不规则趋化蛋白在嘌呤霉素氨基核苷肾病模型中的表达

目的：检测CX3C族趋化因子不规则趋化蛋白(fractalkine,Fkn)在嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside，PAN)肾病中的表达，进一步阐明肾病的发病机制，为肾病的治疗提供新的靶点。方法：从Wistar大鼠的颈静脉给予PAN，对照组给予等量生理盐水，在不同的时间点观察PAN引起的尿蛋白改变和肾脏炎性细胞浸润情况，并于第l、3、5、7、10天处死动物，制作肾组织匀浆和冰冻切片，分别用于RT-PCR和免疫组化研究，观察在：PAN注射的不同时间点肾组织中Fkn mRNA和蛋白质的表达情况；同时在体外用白介素-1β（IL-1β）刺激培养的肾小管上皮细胞观察Fkn的表达。结果：：PAN注射后第5天尿蛋白开始升高，持续增加直至第10天，同时伴有肾间质中CD4^ T细胞，CD8^ T细胞和单核／巨噬细胞的增加。RT-PCR和免疫组化均显示Fkn在第7、第10天表达升高，第3天主要分布在肾小球，以后主要在肾小管上皮细胞表达。用IL-1β刺激后1h体外培养的肾小管上皮细胞即开始表达FknmRNA，在4～6h达到高峰。结论：本文首次观察到Fkn在PAN肾病模型中表达增高，其特征为先出现于肾小球，后移行至肾小管，并早于肾组织中白细胞浸润及蛋白尿的发生。提示：Fkn可能是肾病发病和进展过程中的另一重要的相关分子。     

胎膜早破105例分析

目的探讨胎膜早破与难产的相关因素及对围生期母婴的影响。方法对105例胎膜早破者进行回顾性分析。结果在胎膜早破的病因中,头盆不称、胎位异常等所致的胎膜受力不均占首位,胎膜早破组的难产率、产褥病率明显高于对照组。结论对胎膜早破的孕妇应严密观察,积极处理,可减少母婴并发症,母婴预后良好。     

LonP1表达与线粒体稳态以及精子活力的关联性研究

目的探究线粒体lon蛋白水解酶(LonP1)对精子线粒体稳态的维持调节作用及其可能存在的调节机制。方法收集2016年6月至2017年6月于温州医科大学附属第一医院生殖中心进行精液常规检查的120名男性精液标本,根据精子活力分为正常活力精子(NS)和弱精子症精子(AS)两组,采用计算机辅助精液分析系统(CASA)检测各组精子运动参数,通过免疫荧光法和免疫蛋白印迹法检测精子中LonP1的蛋白表达水平,流式细胞术检测各组精子的线粒体膜电位强度(MMP,以绿色荧光强度/红色荧光强度比值表示,比值越小代表膜电位越高)和线粒体内活性氧(mROS)水平,比较两组各指标参数差异,并分析LonP1表达水平和精子活力及精子线粒体功能相关指标(MMP,mROS)的关联性。另外,NS组精液经密度梯度离心法处理后,沉淀精子加入培养液重悬,以LonP1功能抑制剂CDDO-ME 2.5μmoL/L和5μmol/L为终浓度进行体外培养,同时设置空白对照组(0μmol/L),比较各组精子运动参数、LonP1表达水平以及精子线粒体功能相关指标。结果 (1)人类成熟精子中存在LonP1的表达,且稳定表达于精子中段的线粒体鞘部;(2)NS组和AS组精子LonP1表达水平(0.52vs.0.22)与精子活力(69.89%vs.26.10%)、MMP(4.72%vs.12.73%)呈正相关(P0.05),与mROS含量呈负相关(418.85vs.460.52)(P0.05);(3)经LonP1功能抑制剂CDDO-ME处理后,与空白对照组比较,CDDO-ME药物处理组的LonP1蛋白表达水平随CDDO-ME作用浓度增加而显著降低(P0.05),5μmol/L浓度组的MMP水平显著下降(78.81%vs.7.34%)、mROS含量增加(640.68vs.462.26),差异均有统计学意义(P0.05);(4)CDDO-ME处理后,除精子活率(PR+NP)外,精子运动参数平均路径(VAP)和曲线速率(VSL)均随CDDO-ME作用浓度增加而下降(P0.05),与空白对照组相比,5μmol/L浓度组的精子活力(PR)(52.08%vs.65.15%)、曲线速率(VCL)(48.28μm/s vs.78.78μm/s)、侧摆幅度(ALH)(1.28μm vs.1.93μm)、直线性(LIN)(38.83%vs.56.05%)和前向性(STR)(45.53%vs.81.25%)均显著下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论精子线粒体鞘部存在LonP1的稳定表达,LonP1能够通过精子线粒体稳态维持改善精子活力。     

两种不同胚胎培养模式对体外胚胎发育和妊娠结局的影响

目的:比较2种胚胎培养模式对胚胎质量和妊娠结局的影响。方法:收集首次行IVF-ET治疗、年龄38岁、采用长方案促排卵、常规IVF授精、正常受精卵数3枚且第3日有新鲜胚胎移植的518个周期的临床资料,根据正常受精卵采用的培养模式分成单胚胎培养组(n=254)和胚胎群组培养组(n=264)。分析患者的基本资料、胚胎发育情况以及妊娠结局。结果:患者的年龄、不孕年限、基础卵泡刺激素(FSH)、Gn用量、h CG注射日内膜厚度以及各种不孕因素的比例等参数组间差异均无统计学意义(P0.05);平均获卵数、成熟率、2PN率等指标组间也均无统计学差异(P0.05),但胚胎群组培养组的卵裂率、第3日优质胚胎率、剩余胚胎可利用囊胚形成率均明显高于单胚胎培养组,差异有统计学意义(P0.05);胚胎群组培养组的种植率和临床妊娠率高于单胚胎培养组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:采用胚胎群组培养模式可以得到更多的优质胚胎和更高的囊胚形成率,推荐可用于日常IVF治疗周期中的胚胎培养。     

更换连接器解决分体式PICC导管堵管的经验

经外周置入中心静脉导管(PICC)在临床的应用日趋广泛,但亦存在一些并发症和危险[1],其中导管堵塞是困扰医务人员的主要问题之一,发生率可达21.3%[2]。我院每年行PICC     

稳定表达淋巴细胞趋化因子的大鼠系膜细胞载体的构建

目的 探讨以肾小球系膜细胞作为高表达大鼠淋巴细胞趋化因子(Lm)的载体的可行性，从而为深入研究淋巴细胞趋化因子的作用和体内活性创造条件。方法 采用RT-PCR法获得大鼠的Ltn的编码区全长的cDNA序列；应用基因重组技术和限制性内切酶酶切法构建并鉴定pcDNA3．1／Lm真核表达载体；用LipofectAMINEPUUS脂质体转染法将构建的质粒及空质粒瞬时转染于SKOV3细胞；用RT—PCR和ELISA法检测Ltn mRNA及蛋白质水平的表达，进而用pcDNA3．1／LacZ和pcDNA3．1／Ltn稳定转染原代培养的WKY大鼠肾小球系膜细胞，用潮霉素B筛选获得稳定表达报告基因LacZ和大鼠Ltn的细胞克隆。结果 测序结果显示质粒载体中正确地插入了大鼠Lm的编码基因；RT-PCR显示在瞬时转染的SKOV3细胞和稳定转染的4个系膜细胞克隆中Ltn mRNA表达增高；ELISA证实细胞培养上清中Ltn的蛋白质浓度较对照组明显升高。此外，X-gal染色显示获得了2个稳定表达β-半乳糖苷酶基因的系膜细胞克隆。结论 本研究成功地构建了真核表达质粒载体pcDNA3．1／hygro／Ltn，获得了稳定表达大鼠Lm的肾小球系膜细胞克隆，并在mRNA及蛋白质水平上证实了Lm的表达，为进一步研究Lm的体内活性奠定了基础。     

MEBO处理宫颈环形电切术后创面的疗效观察

目的 观察湿润烧伤膏(MEBO)处理宫颈环形电切术后创面的临床疗效.方法 2008年5月～2010年5月,182例宫颈疾病患者行宫颈环形电切术后随机分为两组:A组90例,B组92例,A组术后宫颈创面外涂MEBO,B组术后宫颈创面以明胶海绵填塞,观察两组术后副反应及创面愈合情况.结果 A组术后阴道出血持续时间,阴道流液时间,术后创面愈合时间均较B组明显缩短(P<0.005),术后宫颈管黏膜外翻及宫颈息肉样增生明显低于B组(P<0.01).结论 宫颈环形电切术后创面运用MEBO处理,能减轻宫颈环形电切术后副反应,缩短宫颈创面愈合时间,方法简便易行.     

清洗、消毒、灭菌的质量监测管理及应用

消毒供应室是医院无菌医疗器材的供给中心,保证无菌物品的质量是供应室工作的核心,我院中心供应室不仅担负着医疗、护理、教学、科研物品的供给任务,同时负责整个医院手术室的清洗、打包、灭菌工作.清洗不彻底常常是导致灭菌失败的主要原因,要达到灭菌要求,必须严格控制清洗质量,注重清洗效果,才能确保达到最佳清洗质量.     

全反式维甲酸对大鼠嘌呤霉素氨基核苷肾病蛋白尿的抑制作用

近年来,全反式维甲酸(全反式视黄酸,all-trans retinoic acid,ATRA)用于某些实验性增生性肾炎的治疗取得了良好的效果。引起了人们极大的兴趣。本文报告小剂量ATRA对大鼠非增生性嘌呤霉素氨基核苷肾病的改善作用。     

慢性前葡萄膜炎并发白内障超声乳化联合人工晶体植入术的临床应用

2003—2005年,我们对于此类患者28例（30眼）慢性前葡萄膜炎并发白内障患者实施超声乳化联合人工晶体植入术,取得满意疗效。现报告如下。