法从Hp基因组中扩增出ureA和katA片段 ,将其插入pGSTag表达载体中 ,重组质粒再转入减毒鼠伤寒沙门氏菌。结果　对重组质粒进行限制酶切分析和PCR检测 ,证实两种基因已被克隆入pGSTag ,并转入减毒鼠伤寒沙门氏菌。结论　本研究成功地将表达HpureA和katA融合基因的重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌中 ,构建了UreA/KatA双价口服活疫苗 ,为进一步研究其在预防Hp感染中的作用奠定了基础