pH对衰老相关β-半乳糖苷酶染色的影响

目的观察正常老化及应激诱导老化（stress—inducedprematuresenescence,SIPS）的小鼠成纤维细胞在不同pH值条件下,衰老相关β-半乳糖苷酶（senescence—associatedp—galactosidase,SA—β-Gal）染色效果的变化规律。方法取新生1～3dC57BL／6小鼠背部皮肤成纤维细胞进行传代培养,UVB照射应激诱导老化细胞,以不同代次的细胞和应激诱导老化细胞为实验对象,进行衰老相关蛋白检测,并在不同pH条件下进行衰老相关β-半乳糖苷酶染色,对其着色情况进行观察和分析。结果在P1代细胞、P6代细胞、应激诱导老化细胞和P12代细胞中,p53／p21蛋白表达依次增多;正常P1代细胞衰老相关β-半乳糖苷酶染色阴性,其余细胞组随着pH值的由低到高（6．0～8．0）,着色情况均呈现由强到弱的变化趋势,P6细胞、SIPS细胞、P12细胞分别在pH7．0、7．5和8．0时阳性染色消失。结论随着细胞衰老程度的增加,衰老相关p一半乳糖苷酶染色将在较高pH时才会呈现假阴性,提示染色时安全pH范围应根据细胞代次而定。     

一测多评法测定吴茱萸中吴茱萸内酯、吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量

目的:建立吴茱萸一测多评的含量测定方法,考察不同类型化合物之间采用相对校正因子进行一测多评含量测定的准确性和可行性.方法:以吴茱萸为研究对象,建立吴茱萸次碱与吴茱萸内酯、吴茱萸碱的相对校正因子,并用该校正因子进行吴茱萸内酯、吴茱萸碱的含量计算,实现一测多评;同时采用外标法测定药材中吴茱萸内酯、吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量,并比较计算值与实测值的差异.结果:11批吴茱萸药材中2种成分含量的计算值与实测值间无显著差异(RSD＜5%).结论:以外标法测定吴茱萸次碱,利用相对校正因子实现对吴茱萸内酯和吴茱萸碱测定是准确的、可行的,一测多评法可以用于特定的不同类型成分间的测定.     

清胰利胆丸联合加贝酯治疗急性胰腺炎的临床研究

目的 探讨清胰利胆丸联合加贝酯治疗急性胰腺炎的临床效果.方法 选取2020年1月—2020年12月河南科技大学第一附属医院收治的80例急性胰腺炎患者,使用随机数字表法将80例患者分成治疗组与对照组各40例.对照组静脉滴注注射用甲磺酸加贝酯,治疗开始3 d内,0.1 g/次,3次/d,之后调整为0.1 g/次,1次/d;...     

丹参-人参组分配伍对肺癌A549增殖、凋亡和骨架的影响

中药组分配伍抗肿瘤研究是近年来治疗恶性肿瘤的新方向。该研究通过正交设计优选丹参-人参活性组分抗肺癌A549的有效配伍,并探讨其对肺癌A549细胞增殖、凋亡和骨架的影响。研究发现,正交设计优选出丹参-人参组分配伍抗肺癌的最佳组合为丹参总酚酸、人参总皂苷和人参多糖的最佳配伍剂量为5,10,5 mg·L-1。并利用CCK-8法结合实时细胞分析技术检测丹参-人参组分配伍对肺癌细胞增殖的量效和时效关系,结果显示丹参-人参组分配伍能以时间和剂量依赖性的方式显著抑制肺癌A549细胞的增殖。进一步采用流式细胞术分析丹参-人参组分配伍对肺癌细胞凋亡的影响和高内涵细胞成像系统分析丹参-人参组分配伍对肺癌细胞骨架蛋白F-actin表达的影响,结果显示丹参-人参组分配伍能够显著诱导肺癌A549细胞凋亡和显著降低肺癌A549细胞骨架的面积,且呈一定的剂量依赖性。综上表明丹参-人参组分配伍能抑制肺癌A549细胞的增殖和生长,具有治疗肺癌的应用前景,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡及减少微丝形成相关。     

HPLC法测定黄连药材及其炮制品中主要生物碱的含量

目的:测定黄连药材及其炮制品中盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量,制定2010年版《中国药典》中黄连及其炮制品的质量标准。方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相为乙腈-50mmol/L磷酸二氢钾溶液(50∶50)(混合液中加15mmol/L十二烷基硫酸钠,再以磷酸调节pH为4.0);流速:0.6mL/min;检测波长:345nm;柱温:30℃。结果:黄连药材中盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量分别不得少于0.93%、1.80%、1.45%、6.00%;黄连饮片、酒黄连、姜黄连和萸黄连中盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱含量分别不得少于0.70%、1.50%、1.10%和5.00%。结论:该方法简便、灵敏、重现性好,适用于黄连及其炮制品质量品质的控制。     

金银花与山银花HPLC指纹图谱比较研究

目的 通过建立HPLC指纹图谱,对金银花与山银花的化学成分进行比较研究.方法 Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm;5μm),乙腈-0.4%的磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长:238 nm,柱温:30 ℃,流速:1 mL/min.结果 建立了金银花与山银花的高效液相指纹图谱,发现成分的相对含量有明显差异.结论 利用HPLC指纹图谱可较全面的反映金银花与山银花间的差异.     

获得性依赖维生素K凝血因子缺乏症62例临床特征及误诊分析

目的 探讨非婴幼儿获得性依赖维生素K凝血因子缺乏症的临床特征及误诊原因.方法 回顾性分析我院诊治的62例获得性依赖维生素K凝血因子缺乏症患者的病因、临床表现、治疗、随访结果及误诊原因.结果 62例患者中51例患者病因不明,11例为杀鼠药中毒.所有患者均同时或先后出现皮肤、黏膜、皮下及关节、肌肉、内脏出血,首发最常见出血症状为血尿;35例(56.5%)失血患者血红蛋白(Hb)＜100g/L,最低仅为32g/L;治疗后患者活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)与治疗前比较差异均有统计学意义[(145.46±43.22)s、(36.62±7.85)s,(107.33±47.38)s、(13.64±4.86)s,(7.63±1.87)、(2.14±0.68),t值分别为19.51、15.49、13.62,P均＜0.01],血小板计数、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg)均正常,患者自出血症状至明确诊断的中位时间为8(2～192)d,其中16例患者出血1～6个月才确诊,首诊误诊率高达61.3%(38/62),误诊为泌尿系统疾病占60.5%(23/38),其次为血友病占21.1%(8/38).所有患者接受维生素K治疗,总疗程为1～22个月,少数严重出血患者同时使用凝血酶原复合物和(或)血浆输注.中位随访时间为8(1～56)个月,无一例患者复发.结论 非婴幼儿获得性依赖维生素K凝血因子缺乏症多数原因不明.首发出血最常见的症状为血尿,本病易误诊,最常见误诊为泌尿系统疾病,早期的凝血功能检测可减少误诊.维生素K序贯治疗可有效防止复发,患者预后良好.

Abstract：

Objective To explore the clinical features and causes of misdiagnosis of the patients with acquired deficiency of vitamin K-dependent coagulation factors (ADVKDCF). Methods Retrospective analysis was performed with the data from 62 patients with ADVKDCF for etiological factors, clinical manifestations,laboratory examinations, diagnosis and treatments. Results Among the 62 patients, 51 patients were with unknown causes( subgroup A) and 11 were with clear histories of anticoagulant rodenticide poisoning( subgroup B). The presentations of hemorrhage of the patients varied with hematuria as the most common first symptom,followed by skin, mucosa, muscle, internal organs bleeding (28/62). The most common hemorrhage symptom is hematuria. 35 of the 62 patients had hemoglobin(Hb) levels less than 100 g/L due to blood loss( the lowest level was 32 g/L). Thirty-eight patients were misdiagnosed at the first visit and the median time from hemorrhage manifestation to definite diagnosis was 8 days (range,2 to 192 days). ADVKDCF was mostly misdiagnosed as the urinary system diseases (23/38), followed by hemophilia (8/38). Laboratory examinations showed normal platelet count , throm bin time (TT) and normal fibrinogen(Fg) concentration, but prolonged plasma prothrombin time (PT), activated partial prothrombin time (APTT) and international normalized ration (INR). All of patients received high dose vitamin K ( intravenous vitamin K1 with a initial dose of 20 to 240 mg/d and then oral vitamin K4 maintenance) . The bleeding symptoms disappeared 1 day after treatment and the Hb levels increased dramatically. There were significant differences in PT, APTT and INR of the patients before and after treatment( P ＜0. 01 ). Followed by a median follow - up of 8 months , no patient had severe adverse effects or recurrence. Conclusion The hemorrhage presentations of the patients with ADVKDCF are various. The most common hemorrhage symptom is hematuria. The misdiagnosis rate of ADVKDCF is high with urinary systems disorders as the most common misdiagnosis. Sequential treatment with vitamin K is an effective and safe method to prevent recurrence. Early detection of coagulation function is helpful to reduce misdiagnosis possibility.     

黄连等6味中药中生物碱苷类成分的发现、分离和结构鉴定

生物碱是许多中药的重要活性成分,生物碱苷是其存在形式之一。因糖单元的引入改善了生物碱苷类成分的水溶性从而呈现更好的生物活性。鉴于生物碱苷在植物体内的含量较低,其研究相对较少。该研究采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS/MS),对含有重要生物碱的6种中药(黄连、黄柏、北豆根、青风藤、金果榄和防己)进行生物碱苷的识别和成分分析,结果表明除金果榄外,其他5种药材均含有生物碱苷,基于在线紫外吸收光谱、一级质谱准分子离子峰、二级质谱碎片离子信息以及相关文献报道,对各药材所含生物碱苷类成分进行鉴定,从中鉴定了42个生物碱苷,其中黄连和北豆根中鉴定出的生物碱苷较多,而黄连中的11个均为潜在的新化合物。进而以黄连为例,采用水煎煮,水提液经大孔吸附树脂粗分,D151阳离子交换树脂、ODS和MCI等柱色谱纯化,结合半制备高效液相色谱,进行目标生物碱苷的分离,得到2个新的生物碱苷,通过质谱、核磁等波谱数据鉴定其结构分别为(S)-7-羟基-1-(对羟基苄基)-2,2-N,N-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和(S)-N-甲基四氢巴马汀红碱-9-O-...     

银杏外种皮的化学成分及其对植物真菌的抑制作用

从银杏外种皮中分离得到9个化合物,运用理化性质和波谱分析的方法分别鉴定为白果醇(1)、棕榈酮(2)、β-谷甾醇(3)、豆甾-3,6-二酮(4)、豆甾-4-烯-3,6-二酮(5)、白果酸(6)、白果新酸(7)、三十烷酸(8)、白果宁(9)。其中,化合物2~5、7~9为首次从银杏外种皮中分离得到,化合物7和9为未见报道的新天然产物。对外种皮中的总白果酸进行了抗植物致病真菌的抑菌试验,证明其具有很强的抗真菌作用,有进一步开发利用价值。