胰腺癌黏蛋白4基因修饰的树突状细胞疫苗构建及对胰腺癌细胞的免疫效应

Objective To obtain the dendritic cells ( DC)-based vaccine modified by adenovirus containing MUC4 gene , and evaluate the anti-tumor efficacy of DC vaccine to pancreatic tumor cells. Meth-ods The mRNA sequence of tumor associated antigen, MUC4, was obtained from NCBI, and MUC4 se-quence was acquired through the restriction enzyme sites and over lap PCR, then subcloned into adenovirus plasmid to create recombinant adenovirus ( rAd-MUC4) . The DCs were infected by rAd-MUC4 virus and then stimulated the lymph cells from the same donor to induce MUC4 specific cytotoxicity T lympbocytes ( CTL) . The efficacy of CTL was analyzed by LDH releasing assay. Elispot was used to detect the IFN-γ release. Results The recombinant adenovirus containing MUC4 ( sv12) gene was obtained. The MUC4-induced CTL could specifically kill the Capan-1 pancreatic tumor cells [ ( 13. 7±6.0)% , ( 21.4± 4. 7)% , (36.1±9. 5)% at ratios of 10: ,20: ,40: ] , higher than MCF-7 and Bxpc-3 cells respectively, P < 0. 05. The spots number of CTL induced by rAd-MUC4 was ( 139.1±23.3) , more than GFP and PBS control group,P<0.05. Conclusion The Muc4 gene modified DC vaccine could induce the proliferation of CTL, which provided a significant cytotoxicity to HLA-matched MUC4 positive tumor cell lines in vitro.     

正脊疗法治疗椎动脉型颈椎病

椎动脉型颈椎病,是颈椎病的一种常见类型。以头晕、头痛、视物模糊,或突然摔倒、心悸、恶心、甚则呕吐,颈部功能活动受限、酸痛沉胀,颈部活动时症状加重等为特点。随着社会生活节奏的加快,工作方式的变化,其发病率有上升和发病年龄年轻化的趋势。严重影响了人们的生活和工作,对人们的身心健康和生活质量造成潜在的威胁。因此对它的防治已成为社会热点问题,在医学界也倍受国内外医学专家的高度重视和研究。予采用正脊疗法治疗椎动脉型颈椎病,取得了理想的治疗效果。兹作一小结,望同道斧之。1临床资料1.1一般资料本组患者100例,均为我科门诊20…     

急性坏死性胰腺炎合并大出血的单中心回顾性研究

目的探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)合并大出血的临床特征, 并分析其诊疗方法及效果。方法回顾性分析2015年9月至2020年12月南京医科大学第一附属医院胰腺中心收治的44例ANP合并大出血患者的临床资料, 其中男性34例, 女性10例, 年龄(48.9±12.2)岁。收集患者的出血部位、出血干预措施以及治疗结果等临床资料。采用电话或门诊复诊的方式随访。结果在44例ANP合并大出血患者中, 胃肠道出血8例, 腹腔内出血31例, 混合型出血5例。ANP起病至发生出血的时间间隔为30.5(20.8, 43.0)d。胃肠道出血和混合型出血的13例患者中:4例因上消化道溃疡在内镜下成功止血;5例数字减影血管造影(DSA)检查发现出血后, 经血管内栓塞成功止血;4例通过外科手术止血成功。在31例腹腔内出血患者中:24例进行DSA检查;7例未行DSA(3例因血流动力学趋于稳定予保守治疗;2例因胰腺坏死感染手术清创后24 h内出血予立即开腹手术止血;1例因家属放弃治疗未行DSA;1例在准备DSA时死亡)。在29例进行DSA的患者中, 69.0%(20/29)的患者发现了血管异常, 其中脾动脉出血最为常...     

动脉自旋标记脑灌注技术在快速动眼睡眠障碍研究中的应用

目的:采用磁共振动脉自旋标记技术(ASL)对快速动眼睡眠障碍(R BD)患者的脑血流灌注异常情况进行研究,探讨ASL的应用价值。方法:我们的研究包括经同步视频多导睡眠监测(PSG)证实的原发性RBD患者20例及年龄、性别与RBD患者匹配的健康志愿者15例。所有的被试均在GE Discovery MR750磁共振扫描仪上进行ASL序列和3D-BRAVO序列的扫描。ASL的数据分析采用基于体素的方法在SPM8软件上进行。RBD组和对照组被试脑皮质灌注的差异采用双样本t检验进行分析。结果:RBD患者皮质灌注增高的区域主要位于额叶、前扣带皮质、辅助运动区、壳核、海马旁回、楔前叶和脑桥等;皮质灌注降低的区域主要位于枕叶、舌叶、颞叶中部等。结论:ASL技术可以发现RBD患者的灌注异常,在神经退行性病变的研究方便有较大的应用价值。     

急进高原遂行任务对汽车兵心理应激和心理弹性的影响

目的探讨由低海拔环境急进高海拔环境遂行军事运输任务对汽车兵心理应激与心理弹性的影响,为高原汽车兵心理应激干预提供科学依据。方法以由低海拔环境急进高海拔环境执行军事运输任务的川藏线某部汽车兵126人为研究对象,选取症状自评量表(SCL-90)、状态-特质焦虑问卷(STAI)、特质应对方式问卷(TCSQ)、艾森克个性问卷(EPQ)、心理弹性量表(CD-RISC)作为心理应激及复原力指标,在执行任务前3 d(营区,海拔600 m)、执行任务后第2 d(藏区,海拔4100 m)进行团体心理测试。结果 (1)执行任务后,汽车兵SCL-90总均分(1.92±0.67)及各因子分均显著高于执行任务前和常住高原汽车兵(P<0.05或P<0.01);CD-RISC中坚韧性、力量、乐观因子分及TCSQ中积极应对因子分均显著低于执行任务前(P<0.05或P<0.01);TCSQ中消极应对因子分及STAI中状态焦虑、特质焦虑因子分均显著高于执行任务前(P<0.05或P<0.01)。(2)执行任务后汽车兵SCL-90总分及STAI因子分与消极应对、稳定性及精神质因子分呈显著正相关(r=0.214~0.715,P<0.01),与积极应对、内外向、掩饰性、坚韧性、乐观性、力量性因子分呈显著负相关(r=-0.169~-0.599,P<0.01)。回归分析结果显示,对执行任务后汽车兵SCL-90总分有显著影响的因素依次为:消极应对、特质焦虑、乐观性、状态焦虑、稳定性、坚韧性、精神质,7个变量的决定系数R2=0.65。结论急进高海拔环境执行军事运输任务后,汽车兵心理健康水平降低;人格特质、应对方式和心理弹性是影响汽车兵心理应激和心理健康的重要中介调节因素。     

细胞周期蛋白D1在三氧化二砷抑制人胆囊癌细胞生长中的作用

目的 探讨细胞周期蛋白(Cyclin)D1在三氧化二砷(As2O3)抑制人胆囊癌细胞体外生长中的作用.方法 不同浓度的As2O3作用于胆囊癌细胞GBC-SD,MTT法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期分布.Western印迹和RT-PCR检测Cyclin D1、D2、D3和CDK4、K6的蛋白和mRNA表达.构建Cyclin D1的表达质粒并转染GBC细胞,观察Cyclin D1过表达时细胞周期的变化.结果 As2O3能抑制胆囊癌细胞生长,作用呈时间、剂量一效应关系;流式细胞仪检测发现As2O3可将增殖过程中的胆囊癌细胞阻滞于G1期;Western印迹及RT-PCR检测显示Cyclin D1表达下降;过表达Cyelin D1逆转了As2O3对细胞周期的改变.结论 Cyclin D1在As2O3抑制人胆囊癌细胞的生长中起重要作用.     

胆胰部位结核6例分析

目的 探讨胆胰部位结核的临床和病理特征,提高对该病的诊治水平.方法 回顾性分析复旦大学附属中山医院经手术证实的6例胆胰部位结核误诊为恶性肿瘤病例的临床资料.病人均为中青年,临床表现为黄疸、发热及腹痛.术前影像学检查提示局限性胆管狭窄伴近端肝内外胆管扩张;胆胰周围淋巴结结核病人还表现为胆胰周围实质性占位;胰腺结核病人可见胰头占位伴胰周淋巴结肿大;胆管结核病人胆管周围及十二指肠圈软组织影增多.6例术前均误诊癌肿而行手术探查由病理确诊,术后均予抗结核治疗.结果 经随访所有病例胆胰周围肿块明显缩小,黄疸、发热等临床症状消失.结论 胆胰部位结核与胆胰恶性肿瘤具有相似的临床表现和影像学特征,在术前难以鉴别,常需术中或术后病理检查确诊.经手术或内镜进行有效的支撑和引流胆道,术后积极的抗结核治疗是治愈胆胰结核的关键.     

肝门部胆管癌的治疗

目的探讨肝门部胆管癌的治疗方法。方法回顾性分析我院1996，2004年间52例肝门部胆管癌患者的临床病例资料。I型癌肿切除率最高，Ⅳ型癌肿切除率最低。结果本组52例肝门部胆管癌中，围手术期死亡2例，均死于肝肾功能衰竭，余50例中31例术后获得随访，失访19例，随访率为62％。结论疑似或诊断肝门部胆管癌应早期积极手术探查，争取行根治性切除术；肝门部胆管癌肿瘤切除疗效明显优于其他治疗方式。     

γ干扰素对瘢痕疙瘩成纤维细胞转化生长因子β/Smad信号通路的作用

目的 了解γ干扰素(IFN-γ)对瘢痕疙瘩Fh(KFb)中TGF-β/Smad信号通路的作用,探讨IFN一γ治疗病理性搬痕的可能机制. 方法 切取3例患者的瘢痕组织,体外分离培养KFb,实验选用第3～5代细胞.(1)将KFb分为:对照组,加无血清DMEM培养;TGF-β_1组,用10 ng/mL的TGF-β_1单独作用;IFN-γ组,用100 ng/mL的IFN-γ单独作用;TGF-β_1+IFN-γ组,10 ng/mL的TGF-β_1与100 nS/mL的IFN-γ联合作用.采用实时荧光定量RT-PCR、蛋白质印迹法和免疫荧光细胞化学染色法,分别检测结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA、蛋白表达,以及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达与阳性细胞表达情况.(2)另取KFb,用10 ng/mL的IFN-γ作用,于作用前及作用后30 min和1、2、4、6、8 h通过实时荧光定量RT-PCR检测Smad 3和Smad 7的mRNA表达,于作用前及作用后1、2、4、6、8 h用蛋白质印迹法检测Smad 3和Smad 7的蛋白表达.(3)另取KFb,根据添加的IFN-γ终浓度不同分为1、10、100 ns/mL IFN-γ组,均作用4 h;设立未添加IFN-γ的KFb为对照组.同前检测各组Smad 3和Smad 7的mRNA及蛋白表达. 结果 (1)IFN-γ组KFb CTGF的mRNA和蛋白表达量为0.017±0.009与1.198±0.004,较对照组(0.024±0.013与1.229±0.011)显著减少(P<0.05);TGF-β1+IFN-γ组CTGF的mRNA和蛋白表达量为0.634±0.138与1.204±0.010,较TGF-β_1组(1.331±0.298与1.727±0.004)显著减少(P<0.01).IFN-γ组KFb中,α-SMA阳性细胞荧光强度(0.922±0.059)和α-SMA蛋白表达量(0.3051±0.0031)较对照组(1.055±0.005与0.4513±0.0094)显著减少(P<0.01);TGF-β1+IFN-γ组SMA阳性KFb荧光强度(1.129±0.004)和SMA蛋白表达量(0.6734±0.0098)较TGF-β_1组(1.270±0.005与1.38420.0024)显著减少(P<0.01).(2)10 ng/mL IFN-γ作用后第1个时相点,Smad 3的mRNA和蛋白表达量均出现一过性增高,随后降低,mRNA表达量于作用后4 h降至最低点,随后缓慢上升,至作用后8 h仍低于作用前(P<0.01);其蛋白表达量于作用后2~8 h显著低于作用前(P<0.01).而Smad 7的mRNA和蛋白表达量在INF-γ作用后逐渐增高,分别于作用后2、4 h达峰值随后降低,至作用后8 h仍高于作用前(P<0.05).(3)与对照组比较,1、10、100 ng/mL IFN-γ组Smad 3的mRNA及蛋白表达量显著减少(P<0.05或P<0.01),Smad 7的mRNA及蛋白表达量显著增加(P<0.05或P<0.01),且随IFN-γ浓度升高,减少或增高幅度愈为显著. 结论 IFN-γ呈时间和剂量依赖方式下调Smad 3、上调Smad 7,降低基础状态下或经TGF-β_1诱导后KFb的CTGF和α-SMA表达量,表现出对TGF-β/Smad 信号通路的显著拮抗作用,这可能是IFN-γ治疗病理性瘢痕的重要机制.